本文關(guān)鍵詞：遼寧絨山羊POMP基因在毛囊發(fā)育中的表達(dá)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：在本實(shí)驗(yàn)室前期構(gòu)建的遼寧絨山羊毛囊興盛期cDNA質(zhì)粒文庫(kù)中,經(jīng)拼接測(cè)通后得到了遼寧絨山羊proteasome maturation protein(POMP)基因序列,旨在研究遼寧絨山羊PMOP基因在毛囊發(fā)育與絨毛生長(zhǎng)中的作用。首先對(duì)POMP基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析,然后利用原位雜交技術(shù)對(duì)其進(jìn)行定位分析;RT-PCR檢測(cè)POMP基因在心、肝、腎、肺、脾、皮膚中表達(dá)信號(hào);Real Time PCR檢測(cè)該基因在毛囊發(fā)育的三個(gè)階段的表達(dá)以及加入外源褪黑激素和FGF5以及IGF-1三種因子對(duì)遼寧絨山羊成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)后細(xì)胞中POMP基因的表達(dá)量變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:生物信息學(xué)分析表明,遼寧絨山羊POMP基因全長(zhǎng)1278bp,編碼141個(gè)氨基酸,該蛋白基因與牛屬同源性最高;原位雜交結(jié)果顯示,在初、次級(jí)毛囊中,POMP在內(nèi)根鞘中表達(dá)強(qiáng)烈,在皮質(zhì)層、角質(zhì)層以及髓質(zhì)中也存在表達(dá),外根鞘中未出現(xiàn)表達(dá)信號(hào);RT-PCR顯示,POMP基因在心、肝、腎、肺、脾、皮膚中均有表達(dá);Real Time PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,在遼寧絨山羊絨毛生長(zhǎng)興盛期和退行期,POMP基因次級(jí)毛囊中的表達(dá)量均高于初級(jí)毛囊中的表達(dá)量;外源褪黑激素、FGF5以及IGF-5細(xì)胞因子分別處理成纖維細(xì)胞結(jié)果顯示,分別加入外源褪黑激素和IGF-1后POMP基因表達(dá)量低于對(duì)照組,加入10^(-5)g/L外源FGF5在處理羊成纖維細(xì)胞24小時(shí)后,POMP基因的表達(dá)量高于對(duì)照組。此外,褪黑激素和FGF5協(xié)同處理細(xì)胞后POMP的表達(dá)量低于對(duì)照組,褪黑激素與IGF-1協(xié)同作用于成纖維細(xì)胞后POMP基因表達(dá)量高于對(duì)照組。結(jié)論:POMP基因普遍存在于遼寧絨山羊各組織器官中,且參與調(diào)控初、次級(jí)毛囊發(fā)育的過(guò)程;外源褪黑激素和IGF-1能夠抑制POMP基因的表達(dá);10^(-5)g/L外源FGF5作用于羊成纖維細(xì)胞24小時(shí),可提高POMP基因的表達(dá);褪黑激素和FGF5協(xié)同可抑制POMP基因的表達(dá),而褪黑激素與IGF-1協(xié)同作用可提高該基因的表達(dá)量。本實(shí)驗(yàn)為進(jìn)一步研究POMP在遼寧絨山羊絨毛生長(zhǎng)中的遺傳作用機(jī)制提供了一定的理論基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：POMP基因 信息學(xué)分析 原位雜交 熒光定量 MT FGF5 IGF-1
【學(xué)位授予單位】：遼寧師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S827
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 1 研究背景8-11
• 1.1 蛋白酶成熟蛋白（Proteasome maturation protein，POMP）8
• 1.2 遼寧絨山羊8-9
• 1.3 褪黑激素（MT）9
• 1.4 成纖維細(xì)胞因子FGF-59
• 1.5 類(lèi)胰島素細(xì)胞因子（IGF-1）9-10
• 1.6 研究目的及意義10-11
• 2 材料與方法11-20
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料11-12
• 2.1.1 樣本采集11
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器11-12
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法12-20
• 2.2.1 POMP基因信息學(xué)分析12-13
• 2.2.2 遼寧絨山羊初、次級(jí)毛囊的分離及其總RNA提取13-14
• 2.2.3 遼寧絨山羊原代皮膚細(xì)胞培養(yǎng)14-16
• 2.2.4 半定量RT-PCR16
• 2.2.5 實(shí)時(shí)定量PCR16-17
• 2.2.6 原位雜交17-18
• 2.2.7 褪黑激素、FGF5和IGF-5 分別處理羊成纖維細(xì)胞18-19
• 2.2.8 MT與IGF-1(MT與FGF5)協(xié)同培養(yǎng)羊成纖維細(xì)胞19
• 2.2.9 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計(jì)19-20
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-39
• 3.1 蛋白酶成熟蛋白的物信息學(xué)分析20-26
• 3.2 RNA提取結(jié)果26-27
• 3.3 RT-PCR結(jié)果27-28
• 3.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-29
• 3.5 原位雜交結(jié)果29-30
• 3.6 褪黑激素處理羊體側(cè)成纖維細(xì)胞30-32
• 3.7 FGF5處理羊體側(cè)成纖維細(xì)胞32-34
• 3.8 IGF-1 處理羊體側(cè)成纖維細(xì)胞34-37
• 3.9 褪黑激素與FGF5協(xié)同處理成纖維細(xì)胞37
• 3.10 褪黑激素與IGF-1 協(xié)同處理成纖維細(xì)胞37-39
• 4 討論39-41
• 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 附錄A β-Actin與POMP基因在初、次級(jí)毛囊中的擴(kuò)增曲線和溶解曲線46-47
• 附錄B β-Actin與POMP基因在褪黑激素處理皮膚成纖維細(xì)胞中的擴(kuò)增曲線和溶解曲線47-51
• 附錄C β-Actin與POMP基因在FGF5處理皮膚成纖維細(xì)胞中的擴(kuò)增曲線和溶解曲線51-56
• 附錄D β-Actin與POMP基因在IGF-1 處理皮膚成纖維細(xì)胞中的擴(kuò)增曲線和溶解曲線56-61
• 附錄E β-Actin與POMP基因在MT與FGF5協(xié)同處理皮膚成纖維細(xì)胞24小時(shí)中的擴(kuò)增曲線和溶解曲線61-62
• 附錄F β-Actin與POMP基因在MT與IGF-1 協(xié)同處理皮膚成纖維細(xì)胞24小時(shí)中的擴(kuò)增曲線和溶解曲線62-63
• 致謝63

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4 姜懷志,王淑萍,馬寧;遼寧絨山羊的生態(tài)環(huán)境、生態(tài)特征及開(kāi)發(fā)利用[J];家畜生態(tài);2001年01期

5 王世權(quán);遼寧絨山羊[J];新農(nóng)業(yè);2001年03期

6 田翠珍,張顯柱,呂赫,滕遠(yuǎn);遼寧絨山羊季節(jié)性舍飼的可行性研究[J];中國(guó)草食動(dòng)物;2002年05期

7 王春景,李長(zhǎng)存,韓存魁;遼寧絨山羊改良化隆山羊的效果調(diào)查[J];遼寧畜牧獸醫(yī);2002年02期

8 張世偉,宋先忱,王世權(quán);遼寧絨山羊舍飼及半舍飼效果的調(diào)查報(bào)告[J];遼寧畜牧獸醫(yī);2002年03期

9 劉勝華,史良;遼寧絨山羊育種管理系統(tǒng)的設(shè)計(jì)[J];遼寧畜牧獸醫(yī);2002年04期

10 孔繁臣,耿秀露;遼寧絨山羊繁育體系模式探討[J];遼寧畜牧獸醫(yī);2003年03期

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1 楊文凱;;提高遼寧絨山羊育肥經(jīng)濟(jì)效益的措施簡(jiǎn)述[A];2010中國(guó)羊業(yè)進(jìn)展[C];2010年

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1 焦宏;遼寧絨山羊助農(nóng)牧民增收[N];中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào);2008年

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8 記者 徐鐵英;遼寧絨山羊單產(chǎn)創(chuàng)國(guó)內(nèi)新高[N];遼寧日?qǐng)?bào);2011年

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10 記者　鄭有勝;遼陽(yáng)打造遼寧絨山羊產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢(shì)區(qū)[N];遼寧日?qǐng)?bào);2006年

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1 劉紅亮;基于高通量測(cè)序的遼寧絨山羊轉(zhuǎn)錄組研究與應(yīng)用[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

2 張帆;遼寧絨山羊品種資源保護(hù)與利用研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

3 展微;遼寧絨山羊公羊精子發(fā)生與生精性能的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 張麗麗;MP1基因在遼寧絨山羊皮膚的表達(dá)研究[D];遼寧師范大學(xué);2015年

5 王瑞龍;遼寧絨山羊蛋白脂質(zhì)蛋白質(zhì)基因（PLP2）的表達(dá)研究[D];遼寧師范大學(xué);2015年

6 段紅香;遼寧絨山羊新基因OCIAD2生物學(xué)功能研究[D];遼寧師范大學(xué);2015年

7 黃楠;遼寧絨山羊POMP基因在毛囊發(fā)育中的表達(dá)研究[D];遼寧師范大學(xué);2015年

8 劉海斌;蛋白水平對(duì)舍飼遼寧絨山羊生產(chǎn)性能及消化代謝的影響[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

9 董李學(xué);遼寧絨山羊多胎候選基因的研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

10 張曦;不同硫水平日糧對(duì)遼寧絨山羊生絨期消化代謝及產(chǎn)絨性能的影響[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

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