發(fā)布時間：2018-08-27 17:44

【摘要】：柑橘作為世界四大水果之一,是全球產(chǎn)量第一、被新鮮食用量第一的水果。但是,由于柑橘類果實組織柔軟多汁且富含糖分,在摘采后的貯存運輸過程中易發(fā)生機械損傷,受到多種侵染性病害,因而導致腐爛變質(zhì)。不僅影響水果質(zhì)量,造成嚴重的經(jīng)濟損失,還會引起食品安全問題。柑橘的腐爛變質(zhì)多數(shù)由真菌引起,目前常見的防腐措施仍以化學藥劑為主,化學藥劑殺菌雖然有效,但藥劑殘留會對消費者有影響,對環(huán)境也會造成污染,并且病原微生物耐藥性的增加也會使得化學藥劑使用效果下降。尋找新的天然抗菌劑成為人們的研究目標。精油是從植物的花、葉、莖、根或果實中提煉萃取的揮發(fā)性芳香油狀液體的總稱。研究表明,精油具有廣譜強抗菌性,對細菌、真菌和病毒都有很好的抑殺作用,因此可以作為天然防腐抑菌劑用于食品中對微生物污染的控制。目前國內(nèi)對于精油對微生物的抑制作用研究很多,部分也分析了精油的主要組成成分及含量,但是對于這些主要組分對于微生物的抑菌活性研究并不多。為了探究精油對柑橘采后致腐真菌的抑菌活性及有效抑菌成分,本研究從發(fā)霉柑橘中分離出5種真菌,經(jīng)ITS測序鑒定分別為可可毛色二孢菌Lasiodiplodia theobromae、芽枝狀枝孢菌 Cladosporium cladosporioides、蕓苔生鏈格孢Alternaria brassicae、指狀青霉 Penicillium digitatum、青霉 Penicillium sp.13 BRO-2013。采用濾紙片法測定肉桂(Cinnamomum zeylanicum)精油、百里香(Thymusvulgaris)精油、香茅(Cymbopogon nardus)精油、天竺葵(Pelargonium graveolens)精油、(Eucalyptus globulus)精油、廣藿香)(Pogostemon cablin)精油、雪松(Cedrusatl antica)精油和香櫞(Citruslimon)精油等8種精油對分離純化得到的5種柑橘采后致腐真菌的抑菌活性。結(jié)果表明,肉桂精油和百里香精油具有較強的廣譜抗真菌活性。氣質(zhì)聯(lián)用分析兩種精油的組分及含量,肉桂精油共檢測出61種成分,主要含有丁香酚(70.38%)、β-石竹烯(7.52%)、苯甲酸芐酯(6.23%)和肉桂醛(4.65%),百里香精油檢測出67種成分,主要含有百里香酚(48.97%)、對傘花烴(22.95%)、3-甲基-4異丙基苯酚(12.41%)和萜品烯(3.19%)。采用液體培養(yǎng)基稀釋法測定6種精油成分(丁香酚、苯甲酸芐酯、肉桂醛、百里香酚、對傘花烴和3-甲基-4異丙基苯酚)對5種病原真菌的最低抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MFC),結(jié)果顯示液體化合物中肉桂醛對 5 種真菌的 MIC 和 MFC 范圍均為 0.016-0.125μL/mL 和 0.016-0.125μL/mL,均有極好的抑殺作用且無抗藥性;固體化合物中百里香酚對5種真菌的MIC和MFC 為 51.2μg/mL-204.8μg/mL 和 102.4μg/mL-819.2μg/mL,有顯著的抑菌作用,部分真菌對其有抗藥性。研究表明,百里香精油和肉桂精油均具有良好的廣譜抗真菌活性,其各自含有的百里香酚和肉桂醛成分也均有顯著的抑菌作用,為柑橘類果實天然抑菌劑的研制提供理論依據(jù)。
[Abstract]:Citrus is one of the four largest fruits in the world. However, due to the soft and juicy tissue and rich in sugar, citrus fruits are prone to mechanical damage during storage and transportation after picking and harvesting, and suffer from various infectious diseases, which lead to decay and deterioration. Not only affect fruit quality, cause serious economic losses, but also cause food safety problems. The decay and deterioration of citrus is mostly caused by fungi. At present, the common anticorrosion measures are still mainly chemical fungicides. Although chemical fungicides are effective in sterilization, pesticide residues will have an impact on consumers and will also cause pollution to the environment. And the increase of drug resistance of pathogenic microorganisms will also reduce the use of chemical agents. Finding new natural antimicrobial agents has become a research goal. Essential oil is a general term for volatile oils extracted from flowers, leaves, stems, roots, or fruits of plants. The results showed that the essential oil had broad spectrum and strong antibacterial properties, and could be used as a natural anticorrosive and bacteriostasis agent to control the microbial contamination in food because of its good inhibitory effect on bacteria, fungi and viruses. At present, there are a lot of studies on the inhibition of essential oils on microorganisms, some of which have also analyzed the main components and contents of essential oils, but there are few studies on the bacteriostatic activities of these main components to microorganisms. In order to investigate the antimicrobial activity and effective antimicrobial components of essential oil against postharvest rot fungi, five fungi were isolated from moldy citrus. By ITS sequencing, they were identified as Lasiodiplodia theobromae, Lasiodiplodia theobromae, Cladosporium spp., Cladosporium cladosporioides, Brassica, Alternaria Alternaria brassicae, Penicillium digitalis, Penicillium digitatum, Penicillium Penicillium sp.13 BRO-2013., respectively. The essential oil of cinnamon (Cinnamomum zeylanicum) thyme (Thymusvulgaris) citronella (Cymbopogon nardus), (Eucalyptus globulus) essential oil of geranium (Pelargonium graveolens) and) (Pogostemon cablin) essential oil of patchouli were determined by filter paper method. The antimicrobial activity of eight essential oils, such as cedar (Cedrusatl antica) essential oil and Citron (Citruslimon) essential oil, against five citrus postharvest rot fungi isolated and purified. The results showed that cinnamon essential oil and thyme essential oil had strong broad-spectrum antifungal activity. The composition and content of the two essential oils were analyzed by GC-MS. 61 components were detected in the essential oil of cinnamon, which mainly contained eugenol (70.38%), 尾 -caryophyllene (7.52%), benzyl benzoate (6.23%) and cinnamaldehyde (4.65%). Thyme phenols (48.97%), 3-methyl-4-isopropyl phenol (12.41%) and terpenes (3.19%) were mainly found in this paper. The main contents were thymol (48.97%), para-cymene (22.95%), 3-methyl-4-isopropyl phenol (12.41%). Six essential oils (eugenol, benzyl benzoate, cinnamaldehyde, thymol) were determined by liquid medium dilution method. The results of minimum inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MFC),) for 5 pathogenic fungi showed that the MIC and MFC ranges of cinnamaldehyde to 5 fungi in liquid compounds were 0.016-0.125 渭 L/mL and 0.125 渭 L/mL, respectively. 0.016-0.125 渭 L / mL, all of them had excellent inhibition and killing effect and had no resistance. The MIC and MFC of thymol in solid compounds were 51.2 渭 g/mL-204.8 渭 g/mL and 102.4 渭 g/mL-819.2 渭 g / mL, respectively. The results showed that thyme essential oil and cinnamon essential oil had good broad-spectrum antifungal activity, and the thyme phenol and cinnamaldehyde contained in thyme and cinnamaldehyde also had significant bacteriostatic effects, which provided theoretical basis for the development of natural antibacterial agents for citrus fruits.
【學位授予單位】：南京大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S436.66

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本文編號：2207981