陰地蕨屬（Botrychium Sw.）植物隸屬陰地蕨科（Botrychiaceae）,我國約有12種,分布于全國各地。該屬植物具有清熱解毒、利水消腫、平肝熄風(fēng)等功效,民間多用來治療毒蛇咬傷和肺熱咳嗽等,是常用的民間藥。目前關(guān)于本屬植物的分類學(xué)研究仍然存在諸多爭議。尚不明確的分類學(xué)現(xiàn)狀對該屬藥用植物的資源保護(hù)和開發(fā)利用極為不利。為明確陰地蕨屬藥用植物的分類學(xué)位置及重要光合作用基因分子進(jìn)化機(jī)制,本研究以5種陰地蕨屬藥用植物的葉綠體基因組DNA為模板,通過設(shè)計(jì)特異性引物對mat K、rbcL和psaA三種基因編碼區(qū)全序列進(jìn)行克隆測序,并聯(lián)立GenBank中的報(bào)道序列將54種蕨類植物作為相關(guān)類群,基于“放松分子鐘”模型利用貝葉斯法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,分析了不同數(shù)據(jù)集進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育重建的可信度,并討論了陰地蕨屬植物的系統(tǒng)學(xué)位置及5種陰地蕨屬藥用植物之間的親緣關(guān)系;隨后開展了蕨類植物中常見物種MATK蛋白的適應(yīng)性進(jìn)化、共進(jìn)化研究,并預(yù)測了其理化性質(zhì)。系統(tǒng)發(fā)育研究表明:（1）在蕨類植物系統(tǒng)發(fā)育研究中,matK基因構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹的可信度高于rbcL基因和psaA基因,在蕨類植物分子系統(tǒng)學(xué)研究中有巨大的應(yīng)用... 

【文章來源】： 熊哲銘 湖北中醫(yī)藥大學(xué)

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

本章的技術(shù)路線

5種陰地蕨屬藥用植物的系統(tǒng)分類及分子進(jìn)化研究圖1-3PCR擴(kuò)增樣品的瓊脂糖電泳結(jié)果Fig.1-3PCRsamplesonagarosegel2.6目的片段的克隆2.6.1克隆試劑的配制1）氨芐青霉素溶液：用滅菌超純水將氨芐青霉素干粉配成100mg/mL的溶液，并用0.22μm濾膜過濾除菌，1mL/管分裝后，置于-20℃保存待用；2）LB液體培養(yǎng)基：稱取2.5g胰蛋白胨，1.25g酵母提取物，2.5g氯化鈉，用滅菌超純水定容至250mL，再高壓滅菌即可。液體培養(yǎng)基配制兩份，一份加入250μL氨芐青霉素溶液，一份不加，均置于4℃保存?zhèn)溆茫?）LB固體培養(yǎng)基：稱取2.5g胰蛋白胨，1.25g酵母提取物，2.5g氯化鈉和4gAgar瓊脂粉，用滅菌超純水定容至250mL，再高壓滅菌；滅菌后加入250μL氨芐青霉素溶液，混勻；向一次性培養(yǎng)皿中倒入適量培養(yǎng)基，在紫外燈下開蓋放置15min；蓋上蓋子，用封口膠封邊，并置于4℃保存?zhèn)溆谩?3

5種陰地蕨屬藥用植物的系統(tǒng)分類及分子進(jìn)化研究A：matK數(shù)據(jù)集；B：rbcL數(shù)據(jù)集；C：psaA數(shù)據(jù)集。圖1-4A中的數(shù)字（1-58）代表通過貝葉斯算法得到的節(jié)點(diǎn)序號，詳見表1-6。粗實(shí)線代表該分支后驗(yàn)概率大于90%，藍(lán)色實(shí)線代表該分支后驗(yàn)概率在70%~90%之間，紅色實(shí)線代表該分支后驗(yàn)概率低于70%。23圖1-4單基因數(shù)據(jù)集構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.1-4Phylogenetictreesconstructedfromsinglegenedataset

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]陰地蕨化學(xué)成分提取分離及其生物活性分析[D]. 周施雨.上海師范大學(xué) 2019
[2]陰地蕨藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其總黃酮抗氧化活性研究[D]. 趙之麗.湖北中醫(yī)藥大學(xué) 2018



本文編號：2970813