本文關(guān)鍵詞：玉屏風(fēng)散超微粉的制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及對(duì)豬瘟抗體水平影響研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：豬瘟是一種豬的強(qiáng)烈性接觸性傳染病,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將其列入OIE疾病名錄,豬瘟對(duì)養(yǎng)豬行業(yè)造成了極大的沖擊,被我國(guó)列為一類(lèi)傳染病。近年來(lái)研究表明玉屏風(fēng)散,具有中藥中的丙種球蛋白之稱(chēng),是較強(qiáng)的中藥免疫增強(qiáng)劑。中藥超微粉碎技術(shù)采用現(xiàn)代科技將中藥材或中藥提取物超微粉化,能使藥效提高的同時(shí)大大減少副作用,因此中藥超微粉化在具有重要的意義。本研究擬將玉屏風(fēng)散制備成超微粉,并對(duì)其物理性質(zhì)進(jìn)行研究,利用HPLC測(cè)定超微粉中升麻素苷的含量,最后研究其對(duì)豬瘟抗體水平的影響。實(shí)驗(yàn)選取質(zhì)量較好的黃芪、白術(shù)、防風(fēng)洗凈、干燥,先分別制備出中藥粗粉,然后取各種中藥粗粉超微粉碎得各中藥超微粉。取各種樣品利用相關(guān)儀器進(jìn)行粒度分布、比表面積、流動(dòng)性和吸濕性測(cè)定。粒徑及比表面積結(jié)果顯示,中藥粗粉粒徑基本在50-100μm范圍內(nèi),而中藥超微粉粒徑范圍主要在1-10μ.m范圍內(nèi),超微粉的比表面積比粗粉大數(shù)倍。流動(dòng)性結(jié)果顯示,超微粉的休止角與粗粉休止角比例大于1,表明超微粉流動(dòng)性比粗粉小。吸濕性結(jié)果顯示,在溫度為25℃,相對(duì)濕度為75%的條件下,黃芪粗粉、黃芪超微粉和白術(shù)超微粉均在96h達(dá)到吸濕平衡,而白術(shù)粗粉、防風(fēng)粗粉和防風(fēng)超微粉均在120h才基本達(dá)到吸濕平衡。利用HPLC對(duì)所制備的超微粉中升麻素苷含量進(jìn)行測(cè)定,檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm,流動(dòng)相為乙腈-水(30：70)。將濃度為100.0μg/mL,50.0μg/mL,25.0μg/mL,12.5μg/mL, 6.3μg/mL的對(duì)照品溶液分別吸取20μL注入HPLC,以峰面積為縱坐標(biāo),進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后進(jìn)行精密度、重現(xiàn)性和回收率實(shí)驗(yàn),最后取3批樣品進(jìn)行含量測(cè)定。HPLC圖結(jié)果顯示,升麻素苷對(duì)照品保留時(shí)間9.2min左右,而樣品在9.2min左右處也出現(xiàn)一個(gè)較好的峰形,并且基線平穩(wěn)。標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)驗(yàn)所得回歸方程為Y=8879.65X-7823.36, r=0.99995(n=5),試驗(yàn)表明,升麻素苷對(duì)照品在6.3～100.0『g/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,最低檢測(cè)量0.46μg/mL。精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,升麻素苷對(duì)照品峰面積積分值RSD為0.92%,表明此方法精密度較好；重現(xiàn)性結(jié)果顯示,樣品的升麻素苷RSD為0.89%,表明重現(xiàn)性良好；回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示回收率達(dá)到97.52%,RSD為0.95%。含量結(jié)果顯示,三批次的結(jié)果分別為0.82%、0.75%、0.79%,比相關(guān)一些玉屏風(fēng)散普通顆粒中升麻素苷含量要高。實(shí)驗(yàn)選用65日齡三元雜交(D×L×Y)斷奶仔豬50頭,平均體重30公斤,同時(shí)注射豬瘟細(xì)胞苗每頭2頭份,隨機(jī)分為5組：Ⅰ組基礎(chǔ)日糧組加1%玉屏風(fēng)散超微粉：Ⅱ組基礎(chǔ)日糧加0.5%玉屏風(fēng)散超微粉；Ⅲ組基礎(chǔ)日糧加0.1%玉屏風(fēng)散超微粉：Ⅳ組基礎(chǔ)日糧加2%玉屏風(fēng)散粉末；Ⅴ組基礎(chǔ)日糧組。通過(guò)豬瘟免疫后7d、14d、21d、28d對(duì)抗體水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示,在免疫后7d,豬瘟抗體水平開(kāi)始逐漸上升,在免疫后21d達(dá)到最高水平,然后緩慢下降。添加1%玉屏風(fēng)散超微粉組、添加0.5%玉屏風(fēng)散超微粉組、添加0.1%玉屏風(fēng)散超微粉組以及添加2%玉屏風(fēng)散粗粉組豬瘟抗體水平均顯著高于對(duì)照組(P0.05)；添加1%玉屏風(fēng)散超微粉組、添加0.5%玉屏風(fēng)散超微粉組、添加0.1%玉屏風(fēng)散超微粉組豬瘟抗體水平顯著高于添加2%玉屏風(fēng)散粗粉組(P0.05)；添加0.5%玉屏風(fēng)散超微粉組豬瘟抗體水平顯著高于添加1%玉屏風(fēng)散超微粉組和添加0.1%玉屏風(fēng)散超微粉組(P0.05)；添加1%玉屏風(fēng)散超微粉組抗體水平高于添加0.1%玉屏風(fēng)散超微粉組,但差異不顯著(P0.05)。結(jié)果表明：玉屏風(fēng)散超微粉對(duì)豬瘟免疫有顯著增強(qiáng)作用,添加量0.5%為最佳。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,玉屏風(fēng)散各味中藥經(jīng)過(guò)超微粉化后粒徑減小,比表面積增加,流動(dòng)性減小,吸濕性變強(qiáng)。HPLC圖、精密度和回收率實(shí)驗(yàn)表明通過(guò)此方法可行。升麻素苷含量結(jié)果顯示,三批次的結(jié)果分別為0.82%、0.75%、0.79%,比相關(guān)一些玉屏風(fēng)散普通顆粒中升麻素苷含量要高。豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果表明玉屏風(fēng)散超微粉和玉屏風(fēng)散粗粉均可顯著增強(qiáng)豬群免疫功能,提高豬群豬瘟抗體水平,但超微粉效果更佳,且以0.5%添加量最佳。
【關(guān)鍵詞】：玉屏風(fēng)散 超微粉 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 豬瘟免疫 斷奶仔豬
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S853.7
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-12
• 第一章 文獻(xiàn)綜述12-24
• 1 概述12
• 2 豬瘟的研究12-15
• 2.1 豬瘟的研究歷史12-13
• 2.2 豬瘟免疫研究13-15
• 2.2.1 豬瘟免疫程序研究13
• 2.2.2 豬瘟新型疫苗研究進(jìn)展13-14
• 2.2.3 豬瘟抗體的檢測(cè)方法14
• 2.2.4 豬瘟免疫失敗原因及對(duì)策14-15
• 3 中藥多糖免疫劑的研究15-18
• 3.1 中藥多糖免疫機(jī)制研究15-17
• 3.1.1 增加免疫器官重量15-16
• 3.1.2 促進(jìn)體液免疫16
• 3.1.3 促進(jìn)細(xì)胞免疫16
• 3.1.4 其它作用16-17
• 3.2 中藥多糖對(duì)豬免疫作用研究17-18
• 4 玉屏風(fēng)散的研究18-20
• 4.1 玉屏風(fēng)散的介紹18
• 4.2 玉屏風(fēng)散免疫作用機(jī)制18-20
• 4.2.1 玉屏風(fēng)散對(duì)免疫器官作用18
• 4.2.2 玉屏風(fēng)散對(duì)非特異性免疫的作用18-19
• 4.2.3 玉屏風(fēng)散對(duì)特異性免疫的作用19
• 4.2.4 玉屏風(fēng)散對(duì)紅細(xì)胞免疫的影響19-20
• 4.3 玉屏風(fēng)散的臨床應(yīng)用20
• 5 中藥超微粉的研究20-23
• 5.1 中藥超微粉的特點(diǎn)21-22
• 5.1.1 粒徑小21
• 5.1.2 生物利用度高21-22
• 5.1.3 安全性高22
• 5.2 中藥超微粉的臨床應(yīng)用22-23
• 6 研究的目的與意義23-24
• 第二章 玉屏風(fēng)散超微粉的制備及物理性質(zhì)24-29
• 1 材料和方法24-25
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器24
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)藥材及材料24
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器24
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法24-25
• 1.2.1 玉屏風(fēng)散超微粉的制備24
• 1.2.2 不同粉體粒徑測(cè)定24
• 1.2.3 不同粉體比表面積的測(cè)定24-25
• 1.2.4 不同粉體流動(dòng)性的測(cè)定25
• 1.2.5 不同粉體吸濕性的測(cè)定25
• 2 結(jié)果和分析25-28
• 2.1 粒徑和比表面積分析結(jié)果25-27
• 2.2 流動(dòng)性測(cè)定結(jié)果27
• 2.3 吸濕性測(cè)定結(jié)果27-28
• 3 討論28-29
• 第三章 HPLC測(cè)定玉屏風(fēng)散超微粉升麻素苷含量29-33
• 1 材料和方法29-30
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器29
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料29
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器29
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法29-30
• 1.2.1 色譜條件29
• 1.2.2 供試品溶液的制備29
• 1.2.3 對(duì)照品溶液的制備29
• 1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備29
• 1.2.5 精密度試驗(yàn)29-30
• 1.2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)30
• 1.2.7 回收率試驗(yàn)30
• 1.2.8 含量測(cè)定30
• 2 結(jié)果和分析30-32
• 2.1 各種物質(zhì)的HPLC圖30-31
• 2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果31
• 2.3 精密度、重現(xiàn)性、回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果31
• 2.4 含量測(cè)定結(jié)果31-32
• 3 討論32-33
• 第四章 玉屏風(fēng)散超微粉對(duì)豬瘟抗體水平影響研究33-38
• 1 材料和方法33-35
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器33
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料33
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器33
• 1.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物33
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法33-35
• 1.2.1 基礎(chǔ)日糧33-34
• 1.2.2 分組及給藥34
• 1.2.3 飼養(yǎng)方式34
• 1.2.4 樣品的制備34
• 1.2.5 豬瘟抗體檢測(cè)34-35
• 1.2.6 統(tǒng)計(jì)分析35
• 2 結(jié)果和分析35-36
• 3 討論36-38
• 第五章 結(jié)論和創(chuàng)新38-39
• 1 總體結(jié)論38
• 2 創(chuàng)新點(diǎn)38-39
• 附：玉屏風(fēng)散超微粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)39-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 致謝45

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本文編號(hào)：301645