本文選題：大白菜 + 再生體系��； 參考：《沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：大白菜(Brassicarapa L.ssp.Pekinensis)原產(chǎn)自中國(guó),是中國(guó)乃至亞洲重要蔬菜作物。穩(wěn)定的遺傳轉(zhuǎn)化體系將為大白菜分子育種及基因功能驗(yàn)證奠定基礎(chǔ)。本研究對(duì)大白菜自交系'GT-24'的再生體系進(jìn)行優(yōu)化。在此基礎(chǔ)上,成功建立農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大白菜'GT-24'的遺傳轉(zhuǎn)化體系,并獲得了轉(zhuǎn)化植株。結(jié)果如下:1.以大白菜'GT-24'為材料,探討外植體類型、蔗糖、6-BA、AgO3添加濃度對(duì)不定芽分化的影響,對(duì)'GT-24'離體再生體系進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明:最佳外植體為子葉-子葉柄;最佳芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為 MS+0.5mg/L NAA+5mg/L 6-BA+4mg/L AgN03+7g/L 瓊脂+30g/L蔗糖(pH=5.8),不定芽平分化率可達(dá)93.5%,較原再生體系提高了 7.28%。2.利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法,通過(guò)對(duì)篩選抗生素潮霉素和抑菌抗生素特美汀的適宜濃度、及外植體最佳預(yù)培養(yǎng)時(shí)間的篩選,建立起遺傳化體系。'GT-24'遺傳轉(zhuǎn)化過(guò)程中,外植體無(wú)需預(yù)培養(yǎng),農(nóng)桿菌菌液OD600值為0.5,侵染時(shí)間為15 min,避光共培養(yǎng)2d,抗性芽篩選培養(yǎng)基為 MS+0.5mg/L NAA+5mg/L 6-BA+4mg/L AgN03 +200mg/L TMT+25mg/L Hyg +7g/L瓊脂+30g/L蔗糖(pH=5.8)。轉(zhuǎn)基因植株的生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中需添加1 mg/L NAA或者1 mg/L IBA。對(duì)抗性植株進(jìn)行PCR、RT-PCR檢測(cè)及GUS組織化學(xué)染色鑒定,證實(shí)獲得轉(zhuǎn)基因植株,經(jīng)重復(fù)性試驗(yàn),平均轉(zhuǎn)化率為2.49%。
[Abstract]:Brassicarapa L.ssp. Pekinensis) originated from China and is an important vegetable crop in China and even in Asia. Stable genetic transformation system will lay a foundation for molecular breeding and gene function verification of Chinese cabbage. The regeneration system of Chinese cabbage inbred line GT-24 'was optimized. On this basis, the genetic transformation system of Chinese cabbage GT-24 'mediated by Agrobacterium tumefaciens was successfully established, and the transformed plants were obtained. The result is as follows: 1. The explant type and the effect of sucrose 6-BAE AgO3 concentration on adventitious bud differentiation were studied by using GT-24'of Chinese cabbage as the material, and the regeneration system of GT-24 'was optimized in vitro. The results showed that the best explants were cotyledons and cotyledon petioles, and the best medium for bud induction was MS 0.5mg / L NAA 5mg / L 6-BA 4mg / L Agar 30g / L AgN03 7g / L Agar 30g / L sucrose (pH5.8g / L). By means of Agrobacterium tumefaciens mediated screening of suitable concentrations of hygromycin and termetin, and the optimal pre-culture time of explants, a genetic system, I. e., GT-24 'genetic transformation, was established, and the explants were not pre-cultured. The OD600 value of Agrobacterium tumefaciens was 0.5, the infection time was 15 min, and the culture medium was MS 0.5mg / L NAA 5mg / L 6-BA 4mg / L AgN03 200mg / L TMT 25mg / L Hyg 7g / L Agar 30g / L sucrose pH 5.8g / L. 1 mg / L NAA or 1 mg / L IBA should be added to the rooting induction medium of transgenic plants. The transgenic plants were confirmed by PCR RT-PCR and Gus histochemical staining. The average conversion rate was 2.49%.
【學(xué)位授予單位】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S634.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李科友;樊軍鋒;趙忠;周永學(xué);高建社;;84K楊再生和遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2007年07期

2 梁超;王景雪;裴雁曦;楊婷;;根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的番茄高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的研究[J];華北農(nóng)學(xué)報(bào);2009年02期

3 李立芹;;農(nóng)桿菌介導(dǎo)番茄“美粉一號(hào)”遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化研究(英文)[J];Agricultural Science & Technology;2010年Z2期

4 李立芹;;農(nóng)桿菌介導(dǎo)番茄“美粉1號(hào)”遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年09期

5 鄧偉;呂立堂;羅克明;李義;;毛白楊二次遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立[J];生物技術(shù)通報(bào);2009年04期

6 侯雨;吳麗爽;王曉萍;;小對(duì)葉植株再生及遺傳轉(zhuǎn)化體系構(gòu)建[J];中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào);2010年24期

7 楊國(guó)順,謝丙炎,楊宇紅,王曉武,盧向陽(yáng),蔣芳玲;應(yīng)用綠色熒光蛋白報(bào)告基因優(yōu)化辣椒的遺傳轉(zhuǎn)化體系[J];園藝學(xué)報(bào);2004年06期

8 尹虹;宋春麗;馬俊蓮;張子德;唐霞;;根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的磨盤(pán)柿遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化[J];華北農(nóng)學(xué)報(bào);2007年02期

9 王全華;葛晨輝;曹守軍;張煥春;李素梅;尹國(guó)香;;番茄組織再生及其遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化[J];青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2007年01期

10 于淼;劉兆磊;陳素梅;陳發(fā)棣;章鎮(zhèn);;盆栽小菊高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立[J];江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2009年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 邸宏;周羽;王振華;;以成熟種子為受體的玉米遺傳轉(zhuǎn)化體系建立[A];第二屆全國(guó)種子科學(xué)與技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2011年

2 孟斌;李濱;;農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化[A];山東省植物生物學(xué)研究進(jìn)展學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

3 龍翠;龐曉明;張志毅;;轉(zhuǎn)MdSPDS1基因毛白楊耐鹽性研究和遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化[A];第二屆中國(guó)林業(yè)學(xué)術(shù)大會(huì)——S2 功能基因組時(shí)代的林木遺傳與改良論文集[C];2009年

4 楊志武;王永清;陶煉;嚴(yán)娟;楊芩;杜奎;崔文寧;范建新;鄧仁菊;;農(nóng)桿菌介導(dǎo)的GID1基因枇杷花藥胚遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立[A];2012年園藝植物染色體倍性操作與遺傳改良學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2012年

5 劉香利;郭藹光;徐虹;;小麥遺傳轉(zhuǎn)化體系建立及基因轉(zhuǎn)化[A];全國(guó)“植物生物技術(shù)及其產(chǎn)業(yè)化”研討會(huì)論文摘要集[C];2007年

6 馬英;林順權(quán);呂柳新;;草莓、番木瓜、獼猴桃遺傳轉(zhuǎn)化研究初報(bào)[A];中國(guó)園藝學(xué)會(huì)第五屆青年學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2002年

7 沈鳳英;何麗明;劉大群;李亞寧;;生防鏈霉菌Men-myco-93-63遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2008年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2008年

8 秦于玲;秦永華;胡桂兵;徐昌杰;張上隆;;獼猴桃PMI/甘露糖遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立(摘要)[A];第二屆全國(guó)果樹(shù)分子生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

9 毛靜;周媛;李進(jìn)進(jìn);王彩云;;除蟲(chóng)菊薄層再生與遺傳轉(zhuǎn)化體系研究[A];中國(guó)觀賞園藝研究進(jìn)展（2013）[C];2013年

10 閆碩;宋玉;王廣東;;農(nóng)桿菌介導(dǎo)的觀賞向日葵高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立[A];慶祝中國(guó)園藝學(xué)會(huì)創(chuàng)建80周年暨第11次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)論文摘要集[C];2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 黎定軍;辣椒高效離體再生與遺傳轉(zhuǎn)化體系建立及抗病轉(zhuǎn)基因研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2000年

2 佟友麗;露地菊耐低溫特性研究及遺傳轉(zhuǎn)化體系的構(gòu)建[D];東北林業(yè)大學(xué);2008年

3 楊莉;金柑遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立與應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2006年

4 潘剛;高效甘藍(lán)型油菜遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及細(xì)胞周期基因的花粉特異表達(dá)分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 牛瑞鶴;紅掌遺傳轉(zhuǎn)化體系與抗菌肽基因表達(dá)載體的構(gòu)建[D];蘇州大學(xué);2015年

2 常婧;番茄快繁及遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 劉潔;結(jié)球甘藍(lán)離體遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及轉(zhuǎn)FOC1基因植株的獲得[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

4 周楊;菊花再生及遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

5 侯云鵬;棕色棉遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及GhANR功能初步研究[D];石河子大學(xué);2016年

6 李春利;毛白楊遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化和AtPAP2的轉(zhuǎn)基因研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 趙玉竹;農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大白菜遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

8 王碧玉;菊花再生及遺傳轉(zhuǎn)化體系的研究[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

9 曹艷玲;辣椒高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及其在NAC,CDPK,CIPK等候選基因遺傳轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用[D];福建農(nóng)林大學(xué);2009年

10 劉文菊;高效辣椒遺傳轉(zhuǎn)化體系構(gòu)建及其在辣椒功能基因組研究中的運(yùn)用[D];福建農(nóng)林大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：2032446