本文關(guān)鍵詞： 藍(lán)莓 間座殼潰瘍病 鑒定 PCR快速檢測(cè)　出處：《沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：藍(lán)莓是一種新興的小漿果類樹種,藍(lán)莓果實(shí)細(xì)膩,酸甜可口,具有特別的香氣,是健康的鮮食漿果之一。藍(lán)莓不僅好吃,還具有非常豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,藍(lán)莓中除了含有糖類等物質(zhì),還含有黃酮、酚類物質(zhì),花青素等特殊成分;有研究表明藍(lán)莓還具有預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)心腦血管、清除人體自由基,延緩衰老等保健功能。近年來(lái)藍(lán)莓的銷售及推廣逐漸增多,藍(lán)莓也越來(lái)越受到人們的歡迎。間座殼潰瘍病是危害藍(lán)莓的一種嚴(yán)重病害之一,病菌可從莖傷口、嫩枝及芽眼侵入,造成藍(lán)莓減產(chǎn),嚴(yán)重時(shí)可使整株藍(lán)莓枯死。本文對(duì)我國(guó)部分藍(lán)莓主產(chǎn)區(qū)的藍(lán)莓莖潰瘍病樣進(jìn)行采集,對(duì)藍(lán)莓病樣進(jìn)行分離純化及致病性測(cè)定,并且采取形態(tài)學(xué)與分子系統(tǒng)發(fā)育學(xué)結(jié)合的方法對(duì)病原菌進(jìn)行鑒定;同時(shí)設(shè)計(jì)PCR特異性引物,用于病原真菌的分子檢測(cè);選取代表菌對(duì)我國(guó)主要栽培的10個(gè)藍(lán)莓品種進(jìn)行致病性測(cè)定以及抗性評(píng)價(jià),為病害的防治打下基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下:1.2014～2016年在我國(guó)多個(gè)藍(lán)莓主產(chǎn)區(qū)進(jìn)行藍(lán)莓病樣的采集,采集地分別位于我國(guó)福建省龍巖市;江西省上饒市;浙江省新昌市;四川省成都市;遼寧省大連市、丹東市;黑龍江省伊春市,6個(gè)省7個(gè)市的藍(lán)莓種植園。共分離純化出52株具有致病性的病原菌,對(duì)病原菌進(jìn)行致病力分級(jí),其中22株菌具有強(qiáng)致病性,8株菌具有較強(qiáng)致病性,15株菌具有中等致病性,7株菌具有弱致病性。2.對(duì)52株病原菌采取ITS與EF1-α聯(lián)合基因分別采用貝葉斯法(BI)和最大簡(jiǎn)約法(MP)進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析,并結(jié)合形態(tài)學(xué)進(jìn)行鑒定。52株病原菌中至少存在5種間座殼潰瘍病菌,其中,有44株2種病原菌可確定其種類,其他的病原菌由于缺乏相關(guān)模式菌株信息暫時(shí)無(wú)法定種。經(jīng)鑒定Diaporthephaseolorum為藍(lán)莓間座殼病病原之一,該種群菌株包括龍巖市的1株菌、伊春市的1株菌、丹東市的2株菌以及大連市的3株菌,該種菌具有中等弱致病性,且主要分離自我國(guó)東北地區(qū),本研究系國(guó)內(nèi)外首次報(bào)道D.phaseolorum危害藍(lán)莓,造成藍(lán)莓莖潰瘍病;Dhongkongens.為另一種藍(lán)莓間座殼潰瘍病的病原菌,包括上江西饒市1株菌、浙江新昌市6株菌以及福建龍巖市30株菌,共37株病原菌定種為D.hongkongensis,該種病原菌致病性較強(qiáng),主要危害南方藍(lán)莓產(chǎn)區(qū)的藍(lán)莓,在北方未分離出該種病原菌,本研究首次報(bào)道間座殼真菌D.honagkongensis危害藍(lán)莓。3.針對(duì) Diaporthe hongkongensis及D.phaseolorum分別在 EF1-α及 ITS 基因片段特異區(qū)間設(shè)計(jì)種特異性引物EFhong1/2、Pha5/6,分別擴(kuò)增出195 bp及302 bp目標(biāo)DNA產(chǎn)物,實(shí)現(xiàn)對(duì)病原菌的早期檢測(cè),引物特異性及靈敏度較好,可檢測(cè)出濃度為500 fg/μl的目標(biāo)真菌DNA,且可從從發(fā)病程度不同的藍(lán)莓莖部檢測(cè)出目標(biāo)真菌,藍(lán)莓組織DNA及其他真菌對(duì)結(jié)果沒有影響。4.利用D.hongkongensis、D.phaseolorum代表菌株分別對(duì)我國(guó)主栽的10個(gè)藍(lán)莓品種進(jìn)行不同藍(lán)莓品種致病性測(cè)定,不同的藍(lán)莓品種對(duì)間座殼潰瘍病的敏感性具有較大的差異;對(duì)2種菌的代表菌株的表現(xiàn)略有不同:其中'愛國(guó)者'、'瑞卡'、'日出'、'奧林匹亞'、'都克'、'托柔'、'藍(lán)豐'相對(duì)抗病;'北陸'、'埃利奧特'相對(duì)感病,'達(dá)柔'對(duì)Diaporthe hngkongensis相對(duì)感病,但是對(duì) D.phaseolorum 相對(duì)抗病。
[Abstract]:Blueberry is a new kind of small berry tree species , the blueberry fruit is delicate , sour and sweet , it has special fragrance , it is one of the healthy fresh food berries . The blueberry is not only delicious but also has very rich nutritional value . The results showed that D . phaseolorum ( D . phaseolorum ) could be used to detect the pathogenic bacteria of different blueberry cultivars . Diapramycin hngkongensis is relatively susceptible to disease , but is relatively resistant to D . phaseolorum .

【學(xué)位授予單位】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S436.639

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本文編號(hào)：1491370