水貂出血性肺炎是嚴(yán)重危害水貂養(yǎng)殖業(yè)的重要疾病之一,傳統(tǒng)上認(rèn)為是由綠膿桿菌（Pseudomonas aeruginosa,P.aeruginosa）感染引起,但近年來(lái)研究表明P.aeruginosa單一感染不易引起水貂出血性肺炎,應(yīng)該還有其他的原因。甲型流感病毒（Influenza A virus,IAV）和細(xì)菌共感染會(huì)影響宿主感染的過(guò)程和嚴(yán)重程度。近年來(lái),IAV和細(xì)菌的共感染已成為研究前沿。本實(shí)驗(yàn)室前期研究表明H9N2 IAV在水貂中流行,可引起輕度呼吸道疾病。為了探究H9N2 IAV和綠膿桿菌共感染是否能夠?qū)е滤醭鲅苑窝?開展了該項(xiàng)研究。用本實(shí)驗(yàn)室分離保存的H9N2 IAV（Mk/SD/F10/13株）與綠膿桿菌（P.aeruginosa-CS-2株）,進(jìn)行H9N2 IAV和綠膿桿菌不同順序共感染水貂的致病性研究,分別設(shè)H9N2 IAV和綠膿桿菌同時(shí)共感染、H9N2 IAV繼發(fā)綠膿桿菌感染、綠膿桿菌繼發(fā)H9N2 IAV感染組,同時(shí)設(shè)H9N2 IAV和綠膿桿菌單一感染對(duì)照,接種PBS水貂作為陰性對(duì)照。在實(shí)驗(yàn)期間,觀察檢測(cè)水貂的臨床癥狀與病理變化,定期采集水貂的鼻洗液、血清、組織（心... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

病毒增強(qiáng)細(xì)菌繼發(fā)感染的潛在機(jī)制Fig.1Potentialmechanismofvirusenhancingbacterialsecondaryinfection

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文5圖2細(xì)菌暴露對(duì)呼吸道病毒感染反應(yīng)的影響Fig.2Effectsofbacterialexposureonrespiratoryvirusinfection健康微生物組（常駐細(xì)菌）可以改變機(jī)體對(duì)感染病毒和細(xì)菌病原體的敏感性，并可能與“入侵”（可能有害）的微生物競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并合成多種有益的生物分子，例如維生素（Kamadaetal.,2013）。健康的常駐細(xì)菌有助于建立平衡的免疫表型。研究表明，共生細(xì)菌在上呼吸道的定殖可以將單核細(xì)胞募集進(jìn)入肺中并誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞M2表型，進(jìn)而降低了流感誘發(fā)的小鼠急性肺損傷和死亡率（Wangetal.,2013）。病原細(xì)菌感染宿主后能產(chǎn)生一些物質(zhì)促進(jìn)病毒的感染。例如，S.aureus產(chǎn)生的細(xì)菌蛋白酶可以將流感病毒新生的HA從其基礎(chǔ)狀態(tài)裂解為融合活性復(fù)合物，進(jìn)而增加病毒的滴度和傳播（Tashiroetal.,1987）。同樣，肺炎球菌產(chǎn)生的溶血素也能促進(jìn)病毒的擴(kuò)散（Lffleretal.,2013;Wolfetal.,2014）。病原菌感染后造成宿主組織損傷，使病毒進(jìn)入的受體暴露或表達(dá)增加。如呼吸道上皮細(xì)胞暴露于流感嗜血桿菌可增加人輪狀病毒（HRV）的主要受體-細(xì)胞間粘附分子（ICAM-1）的表達(dá)，增加了這種病毒的結(jié)合和復(fù)制（Sajjanetal.,2006;Gulraizetal.,2015）。另外，病原菌可通過(guò)影響免疫反應(yīng)的發(fā)展來(lái)改變機(jī)體對(duì)病毒的應(yīng)答（Ichinoheetal.,2011;Abtetal.,2012）。例如，CF患者被綠膿桿菌定植后降低了IFN的表達(dá)（Chattorajetal.,2011）。上皮細(xì)胞預(yù)先暴露于綠膿桿菌可以增強(qiáng)炎性細(xì)胞因子的釋放，促炎細(xì)胞因子IL-6的表達(dá)與病毒感染后病情加重之間

蕉?┮蕩笱?妒墾?宦畚?71.2.2流行病學(xué)H9N2流感病毒雖然屬于低致病性流感病毒，但具有流行和傳播范圍大、分布廣泛、危害持久且難以控制的特點(diǎn)。1966年，H9N2流感病毒首次在美國(guó)威斯康星的火雞中被發(fā)現(xiàn)，分離的毒株命名為A/turkey/Wisconsin/1966（H9N2），感染火雞主要呈輕微的呼吸道癥狀（HommeandEasterday,1970）。隨后，H9N2流感病毒又從健康野鴨與鵪鶉中分離，并證實(shí)野鴨可以作為其貯存庫(kù)（Sharpetal.,1997;Perezetal.,2003）。20世紀(jì)90年代以來(lái)，H9N2流感病毒已經(jīng)引起世界各地多個(gè)種屬動(dòng)物的流感爆發(fā)（圖3）。圖31997年到2013年報(bào)道的H9N2流感病毒在人類和動(dòng)物全球分布（引自Khanetal.,2015）Fig.3ReportedglobaldistributionforH9N2influenzavirusinhumansandanimalsfrom1997to2013.注：橘黃色代表禽中檢測(cè)到H9N2流感病毒的國(guó)家；當(dāng)一個(gè)人或者動(dòng)物被發(fā)現(xiàn)H9N2血清學(xué)陽(yáng)性，標(biāo)記為綠色；如果檢測(cè)到病毒陽(yáng)性樣品，標(biāo)記為紅色。Note:TheorangecolorrepresentsthecountrywheretheH9N2influenzavirusisdetectedinbirds;whenapersonoranimalisfoundtobeH9N2serologicallypositive,itismarkedgreen;ifavirus-positivesampleisdetected,itismarkedred.1992年，陳伯倫等首次從國(guó)內(nèi)的雞中分離到H9N2流感毒株（陳伯倫，1997）；從1994年以后，H9N2流感病毒開始在我國(guó)內(nèi)地的一些地區(qū)流行，唐朝英等先后將多株H9N2的流感病毒從發(fā)病雞、鴨和鵪鶉的體內(nèi)分離（唐朝英，1998；田國(guó)斌，1999）；1997年，陳福勇等在華北地區(qū)某雞場(chǎng)中分離出H9N2流感病毒（陳福勇，1999)；劉紅旗等自1996年至2001年，從中國(guó)大陸分離到多株H9N2流感病毒，并證明分離的所有的毒株具有較高的同源性。2000年以后，李曦等人分別從鷹、鴿子、豬、家禽等動(dòng)物體內(nèi)檢測(cè)到H9N2流感病毒

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