陰地蕨屬（Botrychium Sw.）植物隸屬陰地蕨科（Botrychiaceae）,我國約有12種,分布于全國各地。該屬植物具有清熱解毒、利水消腫、平肝熄風等功效,民間多用來治療毒蛇咬傷和肺熱咳嗽等,是常用的民間藥。目前關于本屬植物的分類學研究仍然存在諸多爭議。尚不明確的分類學現(xiàn)狀對該屬藥用植物的資源保護和開發(fā)利用極為不利。為明確陰地蕨屬藥用植物的分類學位置及重要光合作用基因分子進化機制,本研究以5種陰地蕨屬藥用植物的葉綠體基因組DNA為模板,通過設計特異性引物對mat K、rbcL和psaA三種基因編碼區(qū)全序列進行克隆測序,并聯(lián)立GenBank中的報道序列將54種蕨類植物作為相關類群,基于“放松分子鐘”模型利用貝葉斯法構建系統(tǒng)發(fā)育樹,分析了不同數據集進行系統(tǒng)發(fā)育重建的可信度,并討論了陰地蕨屬植物的系統(tǒng)學位置及5種陰地蕨屬藥用植物之間的親緣關系;隨后開展了蕨類植物中常見物種MATK蛋白的適應性進化、共進化研究,并預測了其理化性質。系統(tǒng)發(fā)育研究表明:（1）在蕨類植物系統(tǒng)發(fā)育研究中,matK基因構建系統(tǒng)發(fā)育樹的可信度高于rbcL基因和psaA基因,在蕨類植物分子系統(tǒng)學研究中有巨大的應用... 

【文章來源】： 熊哲銘 湖北中醫(yī)藥大學

【文章頁數】：88 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

本章的技術路線

5種陰地蕨屬藥用植物的系統(tǒng)分類及分子進化研究圖1-3PCR擴增樣品的瓊脂糖電泳結果Fig.1-3PCRsamplesonagarosegel2.6目的片段的克隆2.6.1克隆試劑的配制1）氨芐青霉素溶液：用滅菌超純水將氨芐青霉素干粉配成100mg/mL的溶液，并用0.22μm濾膜過濾除菌，1mL/管分裝后，置于-20℃保存待用；2）LB液體培養(yǎng)基：稱取2.5g胰蛋白胨，1.25g酵母提取物，2.5g氯化鈉，用滅菌超純水定容至250mL，再高壓滅菌即可。液體培養(yǎng)基配制兩份，一份加入250μL氨芐青霉素溶液，一份不加，均置于4℃保存?zhèn)溆茫?）LB固體培養(yǎng)基：稱取2.5g胰蛋白胨，1.25g酵母提取物，2.5g氯化鈉和4gAgar瓊脂粉，用滅菌超純水定容至250mL，再高壓滅菌；滅菌后加入250μL氨芐青霉素溶液，混勻；向一次性培養(yǎng)皿中倒入適量培養(yǎng)基，在紫外燈下開蓋放置15min；蓋上蓋子，用封口膠封邊，并置于4℃保存?zhèn)溆谩?3

5種陰地蕨屬藥用植物的系統(tǒng)分類及分子進化研究A：matK數據集；B：rbcL數據集；C：psaA數據集。圖1-4A中的數字（1-58）代表通過貝葉斯算法得到的節(jié)點序號，詳見表1-6。粗實線代表該分支后驗概率大于90%，藍色實線代表該分支后驗概率在70%~90%之間，紅色實線代表該分支后驗概率低于70%。23圖1-4單基因數據集構建的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.1-4Phylogenetictreesconstructedfromsinglegenedataset

【參考文獻】：
期刊論文
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[10]中國現(xiàn)代石松類和蕨類的系統(tǒng)發(fā)育與分類系統(tǒng)[J]. 張憲春,衛(wèi)然,劉紅梅,何麗娟,王麗,張鋼民.  植物學報. 2013(02)

碩士論文
[1]陰地蕨化學成分提取分離及其生物活性分析[D]. 周施雨.上海師范大學 2019
[2]陰地蕨藥材質量標準及其總黃酮抗氧化活性研究[D]. 趙之麗.湖北中醫(yī)藥大學 2018



本文編號：2970813