【摘要】：本研究以白鶴芋‘Mojo'品種的花序及試管苗根莖為試驗材料,通過對激素種類、激素濃度、AgN03濃度及營養(yǎng)水平等方面,開展白鶴芋體胚發(fā)生及器官發(fā)生的研究。利用秋水仙素、氨磺靈及氟樂靈對白鶴芋進(jìn)行多倍體誘導(dǎo),為今后白鶴芋多倍體育種及新品種的選育提供參考。主要研究結(jié)果如下:(1)白鶴芋‘Mojo’品種花序胚性愈傷誘導(dǎo)最適配方為MS+TDZ 5.0 mg·L-1 + NAA 0.2 mg·L-1,誘導(dǎo)率達(dá)64.97%。根莖胚性愈傷誘導(dǎo)最佳配方為MS+2,4-D 4 mg·L-1 +TDZ 0.5 mg·L-1,誘導(dǎo)率為87.44%;根莖器官發(fā)生型愈傷誘導(dǎo)最佳配方為MS+2,4-D 1mg·L-1+TDZ 0.5 mg·L-1,誘導(dǎo)率為92.33%。根莖是胚性愈傷誘導(dǎo)的最佳外植體。(2)愈傷組織增殖階段,2mg·L-1 AgNO3作用時,愈傷組織增殖效果及生長狀態(tài)最佳,增殖系數(shù)達(dá)3.08。(3)胚狀體誘導(dǎo)最佳激素配方為 MS+6-BA 1 mg·L-1 + TDZ 0.2 mg·L-1 +NAA 0.2 mg·L-1,誘導(dǎo)率為68.32%;體胚萌發(fā)最佳營養(yǎng)和激素水平為1/2MS+TDZ 0.1 mg·L-1 + IBA 1.0 mg·L-1,萌發(fā)率為70.54%;植株再生的最佳配方為MS+6-BA 0.8 mg·L-1 +IBA 0.2 mg·L-1,再生率為89.34%。植株最佳生根配方為 MS+AC 1 g·L-1+NAA0.2 mg·L-1。(4)白鶴芋體胚形態(tài)形成過程與單子葉植物胚的形態(tài)形成過程類似,主要分為以下幾個階段:胚性細(xì)胞、球形胚、橢圓形胚、盾形胚,子葉型胚、成熟體細(xì)胞胚。(5)染色體制片技術(shù)優(yōu)化,早上8:45-9:15取材,用0.002 mol·L-18-羥基喹啉或0.07 mmol·L-1放線菌酮預(yù)處理4 h所得的染色體制片效果最佳。白鶴芋‘Mojo'品種的染色體數(shù)目為2n=2x=30,為二倍體。(6)以白鶴芋‘Mojo'品種的體胚及幼芽為試驗材料,研究不同濃度的秋水仙素、氨磺靈及氟樂靈溶液對體胚及幼芽四倍體的誘導(dǎo)情況。得出白鶴芋體胚四倍體誘導(dǎo)的最佳方法為0.08%秋水仙素處理15 d。幼芽四倍體誘導(dǎo)的最佳方法為100 mg·L-1氟樂靈處理5 d。幼芽的誘導(dǎo)率要比體胚的高,幼芽的多倍體誘導(dǎo)較體胚的更容易些。(7)對白鶴芋的四倍體在形態(tài)學(xué)、染色體數(shù)目和氣孔進(jìn)行鑒定。發(fā)現(xiàn)四倍體植株較二倍體植株生長健壯,葉片寬大厚實,葉色深綠,葉型指數(shù)變小,葉型更加勻稱,株型緊湊。白鶴芋二倍體的染色體數(shù)目為2n=2x=30,四倍體的染色體數(shù)目為2n=4x=60,染色體數(shù)目增加了一倍。四倍體氣孔明顯比二倍體的大,而且同等面積上的氣孔數(shù)減少。
[Abstract]:In this study, the inflorescence and root stem of Mojo' variety were used as experimental materials. The somatic embryogenesis and organogenesis were studied in the aspects of hormone type, hormone concentration and AgN03 concentration and nutrition level. Colchicine, ammosulfurin and fluralin were used to induce polyploidy of white crane taro, which provided references for polyploid breeding and breeding of new varieties of white crane taro. The main results were as follows: (1) the best formula for embryogenic callus induction was MS TDZ 5.0 mg L ~ (-1) NAA 0.2 mg L ~ (-1), and the induction rate was 64.97%. The best formula of rhizome embryogenic callus induction was MS 24-D 4 mg L -1 TDZ 0.5 mg L -1, the inducing rate was 87.440.The best formula of rhizome embryogenic callus induction was MS 2N 4-D 1mg L -1 TDZ 0.5 mg L -1, and the induction rate was 92.33%. Rhizome was the best explant for embryogenic callus induction. (2) the callus proliferation and growth state were the best when the callus was treated with 2 mg L ~ (-1) AgNO3. (3) the best hormone formula for embryoid induction was MS 6-BA 1 mg L-1 TDZ 0.2 mg L -1 NAA 0.2 mg L -1, the best somatic embryo germination nutrition and hormone level was 1/2MS TDZ 0.1 mg L -1 IBA 1.0 mg L -1, and the germination rate was 70.54%. The optimum formula was MS 6-BA 0.8 mg L -1 IBA 0.2 mg L -1 and regeneration rate 89.34 4. The best rooting formula was MS AC 1 g L-1 NAA0.2 mg L -1. (4) the somatic embryogenesis process was similar to that of monocotyledonous embryos, and was mainly divided into the following stages: embryogenic cells, globular embryos, elliptical embryos, pellet embryos, and peltate embryos. Cotyledonous embryo, mature somatic embryo. (5) the chromosome slice technique was optimized. The chromosome was prepared with 0.002 mol L-18-hydroxyquinoline or 0.07 mmol L-1 actinomycin for 4 h at 8: 45-9: 15 in the morning. The chromosome number of Mojo' was 2nnnt2xan30, which was diploid. (6) the somatic embryos and buds of Mojo' were used as experimental materials to study the induction of tetraploid of somatic embryos and buds with different concentrations of colchicine, amsulfurin and trifluridine solution. The best method of tetraploid induction was 0.08% colchicine for 15 days. The best method for inducing tetraploid was 100 mg L-1 trifluridine for 5 days. The induction rate of young bud was higher than that of somatic embryo, and the polyploid induction of young bud was easier than that of somatic embryo. (7) the tetraploid was identified in morphology, chromosome number and stomata. It was found that tetraploid plants grew stronger than diploid plants, their leaves were thicker and thicker, leaf color was dark green, leaf shape index was smaller, leaf shape was more symmetrical, and plant type was compact. The chromosome number of diploid and tetraploid was 2nnm2xc30 and 2nm4xm60respectively, and the number of chromosome doubled. The stomata of tetraploid were larger than that of diploid, and the number of stomata in the same area was decreased.
【學(xué)位授予單位】：寧夏大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S682.36

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本文編號：2207894