發(fā)布時(shí)間：2020-07-30 16:35

【摘要】：山刺玫(Rosa davurica Pall.)是薔薇科薔薇屬純天然植物,廣泛生長于我國東北地區(qū)的山區(qū)和丘陵地帶,其活性成分主要包括黃酮類、三萜類和人體必需氨基酸等�，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明山刺玫具有抗氧化、抗衰老、免疫增強(qiáng)等功效,具有極高的藥用價(jià)值。近年來大部分研究報(bào)道主要集中在山刺玫的果實(shí)上,而對于山刺玫葉的研究報(bào)道較少。所以,本研究以山刺玫葉中總黃酮為研究對象,在此基礎(chǔ)上,首次從抗氧化、免疫增強(qiáng)和抗衰老機(jī)制方面研究山刺玫葉總黃酮的生理作用。利用醇提法結(jié)合正交試驗(yàn)法對山刺玫葉總黃酮的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,并利用D101大孔樹脂進(jìn)行總黃酮的純化。在此基礎(chǔ)上,測定不同采摘季節(jié)山刺玫葉總黃酮含量變化。山刺玫葉總黃酮的抗衰老作用,主要在體外抗氧化方面對·DPPH自由基、·OH自由基、O_2~-·自由基、ABTS~+·自由基的清除作用進(jìn)行檢測。在體內(nèi)抗氧化試驗(yàn)方面建立衰老模型,選取SPF級(jí)昆明種小鼠60只,雌雄各半并隨機(jī)分為空白組、衰老模型組、維生素E組(50 mg/(kg·d))和山刺玫葉總黃酮低、中、高劑量組(1.0、2.0、4.0 g/(kg·d)),共6組(n=10),空白組小鼠均用等體積生理鹽水灌胃和皮下注射,其余各組小鼠均頸背部皮下注射125 mg/(kg·d)D-半乳糖。6周后分別測定各組小鼠肝臟、血清和腦組織中的SOD、GSH-Px酶活力及MDA含量。其次,從免疫增強(qiáng)方面檢測各組小鼠免疫器官指數(shù);應(yīng)用ELISA法檢測各組小鼠血清中細(xì)胞因子IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α;HE染色法觀察各組小鼠腦組織的形態(tài)學(xué)變化;以及對利用ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖情況進(jìn)行考察,進(jìn)而探究山刺玫葉總黃酮的免疫增強(qiáng)機(jī)制。本試驗(yàn)研究內(nèi)容及結(jié)果如下:1.由單因素分析結(jié)合正交實(shí)驗(yàn)法確定了山刺玫葉總黃酮最佳提取工藝為:80%乙醇濃度、料液比1:30 g/mL、水浴溫度80℃、水浴時(shí)間2 h、得率為4.976%;通過對5~9月之間的總黃酮含量測定結(jié)果可知:8月中旬的山刺玫葉總黃酮含量最高,可達(dá)33.84mg/g;D101大孔樹脂純化條件確定為:上樣液濃度為原提取液稀釋4倍、吸附速率為2BV/h、上樣液pH值為4、解吸液為70%乙醇、洗脫速率為2 BV/h、洗脫液用量為7BV,在此條件下,所得總黃酮的純度為57.3%。2.山刺玫葉總黃酮的體外抗氧化活性測定試驗(yàn)結(jié)果表明:山刺玫葉總黃酮對·DPPH、·OH、O_2~-·和ABTS~+·等四種自由基均具有良好的清除作用,清除率可隨樣品濃度增加而增大,其抗氧化能力與V_C接近;山刺玫葉總黃酮的體內(nèi)抗氧化研究表明:與衰老模型組比較,山刺玫葉總黃酮中、高劑量組能顯著或極顯著提高衰老模型組小鼠肝臟中的SOD酶活力(P0.05,P0.01),同時(shí)中、高劑量組也能顯著或極顯著降低小鼠肝臟中的MDA含量(P0.05,P0.01);山刺玫葉總黃酮中、高劑量組能顯著或極顯著提高衰老模型組小鼠血清中的SOD、GSH-Px酶活力(P0.05,P0.01),同時(shí)中、高劑量組也能顯著或極顯著降低血清中的MDA含量(P0.05,P0.01);山刺玫葉總黃酮高劑量組能顯著提高衰老模型組小鼠腦組織中的GSH-Px酶活力(P0.05),且高劑量組也能顯著降低腦組織中的MDA含量(P0.05);維生素E組小鼠肝臟、血清和腦組織中的SOD、GSH-Px酶活力和MDA含量均有極顯著差異(P0.01)。3.在免疫增強(qiáng)方面,與衰老模型組比較,山刺玫葉總黃酮中、高劑量組能極顯著提高衰老模型組小鼠腦指數(shù)(P0.01),山刺玫葉總黃酮低、中、高劑量組均能顯著提高衰老模型組小鼠脾臟和胸腺指數(shù)(P0.05);山刺玫葉總黃酮中、高劑量組小鼠血清中細(xì)胞因子IL-2、IL-4顯著或極顯著高于衰老模型組小鼠(P0.05,P0.01),而山刺玫葉總黃酮低、中、高劑量組小鼠血清中細(xì)胞因子IL-6、TNF-α顯著或極顯著低于衰老模型組小鼠(P0.05,P0.01);維生素E組小鼠血清中細(xì)胞因子IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α均有極顯著差異(P0.01)。與衰老模型組比較,山刺玫葉總黃酮低、中、高劑量組小鼠腦組織的神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞的壞死及變性情況均有明顯減輕。山刺玫葉總黃酮對小鼠脾細(xì)胞有增殖作用,對ConA誘導(dǎo)的小鼠脾細(xì)胞中T-淋巴細(xì)胞增殖有抑制作用。由上述結(jié)果可知,山刺玫葉總黃酮具有良好的抗衰老作用,其作用機(jī)制主要是能夠從抗氧化和免疫增強(qiáng)方面對機(jī)體各組織器官均起到延緩衰老的功效。此研究為合理開發(fā)利用山刺玫葉及其生理活性物質(zhì)提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù),對山刺玫葉資源在食品領(lǐng)域和臨床應(yīng)用方面的開展運(yùn)用具有積極意義。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TQ464
【圖文】：

圖 3.17 山刺玫葉總黃酮對衰老模型小鼠血清 IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α 水平的影響ig. 3.17 Effects of total flavonoids in leaves of Rosa davurica Pall. on serum IL-2、IL-4TNF-α concentration of aging model mice相比，*表示差異顯著(P<0.05)，**表示差異極顯著(P<0.01)；與衰老模型組相比，#表示差異顯著(P<0.05)，##表示差異極顯著(P<0.01)h the control group, while with * means significant difference (*P<0.05), and with** means great significant difference (**P<0.01); Comparehile with#means significant difference (#P<0.05), and with##means great significant difference (##P<0.01).鼠腦組織病理切片觀察

圖 3.17 山刺玫葉總黃酮對衰老模型小鼠血清 IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α 水平的影響Fig. 3.17 Effects of total flavonoids in leaves of Rosa davurica Pall. on serum IL-2、IL-4、ILTNF-α concentration of aging model mice空白組相比，*表示差異顯著(P<0.05)，**表示差異極顯著(P<0.01)；與衰老模型組相比，#表示差異顯著(P<0.05)，##表示差異極顯著(P<0.01)。ed with the control group, while with * means significant difference (*P<0.05), and with** means great significant difference (**P<0.01); Compared with roup, while with#means significant difference (#P<0.05), and with##means great significant difference (##P<0.01).3 小鼠腦組織病理切片觀察

且隨著山刺玫葉總黃酮?jiǎng)┝康脑黾�，恢�?fù)程度也逐漸葉總黃酮對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響圖 3.19 山刺玫葉總黃酮提取物對小鼠脾細(xì)胞增值的影響ffect of total flavonoids in leaves of Rosa davurica Pall. on spleen cell prolifEffects of total flavonoids in leaves of Rosa davurica Pall.9 所示，與模型組相比，隨著總黃酮作用濃度的增加，刺激小鼠關(guān)系。當(dāng)質(zhì)量濃度為 200 μg/mL 時(shí)，山刺玫葉總黃酮 SI 值為

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張超;易駿;張若青;楊淑玲;葉齊;吳建國;吳錦忠;吳巖斌;鄭承劍;;金線蓮及其混偽品中總黃酮含量的比較研究[J];藥學(xué)實(shí)踐雜志;2019年06期

2 隋娟娟;劉佩冉;寧偉;楊京霞;郭夢雅;;太和香椿莖、葉、花中總黃酮含量的比較[J];黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué);2016年12期

3 張琳;周潤天;李興華;;不同提取方法對骨碎補(bǔ)中總黃酮含量的影響比較[J];云南中醫(yī)中藥雜志;2016年11期

4 劉賢賢;陳剛;楊起群;蘇玉卿;;青錢柳葉香豆素、黃酮含量測定及抗氧化活性研究[J];桂林師范高等專科學(xué)校學(xué)報(bào);2016年06期

5 劉金武;劉添;王子金;郭春燕;李潔;黃春霞;;南劉寄奴不同部位黃酮含量測定的分析研究[J];中西醫(yī)結(jié)合心血管病電子雜志;2016年25期

6 邢佰穎;陳新梅;秦樂;岳志敏;;兩種顯色法測定昆侖雪菊總黃酮含量的比較研究[J];化工時(shí)刊;2016年12期

7 黃雪秋;趙玉英;;蒙藥檳榔十三味丸中總黃酮含量的測定[J];山東工業(yè)技術(shù);2017年04期

8 蘆永昌;錢帥;毛繼祖;許生勝;馬禪娟;;柳蘭中總黃酮含量的測定[J];種業(yè)導(dǎo)刊;2016年11期

9 黎穎菁;付金娥;韋樹根;潘麗梅;;廣西不同產(chǎn)地三葉青中總黃酮含量分析[J];農(nóng)業(yè)研究與應(yīng)用;2016年06期

10 任強(qiáng);薛永;聶其婷;王亞楠;夏天睿;;紫外分光光度法測定不同產(chǎn)地半枝蓮總黃酮含量[J];濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2017年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 彭玲;李衛(wèi)民;高英;;不同產(chǎn)地枳i子中總黃酮含量的比較[A];藥用植物化學(xué)與中藥資源可持續(xù)發(fā)展學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上）[C];2009年

2 吳素玲;孫曉明;張衛(wèi)明;顧龔平;;紫外分光光度法測定刺梨黃酮含量的研究?[A];中醫(yī)藥現(xiàn)代化與科技創(chuàng)新高層論壇暨第二屆金陵名醫(yī)論壇論文集[C];2007年

3 張宏;劉剛;張曉喻;黃春萍;;黑骨藤中總黃酮含量的測定[A];第十屆全國中藥和天然藥物學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

4 周日寶;劉笑蓉;唐麗君;劉佳勝;;大葉紫珠有效成分總黃酮含量的動(dòng)態(tài)變化研究[A];全國第9屆天然藥物資源學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

5 張振凌;呂鵬;劉艷芳;;不同條件炮制菟絲子中總黃酮含量的比較研究[A];2011年中國藥學(xué)大會(huì)暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

6 黃瑞平;黃穎楨;陳菁瑛;趙云青;;不同月齡金線蓮多糖、總黃酮含量的比較[A];海峽兩岸暨CSNR全國第十屆中藥及天然藥物資源學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

7 鄭旭東;胡浩斌;張克鈞;;更年樂片中總黃酮含量的測定[A];首屆中國中西部地區(qū)色譜學(xué)術(shù)交流會(huì)暨儀器展覽會(huì)論文集[C];2006年

8 帕麗達(dá)·阿不力孜;叢媛媛;趙文惠;王曉文;張笑穎;;紫外分光光度法測定羅勒黃酮含量[A];第五屆全國民族醫(yī)藥學(xué)術(shù)交流大會(huì)論文集[C];2006年

9 張笑迎;劉建學(xué);羅登林;鐘先鋒;李佩艷;趙冰琳;;比色法測定豬毛菜中總黃酮含量的研究[A];第十屆中國科協(xié)年會(huì)（河南）食品論壇論文集[C];2008年

10 李金玲;張聰聰;薛強(qiáng);張輝;徐曉玉;;銀冬顆粒中總黃酮含量的測定[A];第四屆全國臨床中藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2011年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 本報(bào)記者 孫燕明;蜂膠產(chǎn)品黃酮含量并非越高越好[N];中國消費(fèi)者報(bào);2010年

2 徐振剛;蜂膠產(chǎn)品總黃酮含量到底該多少[N];中國食品報(bào);2010年

3 本報(bào)記者 程雪紅　王晶;四品牌蜂膠使用同一批號(hào)[N];烏魯木齊晚報(bào)(漢);2010年

4 胡婕 本報(bào)記者 薛慶元;近半蜂膠涉嫌摻假[N];中國消費(fèi)者報(bào);2013年

5 ;怎樣選購蜂膠[N];深圳商報(bào);2004年

6 本報(bào)記者 周穎;專家教您如何選擇蜂膠[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2010年

7 劉橋斌;蜂膠真?zhèn)渭?xì)辨別[N];健康時(shí)報(bào);2007年

8 本報(bào)記者 王城;行業(yè)亟待系統(tǒng)性改造[N];中國食品報(bào);2010年

9 本報(bào)記者施淵;將一流的產(chǎn)品帶給消費(fèi)者[N];中國食品質(zhì)量報(bào);2009年

10 趙會(huì)方;蜂膠何時(shí)走出“造假漩渦”？[N];人民政協(xié)報(bào);2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 謝t

本文編號(hào)：2775803