發(fā)布時(shí)間：2017-04-04 14:16

  本文關(guān)鍵詞：江西葡萄生長(zhǎng)后期3種爛果病害病原菌的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：葡萄,是江西近年發(fā)展較快的果樹(shù)樹(shù)種之一,然而,隨著其栽培面積的不斷擴(kuò)大,在生產(chǎn)中容易出現(xiàn)掛果后期的大量腐爛問(wèn)題,對(duì)葡萄生產(chǎn)造成了嚴(yán)重影響。有關(guān)葡萄掛果后期的腐爛問(wèn)題,國(guó)內(nèi)外研究較少。本論文在前期初步研究的基礎(chǔ)上,擬采用形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)方法對(duì)江西3種主要葡萄爛果病害即苦腐病、白腐病和潰瘍病進(jìn)行了病原種類歸屬鑒定,并對(duì)其病菌生物學(xué)特性進(jìn)行了研究,同時(shí)對(duì)葡萄苦腐病菌的分子檢測(cè)技術(shù)和7種殺菌劑對(duì)栗生墊殼孢的室內(nèi)毒力進(jìn)行了研究,獲得如下研究結(jié)果：(1)通過(guò)病菌分離、致病性測(cè)定,并依據(jù)病菌培養(yǎng)性狀、形態(tài)學(xué)特征,結(jié)合ITS、LSU等序列分析,確定引起我省葡萄苦腐病病原為Greeneria uvicola;葡萄白腐病病原鑒定為白腐墊殼孢(Coniella diplodiella)和栗生墊殼孢(Ccastaneicola),其中白腐墊殼孢是主要病原菌(占87.1%)；葡萄潰瘍病病原為葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)、可可球二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)和新殼梭孢菌(Neofusicoccum parvum),各類型菌落的分出占有率分別為83.8%、2.7%、13.5%。(2)在生物學(xué)特性實(shí)驗(yàn)中,G. uvicola菌絲生長(zhǎng)最適宜培養(yǎng)基為PSA培養(yǎng)基；在5～32℃范圍內(nèi)均可生長(zhǎng),最適生長(zhǎng)溫度為28℃,致死溫度為53℃、10 min；最適pH值為5；光照對(duì)該菌絲的生長(zhǎng)無(wú)顯著影響；最佳碳氮源分別為蔗糖和牛肉膏。C. castaneicola菌絲生長(zhǎng)以AEA培養(yǎng)基為最適；能有效利用多種糖和氮源,分別以甘露醇和NH4NO3最佳；菌絲適宜生長(zhǎng)溫度為25～30℃；菌絲生長(zhǎng)喜酸性環(huán)境,最適pH4～6；12h光暗交替更有利于菌絲生長(zhǎng)；菌絲致死溫度為58℃、10 min。B. dothidea菌絲生長(zhǎng)最適宜培養(yǎng)基為PSA培養(yǎng)基；在10～32℃范圍內(nèi)均可生長(zhǎng),最適生長(zhǎng)溫度為30℃,致死溫度為54℃、10 min;最適pH值為8；全光照更有利于菌絲的生長(zhǎng)；最佳碳氮源分別為甘露醇和牛肉膏。(3)通過(guò)設(shè)計(jì)G. uvicola特異性檢測(cè)引物GF3 (5'-GGTGGCCCTGTAAACT CTTGT-3')和GR3 (5'-TGATCCGAGGTCAACTTTCAG-3'),建立了G. uvicola巢式PCR、實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)體系；在C. castaneicola殺菌劑室內(nèi)毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)中,氟環(huán)唑SC、氟硅唑EC對(duì)C. castaneicola有著很強(qiáng)的毒力,ECso值分別為0.0719、0.0876μg/mL。
【關(guān)鍵詞】：葡萄苦腐病 葡萄白腐病 葡萄潰瘍病 病原鑒定 生物學(xué)特性
【學(xué)位授予單位】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S436.631
【目錄】：

• 摘要7-8
• Abstract8-10
• 縮寫(xiě)詞及英漢對(duì)照10-12
• 第一章 文獻(xiàn)綜述12-25
• 1 葡萄生產(chǎn)后期爛果病害概況12-13
• 1.1 葡萄生產(chǎn)后期爛果病害種類及其病原12
• 1.2 引起葡萄生產(chǎn)后期爛果病害研究現(xiàn)狀12-13
• 2 葡萄苦腐病研究進(jìn)展13-16
• 2.1 葡萄苦腐病的分布及危害13-14
• 2.2 病原菌寄主范圍及形態(tài)特征14
• 2.3 葡萄苦腐病菌分類地位14
• 2.4 葡萄苦腐病菌生物學(xué)特性14-15
• 2.5 葡萄苦腐病病害循環(huán)過(guò)程15
• 2.6 葡萄苦腐病的防治15-16
• 2.6.1 農(nóng)業(yè)防治15-16
• 2.6.2 生物防治16
• 2.6.3 化學(xué)防治16
• 2.7 葡萄苦腐病菌的分子檢測(cè)手段16
• 3 葡萄白腐病研究進(jìn)展16-20
• 3.1 葡萄白腐病的分布、危害16-17
• 3.2 葡萄白腐病病原菌種類及形態(tài)特征17
• 3.3 葡萄白腐病菌分類地位17
• 3.4 葡萄白腐病菌生物學(xué)特性17-18
• 3.5 葡萄白腐病病害循環(huán)過(guò)程18
• 3.6 品種抗病性18
• 3.7 葡萄白腐病的防治18-19
• 3.8 Coniella屬內(nèi)種的分類依據(jù)19-20
• 4 葡萄潰瘍病研究進(jìn)展20-23
• 4.1 葡萄潰瘍病的分布及危害20-21
• 4.2 葡萄潰瘍病癥狀21
• 4.3 葡萄潰瘍病病原種類21
• 4.4 葡萄潰瘍病菌生物學(xué)特性21
• 4.5 葡萄潰瘍病病害循環(huán)過(guò)程21-22
• 4.6 葡萄潰瘍病的防治22
• 4.7 核酸序列分析在葡萄潰瘍病菌鑒定中的應(yīng)用22-23
• 5 本論文的研究背景及研究?jī)?nèi)容23
• 5.1 本論文的研究背景23
• 5.2 本論文的研究?jī)?nèi)容23
• 6 本研究的目的與意義23-24
• 7 本論文技術(shù)路線24-25
• 第二章 葡萄苦腐病病原鑒定、生物學(xué)特性及分子檢測(cè)技術(shù)研究25-43
• 1 材料及方法25-31
• 1.1 材料25-26
• 1.1.1 供試培養(yǎng)基25-26
• 1.1.2 主要試劑及配置26
• 1.2 方法26-31
• 1.2.1 病害田間癥狀描述及樣品采集26
• 1.2.2 病原菌的分離及菌種保藏26-27
• 1.2.3 致病性測(cè)定27
• 1.2.4 病原菌形態(tài)學(xué)鑒定27
• 1.2.5 病原菌分子生物學(xué)鑒定27-28
• 1.2.6 病原菌生物學(xué)特性測(cè)定28-29
• 1.2.7 G.uvicola分子檢測(cè)技術(shù)研究29-31
• 2 結(jié)果與分析31-41
• 2.1 病果癥狀描述及病原菌致病性測(cè)定31-32
• 2.2 病原菌的形態(tài)及分子生物鑒定32-35
• 2.2.1 病原菌培養(yǎng)性狀及形態(tài)特征32-33
• 2.2.2 病原菌分子生物學(xué)鑒定結(jié)果33-35
• 2.3 葡萄苦腐病菌生物學(xué)特性研究35-38
• 2.3.1 培養(yǎng)基對(duì)G.uvicola菌絲生長(zhǎng)的影響35
• 2.3.2 溫度對(duì)G.uvicola菌絲生長(zhǎng)的影響35-36
• 2.3.3 pH對(duì)G.uvicola菌絲生長(zhǎng)的影響36
• 2.3.4 光照對(duì)G.uvicola菌絲生長(zhǎng)的影響36
• 2.3.5 碳源對(duì)G.uvicola菌絲生長(zhǎng)的影響36-37
• 2.3.6 氮源對(duì)G.uvicola菌絲生長(zhǎng)的影響37-38
• 2.3.7 G.uvicola菌絲致死溫度38
• 2.4 葡萄苦腐病菌分子檢測(cè)技術(shù)研究38-41
• 2.4.1 引物特異性驗(yàn)證38
• 2.4.2 引物的靈敏性驗(yàn)證38
• 2.4.3 巢式PCR檢測(cè)體系建立及引物靈敏度驗(yàn)證38-40
• 2.4.4 qPCR檢測(cè)體系建立及靈敏度測(cè)定40
• 2.4.5 江西各地爛果樣品G.uvicola帶菌情況40-41
• 3 結(jié)論與討論41-43
• 第三章 葡萄白腐病病原鑒定、生物學(xué)特性及室內(nèi)藥劑篩選43-60
• 1 材料及方法43-47
• 1.1 材料43-44
• 1.1.1 主要供試培養(yǎng)基43
• 1.1.2 主要試劑及配置43-44
• 1.1.3 供試殺菌劑44
• 1.2 方法44-47
• 1.2.1 病害田間癥狀描述及樣品采集44
• 1.2.2 病原菌的分離培養(yǎng)及菌種保存44
• 1.2.3 致病性測(cè)定44
• 1.2.4 病原菌形態(tài)學(xué)鑒定44-45
• 1.2.5 病原菌分子生物學(xué)鑒定45-46
• 1.2.6 病原菌C. castaneicola生物學(xué)特性測(cè)定46
• 1.2.7 7種殺菌劑對(duì)C. castaneicola的毒力測(cè)定46-47
• 2 結(jié)果與分析47-58
• 2.1 病果癥狀描述及病原菌致病性測(cè)定47
• 2.2 病原菌的形態(tài)及分子生物鑒定47-51
• 2.2.1 病原菌培養(yǎng)性狀及形態(tài)特征47-49
• 2.2.2 病原菌分子生物學(xué)鑒定結(jié)果49-51
• 2.3 栗生墊殼孢生物學(xué)特性研究51-54
• 2.3.1 培養(yǎng)基對(duì)C.castaneicola菌絲生長(zhǎng)的影響51
• 2.3.2 溫度對(duì)C.castaneicola菌絲生長(zhǎng)的影響51
• 2.3.3 pH對(duì)C.castaneicola菌絲生長(zhǎng)的影響51-52
• 2.3.4 光照對(duì)C castaneicola菌絲生長(zhǎng)的影響52
• 2.3.5 碳源對(duì)C.castaneicola菌絲生長(zhǎng)的影響52
• 2.3.6 氮源對(duì)C.castaneicola菌絲生長(zhǎng)的影響52-53
• 2.3.7 C.castaneicola菌絲致死溫度53-54
• 2.4 7種殺菌劑對(duì)C.castaneicola的毒力測(cè)定54-58
• 2.4.1 7種殺菌劑對(duì)C.castaneicola的抑菌率54-57
• 2.4.2 7種殺菌劑對(duì)C.castaneicola的毒力57-58
• 3 結(jié)論與討論58-60
• 第四章 葡萄潰瘍病病原菌鑒定及其生物學(xué)特性研究60-74
• 1 材料及方法60-63
• 1.1 材料60
• 1.2 方法60-63
• 1.2.1 病害田間調(diào)查及癥狀描述60
• 1.2.2 病原菌的分離培養(yǎng)及致病性測(cè)定60
• 1.2.3 病原菌形態(tài)學(xué)鑒定60-61
• 1.2.4 病原菌分子生物學(xué)鑒定61
• 1.2.5 B.dothiaea生物學(xué)特性測(cè)定61-63
• 2 結(jié)果與分析63-72
• 2.1 病果癥狀描述及病原菌致病性測(cè)定63
• 2.2 病原菌的形態(tài)學(xué)鑒定63-65
• 2.3 病原菌分子生物學(xué)鑒定結(jié)果65-69
• 2.3.1 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳檢測(cè)65-66
• 2.3.2 基因序列分析66-69
• 2.4 葡萄座腔菌生物學(xué)特性研究69-72
• 2.4.1 培養(yǎng)基對(duì)B.dothidea菌絲生長(zhǎng)的影響69
• 2.4.2 溫度對(duì)B.dothidea菌絲生長(zhǎng)的影響69
• 2.4.3 pH對(duì)B.dothidea菌絲生長(zhǎng)的影響69-70
• 2.4.4 光照對(duì)B.dothidea菌絲生長(zhǎng)的影響70
• 2.4.5 碳源對(duì)B.dothidea菌絲生長(zhǎng)的影響70-71
• 2.4.6 氮源對(duì)B.dothidea菌絲生長(zhǎng)的影響71-72
• 2.4.7 B.dothidea菌絲致死溫度72
• 3 結(jié)論與討論72-74
• 參考文獻(xiàn)74-80
• 致謝80-81
• 附件81

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本文編號(hào)：285687