本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用RNA干擾技術(shù)對旋毛蟲Nudix水解酶基因功能的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：Nudix水解酶(Nudix hydrolase,Nd)是一種廣泛存在于多種生物體內(nèi)的一種水解酶。它可以水解多種有機焦磷酸鹽,包括核苷二磷酸鹽、核苷三磷酸鹽、二核苷酸多磷酸鹽、二磷酸肌醇多磷酸鹽、核苷酸糖和RNA帽端。本實驗室的前期研究發(fā)現(xiàn)旋毛蟲Nudix水解酶(Trichinella spiralis Nd,Ts Nd)與旋毛蟲侵入小鼠小腸上皮細(xì)胞(IEC)有關(guān)。本研究通過RNA干擾(RNAi)技術(shù)研究旋毛蟲肌幼蟲的Ts Nd基因功能,觀察Ts Nd基因被沉默后旋毛蟲幼蟲在體外的存活情況、感染能力和雌蟲生殖力。首先設(shè)計與Ts Nd同源的ds RNA和si RNA,通過浸泡法和電穿孔法將其導(dǎo)入到旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)。然后通過Real-time PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù)分別幼蟲Ts Nd基因轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達水平的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn),ds RNA和si RNA均能導(dǎo)致Ts Nd表達明顯降低。同時設(shè)計一條與旋毛蟲蛋白酶體β7亞基(Tspst)同源的ds RNA,用來驗證RNAi具有基因特異性,即ds RNA-Ts Nd和ds RNA-Tspst只能分別引起與它們同源的基因沉默。將ds RNA-Ts Nd和si RNA導(dǎo)入旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)后,在培養(yǎng)過程中觀察幼蟲存活情況。體外觀察Ts Nd基因沉默對旋毛蟲幼蟲侵入IEC的影響,動物實驗觀察Ts Nd基因沉默對旋毛蟲幼蟲在體內(nèi)侵入腸粘膜及其發(fā)育和生殖力的影響。材料與方法1.材料本實驗所用旋毛蟲(T.spiralis,T1)由昆明小鼠保種和傳代。p GEM-T-Ts Nd/M109:含旋毛蟲Ts Nd基因重組質(zhì)粒菌株,由實驗室前期構(gòu)建和保存。p MAL-C2X-Tspst/BL21:含旋毛蟲Tspst基因重組質(zhì)粒菌株,由實驗室前期構(gòu)建和保存。實驗用BALB/c小鼠:購自河南省實驗動物中心。2.ds RNA和si RNA的設(shè)計與合成登陸Gen Bank查詢Ts Nd和Tspst的m RNA序列。①ds RNA的設(shè)計與合成;選取Ts Nd m RNA 650~1301bp和Tspst m RNA 88~742bp作為2條ds RNA的靶序列。根據(jù)靶序列設(shè)計含有T7啟動子的PCR引物,以含Ts Nd和Tspst的重組質(zhì)粒為模板PCR擴增得到含T7啟動子的PCR產(chǎn)物,即ds RNA體外轉(zhuǎn)錄模板,然后體外轉(zhuǎn)錄合成ds RNA-Ts Nd和ds RNA-Tspst。②si RNA的設(shè)計與合成:根據(jù)Ts Nd m RNA序列,設(shè)計3個si RNA和1個對照si RNA,根據(jù)si RNA靶向m RNA的位點,分別命名為si RNA-275、si RNA-425、si RNA-715和對照si RNA,用FAM熒光標(biāo)記對照si RNA,以便在轉(zhuǎn)染過程中跟蹤si RNA。3.將ds RNA和si RNA導(dǎo)入旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)應(yīng)用浸泡法和電穿孔法,分別將20、40或60 ng/μL ds RNA,1、2或3μM si RNA和Control si RNA分別導(dǎo)入旋毛蟲幼蟲體內(nèi),其中對照si RNA組旋毛蟲幼蟲可以在熒光顯微鏡下觀察熒光信號,以確定si RNA是否被成功導(dǎo)入到旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)。4.RNAi對Ts Nd基因轉(zhuǎn)錄與表達水平的影響利用Real-time PCR和Western blotting分別檢測ds RNA和si RNA處理后幼蟲Ts Nd基因轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)表達水平的變化。5.RNAi對Ts Nd基因干擾的特異性分析用浸泡法分別將40ng/μL ds RNA-Ts Nd和ds RNA-Tspst導(dǎo)入旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi),檢測2組旋毛蟲肌幼蟲中Ts Nd和Tspst表達水平的變化。6.Ts Nd基因沉默后對幼蟲體外存活及侵入IECs的影響利用浸泡法和電穿孔法,將ds RNA、si RNA和對照si RNA分別導(dǎo)入到旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)后,觀察幼蟲體外死亡率。將100條經(jīng)過1、1.5、2、2.5、3μM si RNA-275或20、30、40、50、60ng/μl ds RNA-Ts Nd電穿孔處理后18h的肌幼蟲與500μl半固體培養(yǎng)基混勻后接種到24孔板中的IECs單層上。37℃、5%CO2孵育2h后觀察幼蟲侵入率。7.Ts Nd基因沉默對旋毛蟲侵入腸粘膜及其發(fā)育和生殖力的影響將160只BALB/c小鼠分為8組(每組20只):ds RNA浸泡法3組(ds RNA-Ts Nd處理組、轉(zhuǎn)染試劑Lip2000和PBS對照組)、ds RNA電穿孔法2組(ds RNA處理組和PBS對照組及si RNA電穿孔法3組(si RNA-275處理組、對照si RNA處理組和PBS對照組)。將Ts Nd基因沉默后的幼蟲經(jīng)口感染小鼠(300條幼蟲/只)。感染后6d后剖殺10只小鼠收集成蟲,感染后35d后剖殺另外10只小鼠收集肌幼蟲,計算腸道成蟲荷和肌幼蟲荷及其減蟲率。將收集的成蟲進行體外培養(yǎng)72h,收集新生幼蟲,計算雌蟲體外72h新生幼蟲產(chǎn)量,作為成蟲生殖力指標(biāo)。雌蟲體外72h新生幼蟲產(chǎn)量=72h新生幼蟲數(shù)/雌蟲數(shù)。結(jié)果1.ds RNA和si RNA的導(dǎo)入:瓊脂糖凝膠檢測結(jié)果,發(fā)現(xiàn)2個清晰條帶:ds RNA-Ts Nd(691bp)和ds RNA-Tspst(694bp),結(jié)果與預(yù)期大小相同。2.熒光標(biāo)記跟蹤結(jié)果顯示,通過電穿孔法將對照si RNA導(dǎo)入到幼蟲18h后,在熒光顯微鏡下發(fā)現(xiàn)幼蟲體內(nèi)有明顯的熒光,而未處理的幼蟲則無熒光。3.ds RNA對旋毛蟲肌幼蟲Ts Nd轉(zhuǎn)錄和表達水平的影響(1)用浸泡法將20、40和60 ng/μl ds RNA-Ts Nd導(dǎo)入幼蟲后1d,Real-time PCR結(jié)果顯示,20、40和60 ng/μl ds RNA-Ts Nd處理組Ts Nd m RNA表達量相對于PBS對照組分別為48.7%、34.7%和29.5%,表達量的降低具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);lip2000對照組與PBS對照組之間Ts Nd m RNA表達量沒有明顯變化(P0.05)。(2)用浸泡法將40ng/μl ds RNA-Ts Nd導(dǎo)入幼蟲后1d、2d、3d、4d、5d和6d時,Real-time PCR結(jié)果顯示,ds RNA處理組Ts Nd m RNA表達量相對于PBS對照組分別為34.2%、42.7%、52.3%、57.7%、79.7%和86.2%(F1d=7.429,F2d=0.013,F3d=0.016,F4d=10.002,F5d=5.173,F6d=0.715;P0.05);lip2000對照組與PBS對照組之間Ts Nd m RNA表達量沒有明顯變化(P0.05)。Western blotting結(jié)果顯示,相對于PBS對照組,ds RNA-Ts Nd處理組在浸泡處理后第1d、2d、3d、4d、5d、6d時,Ts Nd表達量分別為101.2%、78.7%、43.6%、44.3%、89.2%、100.6%。而lip2000對照組相對于PBS對照組Ts Nd表達量沒有明顯變化。電穿孔處理后3d,ds RNA-Ts Nd處理組Ts Nd表達量相對于PBS對照組為41.8%。(3)電穿孔法將40ng/μl ds RNA導(dǎo)入幼蟲后1d,與PBS對照組相比,Ts Nd m RNA表達量降低了74.2%(F=7.033,P0.05)。4.si RNA對旋毛蟲肌幼蟲Ts Nd轉(zhuǎn)錄和表達水平的影響(1)通過電穿孔法將2μM si RNA-275、si RNA-425或si RNA-715導(dǎo)入到旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)后1d,si RNA-275、si RNA-425和si RNA-715處理組幼蟲Ts Nd基因轉(zhuǎn)錄水平相對于PBS對照組分別為26.7%、77.4%和83.7%(P0.05)。Control si RNA處理組幼蟲Ts Nd基因轉(zhuǎn)錄水平與PBS對照組相比沒有明顯差異(P0.05)(4.7 A)。Western blotting結(jié)果顯示,與PBS對照組相比,si RNA-275、si RNA-425和si RNA715處理組Ts Nd表達量分別為23.3%、79.5%和94.8%。對照si RNA處理組Ts Nd表達量相對于PBS對照組無明顯變化(P0.05)。(2)通過電穿孔法將1μM、2μM或3μM si RNA-275導(dǎo)入到旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)后1d,1μM、2μM和3μM si RNA-275處理組幼蟲Ts Nd基因轉(zhuǎn)錄水平相對于PBS對照組分別為48.0%、27.7%和19.2%(P0.05)。Control si RNA處理組幼蟲Ts Nd基因轉(zhuǎn)錄水平與PBS對照組相比沒有明顯差異(P0.05)(4.7 B)。(3)通過電穿孔法將2μM si RNA-275導(dǎo)入到旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)后1d、3d、5d和7d,幼蟲Ts Nd基因轉(zhuǎn)錄水平相對于PBS對照組分別為27.7%、39.3%、49.7%和57.9%(P0.05)。Control si RNA處理組幼蟲Ts Nd基因轉(zhuǎn)錄水平與PBS5.RNAi對Ts Nd基因干擾的特異性分析用浸泡法分別將ds RNA-Ts Nd和ds RNA-Tspst導(dǎo)入幼蟲體內(nèi)后,Real-time PCR結(jié)果顯示,ds RNA-Ts Nd處理組與PBS對照組相比,Ts Nd m RNA表達量降低了74.6%(P0.05),而Tspst m RNA表達量無明顯變化(P0.05)。ds RNA-Tspst處理組與PBS對照組相比,Ts Nd m RNA表達無明顯變化(P0.05),而Tspst m RNA表達量降低了73.2%(P0.05)。Western blotting分析顯示,與PBS空白對照組相比,ds RNA-Ts Nd處理組Ts Nd表達量降低了62.9%(P0.05),Tspst表達量則沒有明顯變化(P0.05);而ds RNA-Tspst處理組Ts Nd表達量沒有明顯變化(P0.05),而Tspst表達量則降低了60.6%(P0.05)。結(jié)果表明,RNAi對Ts Nd基因轉(zhuǎn)錄和表達水平的干擾均具有特異性。6.ds RNA和si RNA對旋毛蟲體外存活的影響ds RNA浸泡法處理組、Lip2000和PBS對照組的幼蟲死亡率分別為32.2%、34.2%和33.6%(χ2=0.138,P0.05)。ds RNA電穿孔處理組和PBS組的幼蟲死亡率分別為35.2%和33.1%(χ2=0.116,P0.05)。si RNA電穿孔處理后,si RNA-275處理組、對照si RNA處理組和PBS對照組幼蟲死亡率分別為33.1%、32.3%和31.9%(χ2=0.024,P0.05)。7.Ts Nd基因沉默對旋毛蟲體外侵入IECs的影響(1)浸泡法將20、30、40、50、60ng/μl ds RNA-Ts Nd導(dǎo)入到旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)18h后,觀察幼蟲體外對IECs的侵入,結(jié)果發(fā)現(xiàn)20、30、40、50、60ng/μl ds RNA-Ts Nd處理組、Lip2000和PBS對照組幼蟲侵入率分別為54.4%,44.7%,39.2%,35.3%,32.7%,61.7%和63.1%。30、40、50、60ng/μl ds RNA-Ts Nd處理組幼蟲侵入率與Lip2000和PBS對照組相比明顯降低(χ230=6.640,χ240=10.982,χ250=16.778,χ260=19.317;P0.05)。幼蟲侵入率與ds RNA-Ts Nd濃度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.96798)。(2)電穿孔法將20、30、40、50、60ng/μl ds RNA-Ts Nd導(dǎo)入到旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)后,觀察幼蟲體外對IECs的侵入,結(jié)果發(fā)現(xiàn)20、30、40、50、60ng/μl ds RNA-Ts Nd處理組和PBS對照組幼蟲侵入率分別為52.6%,43.8%,39.5%,33.8%,30.8%和58.3%。30、40、50、60ng/μl ds RNA-Ts Nd處理組幼蟲侵入率與PBS對照組相比明顯降低(χ230=4.258,χ240=7.044,χ250=12.956,χ260=16.099;P0.05)。幼蟲侵入率與ds RNA-Ts Nd濃度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.98707)。(3)電穿孔法將1、1.5、2、2.5、3μM si RNA-275導(dǎo)入到旋毛蟲肌幼蟲后,觀察幼蟲體外對IECs的侵入,結(jié)果顯示1、1.5、2、2.5、3μM si RNA-275處理組、control si RNA處理組和PBS對照組幼蟲侵入率分別為50.3%,42.6%,37.0%,33.6%,30.6%,59.4%和58.3%。1.5、2、2.5、3μM si RNA-275處理組幼蟲侵入率與control si RNA處理組和PBS對照組相比明顯降低(χ21.5=5.873,χ22=5.873,χ22.5=5.873,χ23=5.873;P0.05)。幼蟲侵入率與ds RNA-Ts Nd濃度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.97941)。8.Ts Nd基因沉默對旋毛蟲侵入腸粘膜及其發(fā)育和生殖力的影響(1)ds RNA浸泡法:ds RNA處理組的成蟲荷(71.4±16.0條)明顯低于Lip2000對照組(140.2±14.9條)和PBS對照組(142.6±20.2條)(P0.05);Lip2000對照組的成蟲荷與PBS對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);3組成蟲體外72h新生幼蟲產(chǎn)量分別為51.3±2.6、50.8±3.1及53.7±2.6(P0.05)。ds RNA處理組的肌幼蟲荷為5805±1815條/g,明顯低于Lip2000對照組的9363±3130條/g和PBS對照組的9624±3624條/g(P0.05);而2個對照組肌幼蟲荷的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。與PBS對照組相比,ds RNA處理組的成蟲和肌幼蟲減蟲率分別為49.9%和39.9%。(2)ds RNA電穿孔法:ds RNA處理組腸道成蟲荷為38.4±9.6條,明顯低于PBS對照組的113.5±18.8條(F=23.261,P0.05);2組成蟲體外72h新生幼蟲產(chǎn)量分別為72.3±6.1與78.3±6.9(P0.05)。ds RNA處理組肌幼蟲荷為1943±97條/克,明顯低于PBS對照組的6376±1197條/克(F=42.475,P0.05)。ds RNA處理組的成蟲和肌幼蟲減蟲率分別為83.4%和69.5%。ds RNA電穿孔法的成蟲與肌幼蟲減蟲率均明顯高于ds RNA浸泡法(χ2成蟲=24.442,χ2肌幼蟲=17.419;P0.05)。(3)si RNA電穿孔法:si RNA-275處理組的腸道成蟲荷為37.3±10.2條,明顯低于對照si RNA處理組的109.6±9.7條(P0.05)和PBS對照組的102.5±20.1條(P0.05),而對照si RNA處理組與PBS對照組成蟲荷之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);3組成蟲體外72h新生幼蟲產(chǎn)量分別為70.7±3.5、74.1±6.6及72.8±4.7(P0.05)。si RNA-275處理組的肌幼蟲荷為1765±360條,明顯低于對照si RNA處理組的6066±967條(P0.05)和PBS對照組的5654±1422條(P0.05),而對照si RNA處理組與PBS對照組之間肌幼蟲荷的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。si RNA-275處理組的成蟲和肌幼蟲減蟲率分別為63.6%和68.8%。結(jié)論1.通過體外轉(zhuǎn)錄成功合成了旋毛蟲ds RNA-Ts Nd和ds RNA-Tspst。2.ds RNA浸泡法和電穿孔法均可導(dǎo)致Ts Nd轉(zhuǎn)錄與表達水平的下降,對Ts Nd基因的干擾具有特異性;si RNA電穿孔法亦可明顯降低Ts Nd的轉(zhuǎn)錄與表達水平。3.應(yīng)用ds RNA與si RNA沉默Ts Nd基因后,旋毛蟲肌幼蟲的體外存活率無明顯變化。4.Ts Nd基因沉默能顯著抑制幼蟲在體外對IECs的侵入。5.沉默Ts Nd基因可明顯影響幼蟲對腸粘膜的侵入和發(fā)育,腸道成蟲與肌幼蟲荷明顯降低。
【關(guān)鍵詞】：旋毛蟲 Nudix水解酶 侵入 RNA干擾
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S852.7;Q78
【目錄】：

• 摘要5-11
• Abstract11-19
• 英文縮略詞表19-20
• 1 前言20-23
• 1.1 旋毛蟲20
• 1.2 旋毛蟲侵入機制研究進展20-21
• 1.3 RNA干擾技術(shù)21
• 1.4 Nudix水解酶21-22
• 1.5 研究意義22-23
• 2 實驗材料23-26
• 2.1 主要試劑23-24
• 2.2 主要儀器24-25
• 2.3 材料25-26
• 3 實驗方法及步驟26-49
• 3.1 技術(shù)路線26-27
• 3.2 TsNd基因siRNA設(shè)計與合成27
• 3.3 TsNd基因dsRNA設(shè)計與合成27-34
• 3.4 旋毛蟲肌幼蟲的收集34
• 3.5 將siRNA和dsRNA導(dǎo)入旋毛蟲肌幼蟲34-36
• 3.6 Real-time PCR檢測TsNd基因轉(zhuǎn)錄水平的變化36-40
• 3.7 Weatern blotting檢測TsNd基因表達水平的變化40-46
• 3.8 RNA干擾的基因特異性46
• 3.9 TsNd基因沉默對肌幼蟲體外存活及侵入IECs的影響46-47
• 3.10 TsNd基因沉默對侵入腸粘膜及其發(fā)育和生殖力的影響47-48
• 3.11 數(shù)據(jù)處理48-49
• 4 結(jié)果49-62
• 4.1 質(zhì)粒pGEM-T-TsNd和pMAL-C2X-Tspst的提取49
• 4.2 dsRNA體外轉(zhuǎn)錄模板（即含T7 啟動子PCR產(chǎn)物）49-50
• 4.3 體外轉(zhuǎn)錄合成dsRNA50-51
• 4.4 將siRNA和dsRNA導(dǎo)入到旋毛蟲肌幼蟲體內(nèi)51
• 4.5 dsRNA對TsNd表達的影響51-53
• 4.6 siRNA對TsNd表達的影響53-55
• 4.7 RNA干擾的基因特異性55-56
• 4.8 TsNd基因沉默后肌幼蟲體外存活及侵入IECs情況56-59
• 4.9 TsNd基因沉默后對幼蟲侵入腸粘膜、發(fā)育及雌蟲生殖力的影響59-62
• 5 討論62-64
• 5.1 利用RNA干擾技術(shù)沉默TsNd基因的表達62
• 5.2 TsNd在旋毛蟲侵入宿主過程中所起作用的分析62-64
• 6 結(jié)論64-65
• 參考文獻65-68
• 綜述RNA干擾技術(shù)在寄生蟲基因功能研究中的應(yīng)用68-80
• 參考文獻76-80
• 個人簡歷80-81
• 致謝81

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉靜;A Novel Vector for Abundant Expression of Antisense RNA, Triplex forming RNA and Ribozyme in vivo[J];High Technology Letters;2000年04期

2 魯慧英;Detection of hepatitis C virus RNA sequences in cholangiocarcinomas in Chinese and American patients[J];Chinese Medical Journal;2000年12期

3 梁小兵 ,萬國江 ,黃榮貴;Distribution and Variation of Ribonucleic Acid (RNA) and Protein and Its Hydrolysis Products in Lake Sediments[J];Chinese Journal of Geochemistry;2002年02期

4 Verheyden B ,徐其武;口服脊髓灰質(zhì)炎疫苗核殼和RNA的穩(wěn)定性[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊;2002年01期

5 CMBE譯文組;探索小RNA的功能[J];現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)生物工程學(xué)雜志;2004年03期

6 沈維干;RNA interference and its current application in mammals[J];Chinese Medical Journal;2004年07期

7 孫娣;汪洋;張麗娟;閆玉清;;一種簡捷提取植物總RNA的方法[J];黑龍江醫(yī)藥;2005年06期

8 南海波;;小麥總RNA的提取[J];渤海大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2006年01期

9 王冬來;;RNA干擾的成功與困惑[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2008年06期

10 楊靜;;試驗性的小RNA藥物可能引發(fā)失明[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2009年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 金由辛;;面向21世紀(jì)的RNA研究[A];面向21世紀(jì)的科技進步與社會經(jīng)濟發(fā)展（下冊）[C];1999年

2 ;第四屆RNA全國研討會大會報告日程安排[A];第四屆全國RNA進展研討會論文集[C];2005年

3 ;Function of Transfer RNA Modifications in Plant Development[A];植物分子生物學(xué)與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)——全國植物生物學(xué)研討會論文摘要集[C];2010年

4 王峰;張秋平;陳金湘;;棉花總RNA的快速提取方法[A];中國棉花學(xué)會2011年年會論文匯編[C];2011年

5 關(guān)力;陳本iY;iJ云虹;郭培芝;魏重琴;邱蘇吾;苗健;;關(guān)于動物}D~T中RNAn,定方法的研究[A];中國生理科學(xué)會學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編（生物化學(xué)）[C];1964年

6 夏海濱;;小RNA在免疫學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用研究進展[A];中國免疫學(xué)會第五屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

7 ;The stability of hepatitis C virus RNA in various handling and storage conditions[A];中國輸血協(xié)會第四屆輸血大會論文集[C];2006年

8 郭德銀;;RNA干擾在病毒研究和控制中的應(yīng)用[A];2006中國微生物學(xué)會第九次全國會員代表大會暨學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2006年

9 甘儀梅;楊業(yè)華;王學(xué)奎;曹燕;楊特武;;棉花總RNA快速提取[A];中國棉花學(xué)會2007年年會論文匯編[C];2007年

10 ;Identification and characterization of novel interactive partner proteins for PCBP1 that is a RNA-binding protein[A];中國優(yōu)生優(yōu)育協(xié)會第四屆全國學(xué)術(shù)論文報告會暨基因科學(xué)高峰論壇論文專輯[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 馮衛(wèi)東;研究人員發(fā)現(xiàn)可破壞腫瘤抑制基因的小RNA[N];科技日報;2009年

2 記者 儲笑抒 通訊員 盛偉;人體微小RNA有望提前發(fā)出癌癥預(yù)警[N];南京日報;2011年

3 瀘州醫(yī)學(xué)院副教授、科普作家 周志遠(yuǎn);“大頭兒子”與環(huán)狀RNA[N];第一財經(jīng)日報;2014年

4 麥迪信;小分子RNA可能有大作用[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

5 董映璧;美發(fā)現(xiàn)基因調(diào)控可回應(yīng)“RNA世界”[N];科技日報;2006年

6 張忠霞;特制RNA輕推一下,就能“喚醒”基因[N];新華每日電訊;2007年

7 聶翠蓉;RNA：縱是配角也精彩[N];科技日報;2009年

8 馮衛(wèi)東;RNA干擾機制首次在人體中獲得證實[N];科技日報;2010年

9 馮衛(wèi)東　王小龍;英在地球早期環(huán)境模擬條件下合成類RNA[N];科技日報;2009年

10 記者 常麗君;新技術(shù)讓研究進入單細(xì)胞內(nèi)RNA的世界[N];科技日報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王趙瑋;昆蟲RNA病毒復(fù)制及昆蟲抗病毒天然免疫機制研究[D];武漢大學(xué);2014年

2 包純;一類新非編碼RNA的發(fā)現(xiàn)以及產(chǎn)生和功能的初探[D];華中師范大學(xué);2015年

3 李語麗;基于MeRIP-seq的水稻RNA m6A甲基化修飾的研究[D];中國科學(xué)院北京基因組研究所;2015年

4 熊瑜琳;miR-122靶位基因STAT3調(diào)控長鏈非編碼 RNA Lethe促進HCV復(fù)制的機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 祝宇紅;離子條件下RNA折疊穩(wěn)定性的理論研究[D];浙江大學(xué);2014年

6 劉立江;核盤菌新型RNA病毒研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 劉雪梅;隨機RNA文庫技術(shù)的建立及其應(yīng)用[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2003年

8 付漢江;非編碼RNA克隆分析及其功能初步研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

9 侯偉;DNAzyme/LNAzyme切割RNA反應(yīng)動力學(xué)實時分析體系的建立及在細(xì)胞內(nèi)阻斷丙型肝炎病毒基因表達的實驗研究[D];浙江大學(xué);2006年

10 劉長梅;細(xì)胞和動物水平穩(wěn)定整合的RNA干擾技術(shù)的建立及在小鼠珠蛋白表達調(diào)控研究中的運用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陸聰兒;條紋斑竹鯊再生肝臟中差異RNA的研究[D];浙江理工大學(xué);2015年

2 張曉輝;小鼠幾種長鏈非編碼RNA基因功能的初步研究[D];昆明理工大學(xué);2015年

3 全弘揚;長鏈非編碼RNA在細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)中的相關(guān)作用及機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

4 胡亮;DDX19A識別PRRSV基因組RNA并激活NLRP3炎癥小體[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

5 張帥兵;應(yīng)用RNA干擾技術(shù)對旋毛蟲Nudix水解酶基因功能的研究[D];鄭州大學(xué);2015年

6 鄭芳芳;肺癌RNA-Seq數(shù)據(jù)中RNA編輯事件的識別算法和系統(tǒng)分析[D];蘇州大學(xué);2015年

7 陳瑞東;長鏈非編碼RNA MEG3在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中作用的實驗研究[D];蘇州大學(xué);2015年

8 劉駿武;線蟲和水稻中環(huán)狀RNA的預(yù)測及分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

9 李猷;利用RNA干擾技術(shù)提高番茄抗TMV侵染能力的研究[D];牡丹江師范學(xué)院;2015年

10 吳術(shù)盛;SVCV感染EPC細(xì)胞microRNA表達譜的初步研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用RNA干擾技術(shù)對旋毛蟲Nudix水解酶基因功能的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：301875