興安落葉松（Larix gmelinii）為松科、落葉松屬落葉喬木,主要生長在中國東北地區(qū),其結(jié)構(gòu)致密,可為土木、建筑和化纖工業(yè)提供原料,具有廣泛應(yīng)用價值。尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶（UDP-glucose dehydrogenase,UGDH）是植物多糖代謝途徑中關(guān)鍵酶,UGDH催化尿苷二磷酸葡萄糖（UDP-Glc）脫氫生成UDP-葡萄糖醛酸酯（UDP-GlcA）,UDP-GlcA是細胞壁中半纖維素的主要生物合成前體物質(zhì),其對林木材質(zhì)形成及植物的生長發(fā)育起重要作用。前期研究表明,興安落葉松UGDH（LgUGDH）的過量表達不僅增加了轉(zhuǎn)基因植物體內(nèi)的半纖維素含量,促進了其營養(yǎng)生長,而且提高了植株的耐寒性。因此研究LgUGDH基因的表達調(diào)控機理具有重要意義。前期研究通過Southern雜交證實,在興安落葉松基因組中LgUGDH為雙拷貝基因。通過實時熒光定量PCR分析結(jié)果顯示,LgUGDH1/2在興安落葉松的根、莖、葉中均表達。本研究為了調(diào)查LgUGDH1/2的表達特性,用染色體步移的方法克隆得到1352 bp的LgUGDH1基因啟動子序列,并與前期研究中所獲得的LgUGDH2啟動子序列進行比... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

UDP-葡萄糖醛酸合成途徑[5]

技術(shù)路線

內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文11圖2.1GenomeWalkingKit原理圖Fig.2.1SchematicdiagramoftheGenomeWalkingKit（1）GenomeWalking反應(yīng)體系及反應(yīng)條件如下：（a）1stPCR以基因組DNA為模板，以AP1Primer、LgUGDH1-SP1為上下游引物，進行PCR反應(yīng)。反應(yīng)條件：94oC1min；98oC1min；94oC30s,65oC1min，72oC3min，5cycles；94oC30s；25oC3min；72oC3min；94oC30s，65oC1min，72oC3min，94oC30s,65oC1min，72oC3min,94oC30s,44oC1min,72oC3min,15cycles；72oC10min。表2.2第一輪PCR反應(yīng)體系Table2.2FirstroundPCRreactionsystem

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]Antisense expression of Gossypium barbadense UGD6 in Arabidopsis thaliana significantly alters cell wall composition[J]. Jie Han,Yuxin Pan,Xingfen Wang,Yan Zhang,Zhiying Ma.  Science China（Life Sciences）. 2016(02)
[3]大腸桿菌UDP-葡萄糖脫氫酶基因的克隆、表達及酶活性測定[J]. 陳奕涵,錢悅,侯永泰,周慶瑋,甘人寶,管世敏,榮紹豐.  生物技術(shù)通報. 2013(07)
[4]苧麻UDPGDH基因的cDNA克隆及表達分析[J]. 劉峰,黃妤,郭清泉,張學(xué)文,李良勇,鄧晶,謝玲玲.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(11)
[5]鹽生杜氏藻Ugd基因的cDNA克隆及序列分析[J]. 李音,喬代蓉,易弋,賀慶華,李良,孫輝,曹毅.  四川大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2004(02)

博士論文
[1]苧麻UDPGDH基因cDNA的克隆及功能分析[D]. 劉峰.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[2]毛白楊木材形成相關(guān)基因的克隆及在煙草和楊樹中的表達[D]. 張德強.中國林業(yè)科學(xué)研究院 2004

碩士論文
[1]興安落葉松尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶基因的克隆及特性分析[D]. 郭秀.內(nèi)蒙古大學(xué) 2017



本文編號：3254607