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基于PI3K/Akt信號通路探討羅格列酮對吉富羅非魚生長及骨骼肌糖代謝的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-05-19 06:59
  水產(chǎn)養(yǎng)殖中飼料成本占總養(yǎng)殖成本的60-70%以上,而飼料成本中蛋白質(zhì)飼料占主要部分。因此,降低飼料成本,節(jié)約蛋白質(zhì)飼料資源,提高魚類對飼料中糖的利用,充分發(fā)揮糖的供能作用成為魚類營養(yǎng)研究領(lǐng)域的一個(gè)重要課題。由于魚類是“糖尿病體質(zhì)”,過高飼料糖水平會(huì)對魚的生產(chǎn)性能和健康狀況產(chǎn)生不利影響。羅格列酮(RSG)作為人的胰島素增敏劑可以改善胰島素與受體的結(jié)合能力,提高糖的利用率。但羅格列酮在調(diào)節(jié)魚類糖代謝方面的研究卻鮮有報(bào)道。為研究不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚生長、血液生化指標(biāo)、全魚營養(yǎng)成分、胰島素和肝肌糖原水平的影響,探討羅格列酮對吉富羅非魚骨骼肌中IRS-1、PI3K、GLUT-4、Akt和GSK-3β的表達(dá)情況,探索魚類糖代謝途徑中相關(guān)分子的調(diào)控機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)選用平均體重約為80.33±0.68g的吉富羅非魚720尾,隨機(jī)分配到24個(gè)水族箱中。將實(shí)驗(yàn)分成5個(gè)處理組:正常淀粉組(32%,LC),高淀粉組(52%,HC),高淀粉+羅格列酮1組(10mg/kg,R1),高淀粉+羅格列酮2組(20m/kg,R2),高淀粉+羅格列酮3組(30mg/kg,R3)。每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30尾羅非魚。飼... 

【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
符號說明
中文摘要
Abstract
1 引言
    1.1 魚類對碳水化合物利用的特點(diǎn)
        1.1.1 魚類對碳水化合物利用的現(xiàn)狀
        1.1.2 魚類對碳水化合物代謝障礙可能的原因
    1.2 胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
    1.3 糖代謝調(diào)控劑-羅格列酮
        1.3.1 羅格列酮
        1.3.2 羅格列酮的作用及其添加量的確定
    1.4 研究目的與意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 儀器與試劑
        2.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及地點(diǎn)
        2.1.3 試驗(yàn)分組及日糧
        2.1.4 飼養(yǎng)管理
    2.2 樣品采集
    2.3 指標(biāo)測定及方法:
        2.3.1 生長指標(biāo)
        2.3.2 全魚營養(yǎng)成分測定
        2.3.3 血液生化指標(biāo)測定
        2.3.4 血清胰島素測定
        2.3.5 肝糖原和肌糖原
        2.3.6 qRT-PCR測骨骼肌PI3K、IRS-1、Akt、GSK-3β和 GLUT-4 mRNA表達(dá)量
            2.3.6.1 總RNA的提取
            2.3.6.2 RNA的檢測和定量
            2.3.6.3 反轉(zhuǎn)錄合成c DNA
            2.3.6.4 引物設(shè)計(jì)
            2.3.6.5 qRT-PCR反應(yīng)體系
        2.3.7 Western-Blot法檢測骨骼肌組織ATK和 GSK-3β蛋白的表達(dá)及其磷酸化水平
            2.3.7.1 總蛋白的提取
            2.3.7.2 蛋白質(zhì)濃度測定
            2.3.7.3 蛋白質(zhì)變性
            2.3.7.4 SDS-PAGE凝膠電泳
            2.3.7.5 轉(zhuǎn)膜
            2.3.7.6 一抗二抗孵育及顯影
    2.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚生長指標(biāo)的影響
    3.2 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚全魚營養(yǎng)成分的影響
    3.3 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚血液生化指標(biāo)的影響
    3.4 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚血糖和胰島素及肝肌糖原含量的影響
    3.5 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚骨骼肌中IRS-1、PI3K、GLUT-4、Akt和GSK-3βmRNA表達(dá)量的影響
        3.5.1 總RNA質(zhì)量檢測
        3.5.2 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚骨骼肌中IRS-1、PI3K、GLUT-4、Akt和GSK-3βmRNA表達(dá)差異分析
    3.6 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚骨骼肌組織中Akt、p-Akt和 p-GSK-3β蛋白表達(dá)差異分析
4.討論
    4.1 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚生長性能的影響
    4.2 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚全魚營養(yǎng)成分的影響
    4.3 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚血液生化指標(biāo)的影響
    4.4 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚血糖和胰島素及肝肌糖原含量的影響
    4.5 不同濃度的羅格列酮對吉富羅非魚骨骼肌中IRS-1、PI3K、GLUT-4、Akt和GSK-3βmRNA和蛋白表達(dá)差異分析
5 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]魚類消化道菌群與碳水化合物代謝[J]. 魯程瑤,丁倩雯,冉超,楊雅麟,王安然,張洪玲,張進(jìn)雄,李解,ERIK Olsen Rolf,EINAR Ring?,張震,周志剛.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2019(10)
[2]治療2型糖尿病新靶點(diǎn)——糖原合成酶激酶3及其抑制劑的研究進(jìn)展[J]. 吳建軍,王順春.  中國糖尿病雜志. 2018(10)
[3]飼糧中添加梧桐子油和羅格列酮對綿羊組織中脂肪酸組成及含量的影響[J]. 史曉雪,牛占宇,幸超,張三潤,閆婉姝,張潤厚.  動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2018(06)
[4]PI3K/AKT/GSK3β通路影響糖代謝與認(rèn)知過程的研究進(jìn)展[J]. 戴悅萱,李月春,梁芙茹.  中西醫(yī)結(jié)合心血管病電子雜志. 2018(06)
[5]碳水化合物種類和水平對大黃魚生長性能、血清生化指標(biāo)、肝臟糖代謝相關(guān)酶活性及肝糖原含量的影響[J]. 馬紅娜,王猛強(qiáng),陸游,袁野,孫蓬,周歧存.  動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2017(03)
[6]胰島素增敏劑對日本黃姑魚血糖代謝及生長的影響[J]. 鄭普強(qiáng),楊云霞,韓濤,李新宇,楊敏,王驥騰.  水產(chǎn)科技情報(bào). 2017(01)
[7]飼料碳水化合物水平對吉富羅非魚幼魚生長性能和血液主要生化指標(biāo)的影響[J]. 吳凡,文華,蔣明,劉偉,劉波,田娟,楊長庚.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(12)
[8]類胰島素生長因子-1(IGF-1)在部分魚種中的研究進(jìn)展[J]. 石巖,仇雪梅,崔軍,姜志強(qiáng).  生物技術(shù)通報(bào). 2012(08)
[9]PPARs調(diào)控劑對加州鱸生長及糖脂代謝的影響[J]. 張麗,許國煥,郭慧青,吳月嫦,江永明.  淡水漁業(yè). 2012(03)
[10]胰島素增敏劑的臨床應(yīng)用及研究進(jìn)展[J]. 肖碩,李華榮.  熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2011(06)

碩士論文
[1]高淀粉日糧對吉富羅非魚生長、胰島素受體及酪氨酸激酶活性的影響[D]. 韓昊君.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]大口黑鱸對高淀粉飼料的營養(yǎng)生理適應(yīng)[D]. 沈黃冕.西南大學(xué) 2018



本文編號:3195340

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