發(fā)布時間：2017-12-15 05:02

  本文關(guān)鍵詞：安徽及周邊地區(qū)羊腸道寄生蟲病流行病學(xué)調(diào)查

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【摘要】：為了解安徽及周邊地區(qū)綿羊和山羊腸道寄生蟲感染情況,從安徽省及周邊的河南省、江蘇省和山東省部分地區(qū)的7個規(guī)模化綿羊場和10個規(guī)�；窖驁龇謩e采集了 832份和781份新鮮綿羊和山羊糞便樣品,采用離心沉淀法、盧戈氏碘液染色-鏡檢法、飽和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法進行腸道寄生蟲調(diào)查。結(jié)果顯示安徽及周邊地區(qū)綿羊腸道寄生蟲感染率為47.60%,山羊感染率為62.87%。綿羊共檢出球蟲、毛圓線蟲、類圓線蟲、細(xì)頸屬線蟲、莫尼茨絳蟲、賈第蟲、阿米巴原蟲和人芽囊原蟲等蟲種,山羊共檢出球蟲、毛圓線蟲、類圓線蟲、細(xì)頸屬線蟲、莫尼茨絳蟲、賈第蟲、阿米巴原蟲、前后盤吸蟲、鞭蟲和隱孢子蟲等蟲種。其中,綿羊以球蟲和阿米巴原蟲為主要感染蟲種,感染率分別為22.60%(188/832)和17.55%(146/832)。山羊以球蟲和圓線蟲為主要感染蟲種,感染率分別為32.39%(253/781)和37.39%(292/781)。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn),綿羊和山羊多呈混合感染,且感染強度較大。其中,綿羊以球蟲和阿米巴原蟲混合感染最為常見,混合感染率為33.63%(38/113),以山東泰安的混合感染率最高,達(dá)91.67%(55/60)。山羊以球蟲和圓線蟲混合感染最為常見,混合感染率為51.72%(120/234),以河南洛寧的混合感染率最高,達(dá)70.82%。各感染蟲種中,綿羊和山羊分別以球蟲和毛圓線蟲感染強度最大,平均EPG/OPG值分別為1020和3640。為進一步確定安徽及周邊地區(qū)綿羊和山羊隱孢子蟲的流行及基因型分布情況,對采集的新鮮綿羊和山羊糞便樣品,提取所有糞便樣品基因組DNA,利用隱孢子蟲18s rRNA基因特異的巢氏PCR對所有樣品進行檢測,確定上述地區(qū)綿羊和山羊隱孢子蟲感染情況,同時對獲得的陽性擴增產(chǎn)物進行g(shù)p60基因擴增與分析,以鑒定其基因亞型。結(jié)果顯示綿羊隱孢子蟲總感染率為5.77%(48/832),其中江蘇吳江感染率最高,為49.33%(37/75),其次是安徽蚌埠,感染率為3.19(11/345),其余地區(qū)未見感染。山羊隱孢子蟲總感染率為8.71%(68/781),其中安徽馬鞍山感染率最高,為46.00%(46/100),其次是安徽安慶和阜陽,感染率分別為10.09%(11/109)和7.64%(11/144),其余地區(qū)未見感染。18s rRNA基因序列分析顯示綿羊隱孢子蟲蟲種分別為Cxiao.(27)和C.ubiquitum(21),山羊隱孢子蟲蟲種均為C.parvun(68)。gp60基因分析顯示綿羊C.ubiquitu 基因亞型均為XIIa(19),山羊C.parvum基因亞型均為IIdA19G1(54)。為進一步確定安徽及周邊地區(qū)綿羊和山羊畢氏腸微孢子蟲的流行及基因型分布情況,對上述綿羊和山羊糞便樣品基因組DNA,利用畢氏腸微孢子蟲特異的巢氏PCR進行檢測,確定上述地區(qū)綿羊和山羊畢氏腸微孢子蟲感染情況,同時對獲得的陽性擴增產(chǎn)物進行測序,利用生物信息學(xué)方法分析其基因型。結(jié)果顯示綿羊畢氏腸微孢子蟲感染率為3.37%(28/832),其中蚌埠檢獲7個陽性樣品,感染率為2.0%(7/345),馬鞍山檢獲4個陽性樣品,感染率為4.0%(4/100),江蘇吳江檢獲16個陽性樣品,感染率為21.33%(16/75),山東泰安檢獲1個陽性樣品,感染率為1.67%(1/60)。山羊畢氏腸微孢子蟲感染率為4.09%(32/781),其中滁州檢獲21個陽性樣品,感染率為19.09%(21/110),蚌埠檢獲2個陽性樣品,感染率為11.11%(2/18),池州檢獲7個陽性樣品,感染率為9.86%(7/71),徐州檢獲2個陽性樣品,感染率為2.70%(2/74),其余各地未檢出山羊畢氏腸微孢子蟲陽性樣品。生物信息學(xué)分析顯示本次檢獲的綿羊畢氏腸微孢子蟲基因型分別為COS1(11),OEB1(3),BEB6(7),AHS1(4),AHS2(2)和 SZS1(1),山羊畢氏腸微孢子蟲基因型分別為CHG1(13),CHG3(16),AHG2(2)和BEB6(1),其中,AHG1,AHS1,AHS2和SZS1為本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)的新基因型。進化樹顯示本次獲得的蟲株均屬Group 2。為進一步確定安徽及周邊地區(qū)綿羊和山羊賈第蟲的流行及基因型分布情況,對上述綿羊和山羊糞便樣品基因組DNA,先利用賈第蟲TPI基因特異的巢式PCR方法對所有樣品進行檢測,在此基礎(chǔ)上,對獲得的TPI陽性樣品進行基于GDH基因的半巢式PCR擴增,然后對獲得的所有PCR產(chǎn)物進行測序,利用生物信息學(xué)方法進行序列分析,確定賈第蟲基因型。結(jié)果顯示綿羊賈第蟲感染率為0.36%(3/832),山羊感染率為0.0%(0/781)。3個綿羊賈第蟲TPI陽性樣品成功擴增出2個GDH基因�；谫Z第蟲TPI基因序列分析顯示3個陽性樣品集聚體亞型分別為E1(2)和E6(1),基于GDH基因的序列分析顯示2個陽性樣品均屬于集聚體E。為進一步確定安徽及周邊地區(qū)綿羊和山羊人芽囊原蟲的流行及基因型分布情況,對上述綿羊和山羊糞便樣品基因組DNA,利用人芽囊原蟲特異的PCR方法對所有樣品進行檢測,確定上述地區(qū)綿羊和山羊人芽囊原蟲感染情況,同時對獲得的陽性擴增產(chǎn)物進行測序,把所獲序列提交到人芽囊原蟲18S數(shù)據(jù)庫以確定其基因型和18S等位基因情況。結(jié)果顯示綿羊人芽囊原蟲總感染率為6.00%(50/832),其中江蘇吳江感染率最高,為24.00%(18/75),其次是山東泰安,感染率為16.67%(10/60),安徽省僅在蚌埠檢獲人芽囊原蟲陽性樣品,感染率為6.38(22/345),其余地區(qū)未見感染。山羊人芽囊原蟲總感染率為0.26%(2/781),僅在馬鞍山檢獲人芽囊原蟲陽性樣品,感染率為2.00(2/100)。序列分析顯示綿羊人芽囊原蟲基因型分別為ST4(2),ST5(8),ST10(25),ST14(10),新型 1(3),新型2(1)和新型3(1),山羊人芽囊原蟲基因型均為ST1(2)。18s等位基因分析顯示綿羊基因型ST4、ST14和ST10和山羊基因型ST1均只有一個等位基因,分別為allele2,allele42,allele 19和allele43,綿羊基因型ST5有2個等位基因,分別為allele115和allele119。為進一步確定安徽及周邊地區(qū)綿羊和山羊人五毛滴蟲的流行及分子特性情況,對上述綿羊和山羊糞便樣品基因組DNA,利用人五毛滴蟲特異的巢式PCR方法對所有樣品進行檢測,了解上述地區(qū)綿羊和山羊人五毛滴蟲感染情況,同時對獲得的陽性擴增產(chǎn)物進行測序,利用生物信息學(xué)方法對人五毛滴蟲的陽性序列進行分子分析。結(jié)果顯示本次調(diào)查綿羊樣品中均未發(fā)現(xiàn)人五毛滴蟲陽性樣品。山羊人五毛滴蟲總感染率為0.26%(2/781),且均分布在河南洛陽,感染率為1.83%(2/109)�；蚍治鲲@示2份山羊人五毛滴蟲分離物18SrRNA基因與在犬、人和猴等動物群中廣泛分布的人五毛滴蟲CC1基因型完全一致。
【學(xué)位授予單位】：安徽科技學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S858.26;S858.27

【參考文獻】

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本文編號：1290681