紅豆杉根際漆酶菌株的分離、優(yōu)化與實(shí)際應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2017-11-18 18:34
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【摘要】:漆酶是一種含銅的多酚氧化酶,對木質(zhì)素和與木質(zhì)素結(jié)構(gòu)相似的許多環(huán)境污染物有著明顯的降解作用,特別是在工業(yè)(交通和土木工程)廢水處理、有機(jī)廢液脫色,高分子催化合成和紙漿生物漂白等方面,表現(xiàn)出了很大的研究價(jià)值和應(yīng)用價(jià)值。本文采用的篩選綜合產(chǎn)酶培養(yǎng)基為:馬鈴薯200g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂粉20g/L、愈創(chuàng)木酚0.04%、Cu SO4 1 mmo L/L、VB1 0.01g/L,KH2PO4 3g/L,Mg SO4 2g/L。本研究從三種紅豆杉和冬蟲夏草根際(rhizosphere)土壤樣品中分離到四株漆酶高產(chǎn)真菌N、DX、DC、H。利用愈創(chuàng)木酚能夠與漆酶發(fā)生變色反應(yīng)這一特點(diǎn),根據(jù)其所產(chǎn)生的棕紅色變色圈確定四種菌株都是能夠產(chǎn)生漆酶的真菌。利用形態(tài)學(xué)觀察結(jié)合r DNA-ITS序列進(jìn)行分析,鑒定四種菌株分別為踝節(jié)菌屬菌株、曲霉菌屬菌株、交鏈孢屬菌株、疣孢漆斑菌。而踝節(jié)菌屬菌株、曲霉菌屬菌株、交鏈孢屬菌株能夠產(chǎn)生漆酶目前還沒有人進(jìn)行報(bào)道。建立系統(tǒng)發(fā)育樹確定四種菌株之間親緣關(guān)系。通過單因素實(shí)驗(yàn)、均勻設(shè)計(jì)研究了四種真菌產(chǎn)漆酶的最優(yōu)條件。得出以下研究結(jié)果:以蔗糖作為碳源,蛋白胨作為氮源的時(shí)候,菌株產(chǎn)漆酶最優(yōu)。而且DC在第五天的時(shí)候酶活產(chǎn)量最高,DX和H菌株在第六天的時(shí)候酶活產(chǎn)量最好,N則在第七天的時(shí)候酶活產(chǎn)量達(dá)到最優(yōu)。采用愈創(chuàng)木酚測定酶活的方法,H菌株在單因素條件下的最高酶活為216.2 u/m L.實(shí)驗(yàn)還研究了四種菌株對活性染料脫色降解效果;钚匀玖弦还策x取九種,分別為活性翠蘭、活性綠19、活性黑5、活性艷紅等。實(shí)驗(yàn)中采用紫外分光度計(jì)的方法測定其脫色率。經(jīng)過研究表明四種真菌均可有效脫色活性類染料,反應(yīng)條件為溫度30°C,活性染料初始濃度20mg/L,反應(yīng)4d后活性類染料脫色率均可達(dá)到70%以上。H菌株的脫色效率最高,對于活性翠藍(lán)最高的脫色效率可以達(dá)到95%以上。本項(xiàng)研究初步揭示出從植物根際分離的真菌在工業(yè)污水治理,綠色交通,環(huán)境保護(hù)和可持續(xù)發(fā)展方面都有很好的應(yīng)用前景與潛力。
【學(xué)位授予單位】:大連交通大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S791.49;Q93
【相似文獻(xiàn)】
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本文編號:1200775
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