發(fā)布時間：2018-01-25 00:33

  本文關(guān)鍵詞： Resveratrol H_2O_2 氧化應(yīng)激 細胞凋亡 IPEC-J2細胞　出處：《吉林大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：氧化應(yīng)激一直以來是制約養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要因素之一。當機體受到外界有害刺激后,活性氧(reactive oxygen species,ROS)濃度增加,遠超過細胞抗氧化保護能力時,機體就會處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。氧化應(yīng)激會導(dǎo)致細胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達異常、脂質(zhì)和DNA損傷、進一步導(dǎo)致細胞功能紊亂和多種疾病。ROS變化產(chǎn)生的氧化應(yīng)激能誘發(fā)炎癥級聯(lián)反應(yīng)并導(dǎo)致一系列的組織損傷,很多過氧化物都會導(dǎo)致ROS產(chǎn)量變化,其中過氧化氫(hydrogen peroxide,H_2O_2)就是促成ROS調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激的一個主要分子。腸上皮細胞中異常的細胞代謝使H_2O_2產(chǎn)量過多,H_2O_2作為有毒的副產(chǎn)物破壞腸粘膜,誘發(fā)氧化應(yīng)激損傷,進一步影響胃腸道屏障功能。近些年已經(jīng)有大量研究表明H_2O_2介導(dǎo)的氧化應(yīng)激也是導(dǎo)致多種細胞發(fā)生細胞凋亡的主要途徑之一。細胞凋亡是指細胞為了維持機體內(nèi)穩(wěn)態(tài)平衡,受一系列基因控制的細胞自主有序的死亡。多種促凋亡與抗凋亡基因相互作用來維持機體內(nèi)穩(wěn)態(tài),例如:現(xiàn)如今參與凋亡的蛋白分子Bcl-2家族就已經(jīng)有25個家庭成員,分為有抗凋亡作用的Bcl-2亞家族(Mcl-1,Bcl-2,Bcl-w和Bcl-xL)和促凋亡作用的Bax(Bax and Bak)亞家族;Caspase半胱氨酸蛋白酶家族也直接參與凋亡過程,其中caspase3和caspase9在凋亡過程中研究最為廣泛,在功能上也與凋亡直接相關(guān)。同時氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的細胞凋亡會導(dǎo)致細胞DNA有序片段化,細胞皺縮,細胞核固縮等,所以開發(fā)天然抗氧化物對于緩解和保護氧化應(yīng)激損傷具有重要意義。白藜蘆醇(resveratrol,Rel)又稱反式(E)-3,5,4'-三羥基芪,是來源于葡萄、花生、桑葚和虎杖等多種植物的天然多酚類化合物。隨著人們對自然資源的廣泛研究,Rel至少存在于21個科、31個屬的72種植物中。目前研究表明,Rel在體內(nèi)和體外都具有抗氧化、抗癌、抗腫瘤作用。并且已經(jīng)在多種細胞系上證明,白藜蘆醇可以抵抗過氧化氫誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和細胞凋亡,包括牛乳腺上皮細胞,人結(jié)腸癌細胞和人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞。IPEC-J2是豬的空腸上皮2段細胞系,廣泛用于豬腸道通透性和炎癥的研究,對豬的腸道健康疾病研究具有潛在意義。目前,Rel對IPEC-J2細胞的抗氧化作用研究鮮見,具體機制尚未明確。為了明確Rel對過氧化氫誘導(dǎo)的IPEC-J2細胞凋亡的影響,本實驗以IPEC-J2細胞為基礎(chǔ),利用H_2O_2建立細胞氧化應(yīng)激模型,通過分子生物學和細胞生物學實驗檢測Rel對H_2O_2誘導(dǎo)的細胞凋亡的影響及其發(fā)揮作用的分子機制。實驗結(jié)果表明,50μM的H_2O_2處理IPEC-J2細胞24h后可以誘導(dǎo)細胞凋亡,凋亡率接近40%,而分別使用5,10,25,50μM Rel預(yù)處理1h后,再加入50μM的H_2O_2處理細胞24h,25和50μM Rel可以明顯抑制IPEC-J2細胞凋亡。同時通過蛋白質(zhì)免疫印跡實驗檢測凋亡相關(guān)蛋白分子Cleaved caspase3,Bcl-2,Bax和BAD以及信號通路分子ERK1/2,AKT和p-p38的表達量變化,其中H_2O_2處理后,Bcl-2/Bax比值降低,Cleaved caspase3和BAD活化表達增強,加入Rel預(yù)處理后,ERK1/2和AKT以及p-p38的表達量均發(fā)生變化,上述結(jié)果證實,50μM Rel可以活化ERK1/2和AKT信號分子,通過p-p38信號通路抑制H_2O_2誘導(dǎo)的IPEC-J2細胞凋亡。
[Abstract]:In recent years , there have been a large number of researches on the effects of oxidation stress on oxidative stress induced by oxidative stress and apoptosis , including bovine mammary epithelial cells , human colon cancer cells and human umbilical cord . The results showed that 50 渭M Rel could activate the 1 - / 2 - and 3 - signal molecules and inhibit the apoptosis of IPEC - J2 induced by H _ 2O _ 2 via p - p38 signaling pathway .

【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S859.7

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 Aida Zulueta;Anna Caretti;Paola Signorelli;Riccardo Ghidoni;;Resveratrol: A potential challenger against gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2015年37期

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本文編號：1461475