本文關鍵詞：大麥黃矮病毒運動蛋白與AtVOZ1和AtVOZ2互作并延遲擬南芥開花　出處：《西北農林科技大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關文章： 大麥黃矮病毒GAV 運動蛋白 AtVOZ1 AtVOZ2 延遲開花

【摘要】：大麥黃矮病毒(Barely yellow dwarf viruses,BYDVs)侵染多種禾本科作物,呈現(xiàn)多種發(fā)病癥狀同時也給世界糧食生產造成嚴重的損失。其在小麥上的癥狀主要有植物矮化、葉片黃化,除此之外在燕麥上還能造成分蘗和抽穗的減少。而目前對于這種癥狀的產生原因研究的還不是很清楚。為了更好地控制小麥病毒病發(fā)生,研究該病癥的發(fā)病機制勢在必行。大麥黃矮病毒的運動蛋白(Movement Protein,MP)的主要功能是結合病毒RNA,增大胞間連絲孔徑并促使其在植物細胞間運輸。但是對于MP對植物生理生化方面的影響研究的還是較少。因此,本研究針對BYDV-GAV MP對模式植物擬南芥生理生化方面的影響進行了研究,主要結果如下:1.通過酵母雙雜交實驗,發(fā)現(xiàn)在擬南芥中能夠與MP蛋白互作的是兩個轉錄因子,維管植物鋅指蛋白AtVOZ1和AtVOZ2。利用雙分子熒光互補實驗(BiFC),進一步驗證MP與AtVOZ1和AtVOZ2是能夠相互作用的,且互作的位置是細胞質。根據MP蛋白的關鍵結構域,對MP片段進行缺失突變,構建了MP(DH1)、MP(DH2)、MP(DH3)三個突變體。通過雙分子熒光互補實驗,結果表明只有MP(DH2)不能與AtVOZ1和AtVOZ2互作,而MP(DH2)是缺失了MP的N端1-81aa,即MP的核定位信號區(qū)域,說明MP的N端核定位信號在互作中是必須的。2.由于AtVOZ1和AtVOZ2是控制擬南芥開花通路上的關鍵基因。我們通過農桿菌浸花轉序的方法構建MP轉基因擬南芥。探究轉基因植株是否產生開花方面的表型差異。結果顯示,同時播種野生型和轉基因擬南芥,開花時,轉基因擬南芥蓮座葉數目比野生型顯著增多,同時轉基因擬南芥經過更長的時間才開始開花。MP轉基因擬南芥表現(xiàn)晚花表型,也就是MP影響了擬南芥的開花表型。3.AtVOZ1和AtVOZ2是光周期通路phyB途徑上的關鍵基因。為了探究MP轉基因植株出現(xiàn)的晚花表型是否與phyB途徑有關,通過實時熒光定量PCR試驗,測定轉基因擬南芥及野生型擬南芥phyB通路上的關鍵基因AtVOZ1、AtVOZ2、CO、FLC、FT的表達量。結果表明MP轉基因植株的可能通過調節(jié)FT基因的表達量來影響擬南芥開花。綜上所述,本實驗揭示了BYDV-GAV MP通過與AtVOZ1、AtVOZ2的互作,可能通過影響FT基因的表達,介導晚花表型。為BYDV-GAV對癥狀的產生機理研究奠定基礎。
[Abstract]:Barley yellow dwarf virus (Barely yellow dwarf viruses, BYDVs) infection of a variety of gramineous crops, showing a variety of symptoms but also to the world food production caused serious losses. The main symptoms in wheat plant dwarfing, Leaf Chlorosis, in addition to the decrease in oat also can cause tillering and heading and the current. For this reason of symptoms is not very clear. In order to control wheat virus disease, it is imperative to study the pathogenesis of disease. The movement protein of barley yellow dwarf virus (Movement Protein MP) is the main function of virus RNA, enlarged plasmodesmata aperture and the transport in plant cells. But for MP on plant physiological and biochemical aspects of the impact of research is still less. Therefore, this study was about the influence of BYDV-GAV MP on Arabidopsis physiological and biochemical aspects. The main research results are as follows: 1. by the yeast two hybrid experiment, found to interact with MP protein in Arabidopsis is two transcription factor, vascular plant zinc finger protein AtVOZ1 and AtVOZ2. using bimolecular fluorescence complementation assay (BiFC), MP and AtVOZ1 and further validation of AtVOZ2 is able to interact with each other. The position is the key. According to the cytoplasmic domain of MP protein, the MP deletion mutation, constructed MP (DH1), MP (DH2), MP (DH3) three mutants by bimolecular fluorescence complementation experiments, the results show that only MP (DH2) with AtVOZ1 and AtVOZ2 interaction, and MP (DH2) is the lack of N end 1-81aa MP, namely the nuclear localization signal region of MP, N MP in the end of the nuclear localization signal interaction is necessary because the AtVOZ1 and.2. AtVOZ2 is the key gene control flowering pathway. By Agroinoculation method to order the bacteria leaching flower building MP transfer matrix Because of the Arabidopsis transgenic plants. To explore whether phenotypic differences in flowering. The results showed that the sowing and wild type and transgenic Arabidopsis, transgenic Arabidopsis rosette leaves of flowering, the number increased significantly than that of the wild type, the transgenic Arabidopsis plants after a longer period of time to flowering.MP transgenic Arabidopsis showed late flowering phenotype, which is the MP effect in Arabidopsis thaliana the flowering phenotype of.3.AtVOZ1 and AtVOZ2 are the key genes in the photoperiod pathway phyB pathway. In order to explore the MP transgenic plants appeared late flowering phenotype is associated with phyB pathway by real-time fluorescence quantitative PCR test, determination of key gene AtVOZ1 in transgenic Arabidopsis and wild type Arabidopsis phyB pathway on AtVOZ2, CO, FLC, FT expression MP. The results showed that transgenic plants may be through the regulation of FT gene expression to affect the flowering of Arabidopsis. In summary, this study reveals The interaction between BYDV-GAV MP and AtVOZ1 and AtVOZ2 may mediate the late flowering phenotype by influencing the expression of FT gene, and lay the foundation for the study of the mechanism of symptom generation by BYDV-GAV.

【學位授予單位】：西北農林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S432.41

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 曲宇杰;趙慶臻;盧嬌;曹雪松;;大麥黃矮病毒運動蛋白基因克隆及原核表達[J];安徽農業(yè)科學;2011年23期

2 Ben Hardin ,姚志瑋;大麥黃矮病毒病的研究動向[J];麥類作物學報;1986年01期

3 Е.А.Рогожипа ,王福綏;抗大麥黃矮病毒的育種[J];麥類作物學報;1992年05期

4 石海英,張俊艷,李世訪;大麥黃矮病毒外殼蛋白基因和運動蛋白基因酵母表達載體的構建[J];韶關學院學報(自然科學版);2004年12期

5 石海英;;大麥黃矮病毒外殼蛋白基因和運動蛋白基因酵母表達載體的構建[J];沈陽農業(yè)大學學報;2005年04期

6 趙陽;曲宇杰;劉國富;曹雪松;;大麥黃矮病毒運動蛋白形成同型二聚體的功能研究[J];安徽農業(yè)科學;2011年19期

7 趙陽;曲宇杰;劉國富;曹雪松;;大麥黃矮病毒運動蛋白形成同型二聚體的功能研究(英文)[J];Agricultural Science & Technology;2011年06期

8 ;病毒病[J];麥類文摘.種業(yè)導報;1995年03期

9 吳興泉;陳士華;張曉婷;張苗青;劉應舉;;大麥黃矮病毒株系間分子變異與系統(tǒng)進化關系研究[J];河南農業(yè)大學學報;2011年03期

10 魏寧生,安德榮;小麥黃化型病毒病的研究[J];中國農業(yè)科學;1990年03期

相關會議論文 前10條

1 吳蓓蕾;王錫鋒;周廣和;;大麥黃矮病毒GAV株系編碼的基因沉默抑制因子的鑒定[A];中國植物病理學會2006年學術年會論文集[C];2006年

2 成卓敏;P.M.Waterhouse;王立陽;周廣和;陳劍波;;應用聚合酶鏈式反應方法檢測攜帶大麥黃矮病毒的單頭蚜蟲[A];“植物病蟲害生物學研究進展”——植物病蟲害生物學國家重點實驗室研究論文選[C];1995年

3 王錫鋒;周廣和;;麥蚜傳播大麥黃矮病毒的分子機制研究[A];第三次全國植物病毒和病毒防治學術研討會論文集[C];2003年

4 吳蓓蕾;王錫鋒;;大麥黃矮病毒GAV外殼蛋白干涉載體的構建[A];中國植物病理學會2005年學術年會暨植物病理學報創(chuàng)刊50周年紀念會論文摘要集[C];2005年

5 吳蓓蕾;王錫鋒;;大麥黃矮病毒GAV外殼蛋白干涉載體的構建[A];中國植物病理學會2005年學術年會暨植物病理學報創(chuàng)刊50周年紀念會論文集[C];2005年

6 夏宗良;王道文;;大麥黃矮病毒運動蛋白的結構與功能研究[A];中國植物病理學會2008年學術年會論文集[C];2008年

7 晉治波;王錫鋒;周廣和;;大麥黃矮病毒GAV運動蛋白基因原核表達與抗血清制備[A];第三次全國植物病毒和病毒防治學術研討會論文集[C];2003年

8 成卓敏;何小源;陳彩層;張杰;肖紅;周廣和;;大麥黃矮病毒外殼蛋白基因合成及用花粉管途徑獲得小麥轉基因植株[A];“植物病蟲害生物學研究進展”——植物病蟲害生物學國家重點實驗室研究論文選[C];1995年

9 王晶;李世訪;成卓敏;;利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選與大麥黃矮病毒移動蛋白互作的短肽[A];中國植物病理學會2005年學術年會暨植物病理學報創(chuàng)刊50周年紀念會論文摘要集[C];2005年

10 晉治波;王錫鋒;周廣和;;大麥黃矮病毒運動蛋白原核表達產物抗血清的制備及體內檢測[A];中國植物病理學會第七屆代表大會暨學術研討會論文摘要集[C];2002年

相關博士學位論文 前7條

1 晉治波;大麥黃矮病毒GAV基因組全序列分析及運動蛋白基因介導的抗病毒小麥的研究[D];中國農業(yè)科學院;2003年

2 歐洋;兩組類受體激酶調控擬南芥根生長發(fā)育的分子機理[D];蘭州大學;2017年

3 許雷;大麥黃矮病毒GPV株系ORF5基因的克隆、表達載體構建及轉基因研究[D];中國農業(yè)科學院;2001年

4 黃大輝;抗病小麥中與大麥黃矮病毒CP蛋白和RdRp復制酶相互作用蛋白的研究[D];中國農業(yè)科學院;2007年

5 鄭凱杰;調控擬南芥表皮毛發(fā)生的核心轉錄因子的水稻同源蛋白的功能研究[D];東北師范大學;2017年

6 薛濤;擬南芥miR159及其靶基因調控離體苗再生的作用研究[D];山東大學;2017年

7 王瑋;擬南芥TOPP4去磷酸化DELLA及六個保守絲/蘇氨酸位點對RGA蛋白功能和穩(wěn)定性影響[D];蘭州大學;2014年

相關碩士學位論文 前10條

1 段敏;麥類種質資源對大麥黃矮病毒的抗性鑒定及GAV株系的群體遺傳變異[D];青海大學;2017年

2 孫博;大麥黃矮病毒群體的分子變異[D];中國農業(yè)科學院;2006年

3 王晶;利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選與大麥黃矮病毒編碼蛋白互作的短肽[D];中國農業(yè)科學院;2005年

4 曹汝菲;大麥黃矮病毒運動蛋白影響植物生長發(fā)育的分子基礎[D];河南農業(yè)大學;2011年

5 任云;過表達CFLAP1基因擬南芥耐鹽性分析[D];鄭州大學;2017年

6 石海英;利用酵母雙雜交系統(tǒng)研究大麥黃矮病毒（BYDV）和小麥間的互作[D];吉林農業(yè)大學;2003年

7 劉雙清;大麥黃矮病毒三種株系的特異性檢測及PAV株系的群體遺傳變異[D];湖南農業(yè)大學;2008年

8 趙琨;大麥黃矮病毒LAMP檢測及其基因沉默抑制子鑒定[D];中國農業(yè)科學院;2010年

9 呂旭才;Why在擬南芥和甘藍型油菜中的過表達及抗鹽性和抗旱性的研究[D];西南科技大學;2017年

10 楊永峰;萘乙酸對擬南芥根生長發(fā)育的影響[D];鄭州大學;2017年

，

本文編號：1404761