本文選題：玉米北方炭疽病菌 + 生物學(xué)特性��； 參考：《沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：玉米北方炭疽病又稱玉米眼斑病,是世界玉米產(chǎn)區(qū)的重要葉部病害,是由玉蜀黍出芽短梗霉(Aureobsidium zeae)侵染玉米葉片引起的。目前關(guān)于玉米北方炭疽病的報道多集中于病害發(fā)生危害、典型癥狀特征描述等方面,對于其病原菌致病機制的研究還未見報道。因此本研究通過形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法鑒定了致病菌,并對病原菌的生物學(xué)特性進行了研究;篩選出6種自交系用于病原菌致病力分化鑒定,明確了該病害分級標準;建立了玉米北方炭疽病菌ATMT遺傳轉(zhuǎn)化體系,對遺傳轉(zhuǎn)化條件進行了優(yōu)化,并對轉(zhuǎn)化子形態(tài)特征和致病力進行檢測,為從分子層面揭示玉米北方炭疽病菌的致病機制奠定基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下:1.分離并鑒定了玉米北方炭疽病菌根據(jù)病原形態(tài)特征、ITS序列信息和回接試驗鑒定玉米北方炭疽病的致病菌為玉蜀黍出芽短梗霉(Aureobbasidium zeae(NaritaHiratsuka)Dingley)。2.確定了玉米北方炭疽病菌的生物學(xué)特性該病菌菌絲生長溫度范圍為10～30℃,最適溫度為25℃,最適pH為7,光照條件為全黑暗,適宜的碳、氮源和培養(yǎng)基分別為蔗糖、硝酸鉀和馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基;其分生孢子產(chǎn)生的最適碳源為葡萄糖,其它最適宜生長條件與菌絲相同,該病菌在添加不同氮源的水瓊脂培養(yǎng)基中均不產(chǎn)生分生孢子;其分生孢子萌發(fā)的最適條件為28℃、pH 8、光暗交替,最適碳、氮源分別為麥芽糖和牛肉膏,單一氮源條件對分生孢子的萌發(fā)有抑制作用。3.玉米北方炭疽病菌致病力分化鑒定對來自于6個省份的106份玉米北方炭疽病標樣進行了分離,獲得菌株78株。根據(jù)病原菌接種56種自交系后的苗期發(fā)病情況,篩選出6種自交系研究了該病菌致病力分化。根據(jù)菌落形態(tài)特征和致病力,篩選出強致病力菌株A.z-01。4.玉米北方炭疽病菌ATMT遺傳轉(zhuǎn)化體系建立及條件優(yōu)化農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化玉米北方炭疽病菌的最佳體系為:濃度為106個·mL-1玉米北方炭疽病菌分生孢子,25℃黑暗下萌發(fā)4d后與濃度為OD600= 0.6的含有潮霉素和綠色熒光蛋白基因雙元載體的農(nóng)桿菌AGL-1,按3:1的比例混合,誘導(dǎo)1h后,共培養(yǎng)48h.利用該體系獲得了 350個轉(zhuǎn)化子。5.轉(zhuǎn)化子菌落形態(tài)及致病力分析根據(jù)轉(zhuǎn)化子在PDA培養(yǎng)基上的菌落形態(tài),轉(zhuǎn)化子主要分為5種類型,并對轉(zhuǎn)化子的致病力進行分析,發(fā)現(xiàn)大多數(shù)轉(zhuǎn)化子可侵染玉米植株發(fā)病,接種后病斑主要分為5種類型,再分離后進行熒光檢測發(fā)現(xiàn),獲得的菌株均帶有綠色熒光。
[Abstract]:The research results are as follows : 1 . The research results are as follows : 1 . The research results are as follows : 1 . The research results are as follows : 1 . The research results are as follows : 1 . The genetic transformation system of the northern anthrax pathogen of corn is identified , the optimum temperature is 25 鈩，

本文編號：2055119