山東省肉雞年出欄量達(dá)16.48億只,雞肉產(chǎn)量達(dá)232.8萬(wàn)噸,居全國(guó)首位,是我國(guó)的肉雞產(chǎn)業(yè)大省。肉雞養(yǎng)殖業(yè)大發(fā)展同時(shí),動(dòng)物疾病、畜禽廢棄物污染、畜禽產(chǎn)品食品安全與品質(zhì)等養(yǎng)殖業(yè)的難題也伴隨產(chǎn)生。大腸桿菌（Escherichia coli）廣泛存在于整個(gè)飼養(yǎng)環(huán)節(jié),乃至于食品鏈中。致病性大腸桿菌引起的禽類(lèi)感染,是養(yǎng)殖業(yè)的難題之一,耐藥性的增加使該菌的防控變得更困難。不同來(lái)源的E.coli之間,甚至E.coli和其它細(xì)菌之間也存在廣泛的耐藥基因的轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致E.coli的耐藥性問(wèn)題,不僅造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,還會(huì)引發(fā)食品安全問(wèn)題和公共衛(wèi)生問(wèn)題,危害人類(lèi)健康。在世界各國(guó)一致認(rèn)為細(xì)菌耐藥性的問(wèn)題會(huì)深遠(yuǎn)影響世界經(jīng)濟(jì)的背景下,E.coli的耐藥性問(wèn)題成為了研究的熱點(diǎn)。經(jīng)國(guó)內(nèi)外研究人員對(duì)E.coli耐藥性不斷監(jiān)測(cè)和研究發(fā)現(xiàn),E.coli的耐藥性逐年趨向復(fù)雜化和嚴(yán)重化。但是對(duì)山東地區(qū)肉雞源E.coli在一個(gè)養(yǎng)殖周期內(nèi)的變化及耐藥特征研究尚未有報(bào)道。本次研究在山東省的泰安（Farm 1）、臨沂（Farm 2）、聊城（Farm 3）、濰坊（Farm4）、濱州（Farm 5）和菏澤（Farm 6）六個(gè)地區(qū)各選一個(gè)肉... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

大腸桿菌造成的肝周炎、心包炎Fig.1PerihepatitisandpericarditiscausedbyE.coli

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專(zhuān)業(yè)學(xué)位論文152材料與方法2.1材料2.1.1樣本采集山東省位于中國(guó)東部沿海、黃河下游，總面積15.7萬(wàn)平方公里，轄16個(gè)地級(jí)市。本次研究選擇了泰安（Farm1），臨沂（Farm2），聊城（Farm3），濰坊（Farm4），濱州（Farm5）菏澤（Farm6）六個(gè)常規(guī)肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)（見(jiàn)圖2）進(jìn)行E.coli流行情況調(diào)查。所有被調(diào)查的的雞群的養(yǎng)殖周期約為40天。Farm1至Farm6從每個(gè)養(yǎng)雞場(chǎng)中隨機(jī)選擇兩個(gè)雞舍，在養(yǎng)殖周期的三個(gè)時(shí)間點(diǎn)（雛雞孵化后的1至2天，17至20日齡和35至40日齡）進(jìn)行采樣(采樣點(diǎn)背景資料見(jiàn)附表1)。從2019年5月至7月，在Farm1、Farm2、Farm3、Farm4、Farm5和Farm6六個(gè)養(yǎng)雞場(chǎng)共采集了近700多份樣本。在每次采樣過(guò)程中，每棟雞舍隨機(jī)選取20只雞，用棉簽采集肛門(mén)拭子樣本；從4處不同的地點(diǎn)采集4份糞便樣本（約0.5g），分別置于2ml無(wú)菌離心管中；隨機(jī)選取兩處投水器，用2ml無(wú)菌離心管收集2個(gè)飲用水樣本；用棉簽拭子采取2處墻表面樣本；雞舍內(nèi)外各兩處放置LB平板，敞口放置15min左右采集空氣中細(xì)菌樣本。所有棉簽提前用液體LB浸濕滅菌，離心管滅菌。各種棉簽拭子樣本置于2ml離心管中存放。所有采樣后的樣品在到達(dá)實(shí)驗(yàn)室處理之前放置于4℃保溫箱內(nèi)。圖2山東省內(nèi)采樣點(diǎn)的分布情況Fig.2distributionofsamplingpointsinShandongProvince

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專(zhuān)業(yè)學(xué)位論文213結(jié)果與分析3.1E.coli的初步篩選如圖3所示，是某一疑似E.coli的菌落，經(jīng)反復(fù)劃線純化后的結(jié)果。在麥康凱培養(yǎng)基上培養(yǎng)12h左右，呈現(xiàn)粉紅色的，圓形隆起、光滑濕潤(rùn)、邊緣整齊的菌落。選擇單菌落挑起進(jìn)行下一步的微生物質(zhì)譜儀鑒定。圖3E.coli在麥康凱培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)表現(xiàn)Fig.3GrowthcharacteristicsofE.colionMacconkeymedium3.2E.coli的鑒定采取微生物質(zhì)譜儀的自動(dòng)檢定系統(tǒng)（布魯克IVDMALDIBiotyper）對(duì)疑似菌落進(jìn)行鑒定，結(jié)果是以報(bào)告表格的形式輸出。得分大于2.0可以得到可靠的種屬水平鑒定結(jié)果。如圖4所示，是部分的鑒定結(jié)果。圖中顯示的5個(gè)被檢樣品得分均大于2.0，結(jié)果可靠。其中A2，A3，A5鑒定結(jié)果是E.coli，A1與A4是非E.coli。圖4微生物質(zhì)譜儀鑒定部分結(jié)果Fig.4TheidentificationresultsverifiedbyIVDMALDIBiotyper

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)菌耐藥耐受性機(jī)制的最新研究進(jìn)展[J]. 李昕,曾潔,王岱,薛云新,趙西林.  中國(guó)抗生素雜志. 2020(02)
[2]雞源大腸桿菌分離鑒定及ESBLs與AmpC酶基因型檢測(cè)及耐藥性分析[J]. 馬馨,劉一飛,王志宇,任彬琳,陳澤,杜彬,張菁.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2019(09)
[3]山東地區(qū)雞源大腸桿菌中超廣譜β-內(nèi)酰胺酶和磷霉素耐藥基因的流行性研究[J]. 王志浩,顏碩,王昱瓔,劉寶濤.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2019(07)
[4]北京地區(qū)健康鴨腸道大腸桿菌血清型鑒定和耐藥性分析[J]. 劉硯涵,張建偉,林嘉寶,宮曉瑋,夏兆飛.  中國(guó)家禽. 2019(12)
[5]唐山和秦皇島地區(qū)肉雞源致病性大腸桿菌耐藥性與耐藥基因的檢測(cè)[J]. 李蘊(yùn)玉,葛成,焦賀靜,張香齋,賈青輝,李佩國(guó),張建文,張召興.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2019(12)
[6]重慶地區(qū)雞源大腸桿菌、沙門(mén)氏桿菌耐藥性的測(cè)定與分析[J]. 陳春林,馮剛,秦楊,付利芝.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2019(12)
[7]山東地區(qū)雞源致病性大腸桿菌的相關(guān)基因檢測(cè)及藥敏試驗(yàn)[J]. 張子越,趙魯,趙巧雅,王雷,齊霖,彭燕,商敏,許薔,路曉,吳靜.  家禽科學(xué). 2019(06)
[8]泰安渿河中產(chǎn)ESBLs大腸桿菌耐藥性及耐藥基因的傳遞規(guī)律[J]. 衣首靜,劉青霄,蔣智宇,孫淑紅.  微生物學(xué)報(bào). 2019(11)
[9]畜禽糞污源抗生素及耐藥基因在環(huán)境中的歸趨[J]. 黃榮才,高勝濤,范士杰,馬露,卜登攀.  生物技術(shù)進(jìn)展. 2019(02)
[10]濰坊某雞場(chǎng)大腸桿菌耐藥性及血清型檢測(cè)[J]. 王佳,于杰,鄒玲,劉文華,張燦,任慧英.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2018(22)

博士論文
[1]抗生素及其耐藥性在畜禽糞便-土壤-蔬菜中的傳播和轉(zhuǎn)移[D]. 張昊.河南師范大學(xué) 2018
[2]我國(guó)肉雞產(chǎn)業(yè)高致病性禽流感影響與防控的經(jīng)濟(jì)研究[D]. 黃澤穎.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]牦牛、牧民源大腸桿菌分離鑒定、耐藥基因檢測(cè)、PFGE分析及耐藥性傳遞的研究[D]. 羊云飛.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]禽致病性大腸桿菌DE205B黏附及侵襲相關(guān)因子的致病作用[D]. 王少輝.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]家庭式養(yǎng)殖地區(qū)多環(huán)境介質(zhì)中攜帶mcr-1大腸埃希菌的流行特征[D]. 姬祥.山東大學(xué) 2019
[2]魯西南地區(qū)畜禽大腸桿菌mcr-1耐藥基因攜帶情況調(diào)查[D]. 鄭常委.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[3]多重耐藥肺炎克雷伯菌KP1276的耐藥性與水平轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究[D]. 祝力騁.浙江大學(xué) 2019
[4]山東商品雞養(yǎng)殖、屠宰、銷(xiāo)售環(huán)節(jié)中細(xì)菌耐藥性傳播規(guī)律研究[D]. 張利鋒.中國(guó)疾病預(yù)防控制中心 2016
[5]山東部分地區(qū)肉雞大腸桿菌病耐藥性檢測(cè)及臨床治療研究[D]. 樊愛(ài)麗.吉林大學(xué) 2015
[6]泰安地區(qū)肉雞大腸桿菌病病原血清型鑒定及藥敏試驗(yàn)[D]. 趙啟會(huì).山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[7]泰安地區(qū)雞源大腸桿菌的分離鑒定與耐藥性分析[D]. 宿志民.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3260279