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啶酰菌胺對(duì)斑馬魚(yú)的毒性與在魚(yú)體內(nèi)的富集性研究

發(fā)布時(shí)間:2017-12-11 21:16

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【摘要】:啶酰菌胺作為最常用的殺菌劑之一,主要通過(guò)抑制琥珀酸脫氫酶的活性,阻礙機(jī)體內(nèi)物質(zhì)與蛋白質(zhì)線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅱ(以下簡(jiǎn)稱(chēng)"復(fù)合物Ⅱ")結(jié)合,使機(jī)體內(nèi)電子轉(zhuǎn)移受到干擾,從而阻礙能源生產(chǎn)、供應(yīng)來(lái)發(fā)揮作用,在有效抑制孢子萌發(fā)、病害傳播,促進(jìn)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、發(fā)展上起著越來(lái)越重要的作用,可用于防治白粉病、灰霉病、莖腐病等多種病害。本文以斑馬魚(yú)為研究對(duì)象,采用半靜態(tài)法,研究了啶酰菌胺對(duì)斑馬魚(yú)胚胎與成魚(yú)的急性與亞急性毒性效應(yīng)、對(duì)斑馬魚(yú)肝臟與鰓抗氧化酶體系的影響、對(duì)斑馬魚(yú)的作用機(jī)制、在斑馬魚(yú)體內(nèi)富集與消除作用,得出啶酰菌胺對(duì)斑馬魚(yú)有中等毒性,中等富集性,可誘導(dǎo)氧化應(yīng)激,能顯著抑制琥珀酸脫氫酶(SDH)和復(fù)合物Ⅱ的活性,為評(píng)價(jià)啶酰菌胺對(duì)斑馬魚(yú)的環(huán)境毒性提供更全面、系統(tǒng)的資料。啶酰菌胺對(duì)斑馬魚(yú)的致死中濃度(96 h-LC50)為1.26 mg/L(胚胎),1.84 mg/L(成魚(yú)),均為中等毒性;且能顯著抑制斑馬魚(yú)胚胎與成魚(yú)的心跳。斑馬魚(yú)暴露于啶酰菌胺中使斑馬魚(yú)肝臟和鰓中丙二醛(MDA)含量增加,激發(fā)機(jī)體防御功能,誘發(fā)氧化應(yīng)激。隨著暴露時(shí)間及濃度的增大,氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、過(guò)氧化物酶(POD)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPx)活性呈現(xiàn)出,暴露前期,隨濃度增大而升高,暴露后期,濃度增大,活性降低,肝臟中以上四種酶活性最高時(shí)分別為對(duì)照組的 124.16%(0.32 mg/L)、121.71%(0.32 mg/L)、127.65%(0.16 mg/L)、124.13%(0.16 mg/L),鰓中最高為對(duì)照組的 121.51%(0.32 mg/L)、118.85%(0.32 mg/L)、129.65%(0.32 mg/L)、114.90%(0.08 mg/L),肝臟中以上四種酶活性最低時(shí)分別為對(duì)照組的67.16%、70.51%、54.49%、60.74%,鰓中最低為對(duì)照組的 80.50%、77.11%、70.51%、73.40%,且均在0.32 mg/L時(shí)取得。有機(jī)體通過(guò)增加體內(nèi)酶活性以對(duì)外界環(huán)境的變化做出適應(yīng)性反應(yīng),然而,有機(jī)體都存在自身應(yīng)對(duì)外界變化的調(diào)節(jié)閾值,當(dāng)機(jī)體自身難以抵抗外界環(huán)境變化時(shí),將會(huì)產(chǎn)生氧化損傷。斑馬魚(yú)暴露于啶酰菌胺中,隨著濃度和時(shí)間增大,肥滿(mǎn)度(CF)、比肝重(HSI)和比鰓重(BSI)升高,暴露至21d,0.32mg/L下,CF、HSI、BS1與對(duì)照組相比均差異顯著,分別為對(duì)照組的93.04%、175.00%、122.00%。斑馬魚(yú)在0.32 mg/L啶酰菌胺中暴露21 d,SDH活性分別為對(duì)照組的32.64%(肝臟)和56.48%(鰓);復(fù)合物Ⅱ分別為對(duì)照組的60.53%(肝臟)和66.35%(鰓)。CF、HSI、BSI變化可能指示肝臟和鰓中由于SDH與復(fù)合物Ⅱ的抑制造成能量供應(yīng)不足,給機(jī)體組織造成了一定的毒性。建立了分析啶酰菌胺在斑馬魚(yú)體內(nèi)濃度的方法,斑馬魚(yú)中啶酰菌胺經(jīng)乙腈超聲震蕩提取、弗羅里硅土柱凈化,在紫外波長(zhǎng)210 rnn下檢測(cè),相對(duì)保留時(shí)間約為7.60 min,流動(dòng)相比例為乙腈:水=65:35(V/V)。啶酰菌胺在斑馬魚(yú)體內(nèi)的富集系數(shù)(BCF)分別為35.50(0.08 mg/L)和36.72(0.32 mg/L),屬中等富集性,最大富集時(shí)期和達(dá)到富集平衡時(shí)期均出現(xiàn)在富集暴露14~28 d,將試驗(yàn)斑馬魚(yú)移至清水中,在魚(yú)體內(nèi)的消除半衰期小于1 d。
【學(xué)位授予單位】:沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:X174;S481.1

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