梨是重要的溫帶落葉果樹,冬季需經(jīng)休眠度過(guò)外界極端低溫的不利環(huán)境。梨樹休眠的打破,需要一定時(shí)長(zhǎng)的低溫積累,若在此過(guò)程中低溫積累時(shí)長(zhǎng)不足,會(huì)對(duì)梨樹來(lái)年的開花結(jié)果產(chǎn)生危害,使得梨樹產(chǎn)量降低、品質(zhì)變差,嚴(yán)重時(shí)還會(huì)危及樹體壽命。已有研究發(fā)現(xiàn),屬于MADS-box轉(zhuǎn)錄因子家族SVP亞族的DAM基因在薔薇科植物休眠過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵調(diào)控作用。目前關(guān)于DAM基因的上下游基因及調(diào)控機(jī)制的研究雖取得了一定進(jìn)展但仍存在許多未解之處。為明確DAM基因參與休眠過(guò)程調(diào)控的分子機(jī)制,本研究以‘碭山酥’梨花芽為研究材料,選定前人研究發(fā)現(xiàn)的PpyMADS71（PpyDAM1）為主要研究對(duì)象,對(duì)其上游調(diào)控因子展開挖掘與初步分析。具體工作及主要結(jié)果如下:1.梨PpyMADS71上游調(diào)控因子的探索利用酵母單雜交文庫(kù)篩選的方法,尋找到3個(gè)可與PpyMADS71啟動(dòng)子互作的轉(zhuǎn)錄因子:PpyERF060、PpyGBF及PpyRAP2.4。通過(guò)這三個(gè)基因在‘碭山酥’梨休眠期間的表達(dá)模式、亞細(xì)胞定位、酵母轉(zhuǎn)錄激活活性試驗(yàn)及雙熒光素酶試驗(yàn),初步確定其定位于細(xì)胞核內(nèi)、在‘碭山酥’梨休眠期間存在表達(dá)上調(diào)高峰且對(duì)PpyMADS71的啟動(dòng)子表達(dá)具有... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

植物生長(zhǎng)-休眠的年生長(zhǎng)周期（Horvath等，2003）

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文（2020）1緒論8表達(dá)趨勢(shì)與桃花芽萌發(fā)的趨勢(shì)相反，而DAM3對(duì)光周期變化不敏感，在冬季開圖1.2不同物種DAM基因系統(tǒng)進(jìn)化分析及梨、桃DAM基因共線性分析（鄢馨卉，2019）（a）MADS-box基因家族系統(tǒng)進(jìn)化分析進(jìn)化枝。（b）DAM基因染色體共線性分析。Fig.1.2PhylogeneticanalysisofDAMgenesandcollinearityanalysisbetweenpearandpeachDAMgenes（a）MADS-boxgenefamilyphylogeneticanalysisclade.（b）Co-linearAnalysisofDAMGene.始表達(dá)降低。Jiménez等（2009）通過(guò)對(duì)不同桃品種的研究發(fā)現(xiàn)，在休眠過(guò)程中

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文（2020）1緒論10基因的表達(dá)（Singh等，2018）。本課題組近期的研究表明，內(nèi)源ABA通過(guò)激活PpyABF3調(diào)控梨PpyDAM3基因的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而調(diào)控休眠進(jìn)程（未發(fā)表數(shù)據(jù)）。DAM下游靶基因的探索對(duì)揭示其具體調(diào)控方式具有重要意義，目前對(duì)于DAM靶基因的研究，主要集中在對(duì)FT的研究上。在對(duì)擬南芥的研究中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)T可以作為成花素進(jìn)行傳遞，誘導(dǎo)擬南芥開花，在多年生木本植物楊樹中也存在PtFT1及PtFT2等與擬南芥FT基因的同源基因，在楊樹中過(guò)表達(dá)PtFT1可以對(duì)短日照誘導(dǎo)的楊樹生長(zhǎng)停滯產(chǎn)生抑制，這表明受光周期誘導(dǎo)的成花途徑與楊樹的休眠過(guò)程相關(guān)（Bohlenius等，2006；Hsu等，2011）。Lee等（2007）在擬南芥中的研究發(fā)現(xiàn)，DAM基因在擬南芥中的同源基因SVP可以直接結(jié)合在FT的啟動(dòng)子上，并對(duì)FT的表達(dá)產(chǎn)生抑制作用，從而使得擬南芥呈現(xiàn)出晚花表型；Hao等（2015）研究發(fā)現(xiàn)，在乳漿草中，DAM基因與FT基因擁有同樣的表達(dá)模式，并且DAM可以結(jié)合到FT的啟動(dòng)子上從而對(duì)其表達(dá)產(chǎn)生抑制。此外，楊樹中SVL基因過(guò)表達(dá)后，楊樹的休眠程度加深，而SVL對(duì)GA20ox（赤霉素降解酶）基因基因的表達(dá)具有抑制作用，同時(shí)SVL也可促進(jìn)NCED3（編碼ABA合成關(guān)鍵酶）及的PCAR/PYL1、PCAR/PYL2（ABA信號(hào)傳遞過(guò)程中激活下游基因表達(dá)）的表達(dá)（Singh等，2018；圖1.3），這些都可能是DAM基因的下游靶基因。圖1.3楊樹芽休眠解除遺傳調(diào)控網(wǎng)絡(luò)（Singh等，2018）Fig.1.3Ageneticnetworkmediatingthecontrolofbudbreakinhybridaspen

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[3]梨花芽休眠轉(zhuǎn)換的分子網(wǎng)絡(luò)及調(diào)控機(jī)制[D]. 牛慶豐.浙江大學(xué) 2016
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碩士論文
[1]梨休眠相關(guān)DAM基因的鑒定及功能分析[D]. 鄢馨卉.浙江大學(xué) 2019
[2]中國(guó)櫻桃花芽休眠相關(guān)MADS-box轉(zhuǎn)錄因子克隆與功能分析[D]. 邵姁.浙江師范大學(xué) 2016
[3]桃芽自然休眠誘導(dǎo)與短時(shí)間高溫破眠機(jī)制研究[D]. 王海波.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號(hào)：2970812