益生菌因其具有改善動(dòng)植物及人體生長、提高營養(yǎng)、刺激免疫功能、提高抗病能力等有益作用,被廣泛應(yīng)用于食品和飼料行業(yè)。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中應(yīng)用的益生菌,不僅兼具以上優(yōu)點(diǎn),同時(shí)還可有效降低抗生素濫用所導(dǎo)致的藥物殘留、致病菌耐藥等風(fēng)險(xiǎn),因此成為水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)及相關(guān)研究領(lǐng)域的關(guān)注熱點(diǎn)。本研究利用芽孢菌特異性篩選方法從凡納濱對(duì)蝦腸道中分離腸道益生芽孢菌,分別以產(chǎn)酶活力、溶血性和對(duì)宿主安全性等相關(guān)指標(biāo)對(duì)所分離菌株的益生菌特性進(jìn)行綜合評(píng)價(jià),篩選獲得對(duì)凡納濱對(duì)蝦具有益生功能的候選益生芽孢菌。經(jīng)飼喂試驗(yàn),進(jìn)一步確定了所獲益生芽孢菌在對(duì)蝦生長發(fā)育及抗病能力方面的益生作用,并對(duì)其提升凡納濱對(duì)蝦抗副溶血弧菌感染作用機(jī)理進(jìn)行了初步研究。為凡納濱對(duì)蝦益生菌資源的開發(fā)和利用提供了理論依據(jù)和數(shù)據(jù)參考。主要研究結(jié)果如下:1.通過芽孢菌特異性分離、鏡檢和芽孢染色等方法,分別從凡納濱對(duì)蝦腸道、養(yǎng)殖池水和池底泥中分離得到芽孢桿菌33株。以菌株產(chǎn)胞外酶活力（蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶）、溶血性及安全性評(píng)價(jià)等指標(biāo),共篩選出3株候選益生芽孢菌B5、C6、C7-1。通過綜合功能比較確定了B5為候選凡納濱對(duì)蝦益生芽孢菌,經(jīng)基因組16S rDNA全長測序... 

【文章來源】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

各菌株蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活力Figure2.1Protease,amylaseandlipaseactivityofdifferentstrains

第二章凡納濱對(duì)蝦腸道益生芽孢桿菌的篩選22圖2.2菌株B5、C6、C7-1的16SrDNA構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹Figure2.2Thephylogenetictreeof16SrRNAgeneofstrainB5、C6、C7-1

沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文232.2.6安全性檢測結(jié)果潛在益生芽孢桿菌的生物安全性試驗(yàn)結(jié)果如圖2.3所示，在對(duì)凡納濱對(duì)蝦幼蝦苗為期10d的潛在益生芽孢桿菌浸浴試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比試驗(yàn)組的3株菌株均未造成凡納濱對(duì)蝦幼蝦苗的大規(guī)模死亡，成活率都在80%以上，其中B5組的成活率95%，顯著高于對(duì)照組的86%，C6、C7-1組的成活率分別為83%和86%，與對(duì)照組無顯著差異。表明三株潛在益生芽孢桿菌在2×108cfu/mL的濃度下對(duì)凡納濱對(duì)蝦是具備安全性的，同時(shí)B5菌株對(duì)凡納濱對(duì)蝦的成活率有一定的促進(jìn)作用。圖2.3凡納濱對(duì)蝦幼蝦苗成活率Fig2.3SurvivalrateofLitopenaeusvaannameilarva2.3討論益生菌作為抗生素的替代品在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用日益增加，通過飼料將益生菌活菌引入動(dòng)物腸道，以達(dá)到平衡腸道微生物菌群、改善消化功能等效果（Gómezetal,2008;Mohapatraetal,2012;Sunetal,2011;Wangetal,2007）。研究證明益生菌可以通過補(bǔ)充消化酶，提高宿主飼料效率和生長速度，預(yù)防腸道疾病以及預(yù)消化飼料中難分解的營養(yǎng)因子，從而提高水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的飼料利用率（Balcázaretal,2006;Suzeretal,2008），分離具有產(chǎn)消化酶能力的菌株是篩選此類益生菌的主要方式。目前主要應(yīng)用于凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖的益生菌多為非土著來源菌株，以陸生芽孢桿菌和光合細(xì)菌為主。這些非土著來源菌種在凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖上的應(yīng)用也存在一定弊端，非土著來源益生菌在對(duì)蝦腸道中難以穩(wěn)定生長并發(fā)揮作用，同時(shí)可能會(huì)對(duì)腸道原有菌群產(chǎn)生干擾（孟霄鵬等，2017）。與此同時(shí)，芽孢桿菌是一種好氧或兼性厭氧的革蘭氏陽性菌，由于其具有耐受能力強(qiáng)、可以

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3253644