發(fā)布時間：2017-12-08 14:08

  本文關(guān)鍵詞：豬偽狂犬病病毒HeN1株gE蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定

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【摘要】：為制備抗豬偽狂犬病病毒(PRV)糖蛋白E(gE)的單克隆抗體(MAb)并鑒定其抗原表位,本研究以原核系統(tǒng)表達(dá)PRV HeN1株截短的gE(aa127~aa232)蛋白(rgE),并對表達(dá)的rgE進(jìn)行純化免疫BALB/c小鼠,取其脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞(SP2/0)進(jìn)行融合,以該病毒感染的Vero E6細(xì)胞及真核表達(dá)的gE蛋白為檢測抗原,采用IFA檢測方法篩選雜交瘤細(xì)胞系,獲得一株穩(wěn)定分泌抗PRV gE的MAb雜交瘤細(xì)胞系(mgE185)。該MAb亞型鑒定為Ig G1型,輕鏈為Κ鏈。該MAb不具有中和病毒的活性,其細(xì)胞培養(yǎng)上清及腹水IFA效價分別為1∶80和1∶2 560。Western blot試驗(yàn)顯示mgE185可以特異性識別gE蛋白,表明其針對的抗原表位為線性表位。通過截短表達(dá)gE蛋白鑒定該MAb的抗原識別序列為~(151)IGDYL~(155),該抗原表位在PRV中高度保守。本研究制備的MAb為進(jìn)一步建立特異性強(qiáng)、靈敏度高的PRV gE-ELISA檢測方法奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國家重點(diǎn)豬病實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家重點(diǎn)研發(fā)計劃項(xiàng)目(2016YFD0500104) 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目(1610302016007)
【分類號】：S852.651
【正文快照】： 偽狂犬病(Pseudorabies,PR)是由PR病毒(PRV)引起的多種家畜、野生動物感染的一種急性傳染病[1]。PRV屬于皰疹病毒科,α-皰疹病毒亞科,豬皰疹病毒Ι型。PR的主要癥狀為妊娠母豬流產(chǎn)、初生仔豬大量死亡、種豬不育,給養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2]。自上世紀(jì)90年代,我國豬群通過

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