本文關(guān)鍵詞：UBE2Q1的異常表達(dá)與肝細(xì)胞肝癌發(fā)生發(fā)展的相性研究

  更多相關(guān)文章： UBE2Q1 肝細(xì)胞肝癌 細(xì)胞增殖 p53 細(xì)胞周期

【摘要】：目的:肝細(xì)胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最常見(jiàn)的癌癥之一。有研究報(bào)道,泛素蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin-proteasome system,UPS)參與了蛋白質(zhì)降解的調(diào)控,在HCC以及其他惡性腫瘤的病理生理學(xué)過(guò)程中扮演著關(guān)鍵角色。泛素接合酶E2Q1(ubiquitin-conjugating enzyme E2Q1,UBE2Q1)作為一種E2泛素接合酶類,可能參與了癌癥相關(guān)蛋白的調(diào)控。本研究旨在分析UBE2Q1在HCC中的表達(dá)情況及其與HCC患者預(yù)后的關(guān)系,并進(jìn)一步探討UBE2Q1的異常表達(dá)在HCC發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的意義。方法:1.從組織學(xué)角度研究,首先通過(guò)Western blot方法,檢測(cè)在8對(duì)新鮮HCC及其對(duì)應(yīng)的癌旁組織中UBE2Q1蛋白的表達(dá)情況;然后,運(yùn)用免疫組化方法檢測(cè)86例HCC組織標(biāo)本中UBE2Q1和增殖指標(biāo)Ki-67的表達(dá)情況,并采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析UBE2Q1、Ki-67的表達(dá)情況與HCC癌患者的性別、年齡、腫瘤體積大小、組織學(xué)分級(jí)以及腫瘤轉(zhuǎn)移等臨床病理因素之間的相關(guān)性。通過(guò)Kaplan-Meier法分析UBE2Q1的表達(dá)與HCC患者生存率之間的相關(guān)性;運(yùn)用單因素和Cox危險(xiǎn)比例模型多因素分析進(jìn)一步探究UBE2Q1的表達(dá)與肝細(xì)胞肝癌患者預(yù)后之間的關(guān)系。2.從細(xì)胞學(xué)角度研究,選取高表達(dá)UBE2Q1的BEL-7404、Hep G2細(xì)胞株作為研究對(duì)象,血清饑餓釋放同步化處理后運(yùn)用Western blot方法檢測(cè)UBE2Q1蛋白表達(dá)水平變化,探究其在腫瘤細(xì)胞增殖過(guò)程中的潛在作用。3.從分子生物學(xué)角度研究,通過(guò)小干擾RNA的方式下調(diào)BEL-7404、Hep G2細(xì)胞中UBE2Q1的內(nèi)源性表達(dá),然后采用CCK-8、細(xì)胞流式分析等方法檢測(cè)UBE2Q1表達(dá)的下調(diào)對(duì)細(xì)胞增殖以及細(xì)胞周期的影響。結(jié)果:1.免疫組化及Western blot法檢測(cè)均顯示,UBE2Q1在HCC組織中的表達(dá)明顯高于相對(duì)應(yīng)的癌旁肝組織。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析提示UBE2Q1的表達(dá)強(qiáng)度與HCC組織學(xué)分級(jí)(P0.001)之間的關(guān)系有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,相關(guān)性分析表明UBE2Q1與Ki-67表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.639,P0.01);Kaplan-Meier分析顯示UBE2Q1在HCC中的高表達(dá)與患者總生存率的降低顯著相關(guān)(P=0.001);單因素分析表明UBE2Q1與HCC患者的不良預(yù)后有關(guān)(P0.001);Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型分析顯示UBE2Q1可做為HCC患者預(yù)后的一種獨(dú)立指標(biāo)(P=0.002)。2.通過(guò)血清饑餓的方式使BEL-7404、Hep G2細(xì)胞生長(zhǎng)周期停滯,血清釋放后刺激BEL-7404、Hep G2細(xì)胞增殖;Western blot結(jié)果顯示UBE2Q1PCNA蛋白隨著細(xì)胞周期的進(jìn)展表達(dá)增加,而p53、p21蛋的白表達(dá)卻下降。3.si RNA分析顯示,UBE2Q1表達(dá)的下調(diào)可引起B(yǎng)EL-7404、Hep G2細(xì)胞增殖水平的下降及其細(xì)胞周期的停滯。結(jié)論:1.UBE2Q1在HCC中高表達(dá),并且可作為HCC患者一種獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)。UBE2Q1的高表達(dá)提示HCC患者的預(yù)后不良。上述結(jié)果均說(shuō)明UBE2Q1可能與HCC的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。2.UBE2Q1的表達(dá)在血清饑餓的BEL-7404、Hep G2細(xì)胞中逐漸增加,提示UBE2Q1與HCC細(xì)胞的增殖過(guò)程相關(guān)。si RNA干擾BEL-7404、Hep G2細(xì)胞中UBE2Q1的內(nèi)源性表達(dá)后,p53、p21在BEL-7404、Hep G2細(xì)胞中的表達(dá)水平相應(yīng)增加,提示UBE2Q1的表達(dá)下調(diào)可能通過(guò)使HCC細(xì)胞周期停滯來(lái)影響其增殖。
【關(guān)鍵詞】：UBE2Q1 肝細(xì)胞肝癌 細(xì)胞增殖 p53 細(xì)胞周期
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 第一章 緒論11-14
• 1.1 課題來(lái)源、研究的目的和意義11-12
• 1.2 國(guó)內(nèi)外研究概況12-13
• 1.2.1 國(guó)外研究概況12-13
• 1.2.2 國(guó)內(nèi)研究概況13
• 1.3 論文的主要研究?jī)?nèi)容13-14
• 第二章 材料和方法14-25
• 2.1 材料14-19
• 2.1.1 組織標(biāo)本14
• 2.1.2 細(xì)胞14
• 2.1.3 試劑14-18
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器18-19
• 2.2 方法19-25
• 2.2.1 Western blot檢測(cè)19-20
• 2.2.2 病理切片的免疫組化20-23
• 2.2.3 細(xì)胞株的培養(yǎng)23
• 2.2.4 UBE2Q1 基因的si-RNA質(zhì)粒23
• 2.2.5 利用脂質(zhì)體Lipofectamine 2000 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HepG2 和BEL-7404 細(xì)胞23-24
• 2.2.6 流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)細(xì)胞周期的分布24
• 2.2.7 CCK-8（cell counting kit-8）法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性24-25
• 第三章 結(jié)果25-42
• 3.1 UBE2Q1 在HCC組織及其對(duì)應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)25-27
• 3.1.1 Western blot檢測(cè)UBE2Q1 在8對(duì)HCC及其對(duì)應(yīng)癌旁新鮮組織中的表達(dá)情況25-26
• 3.1.2 免疫組化檢測(cè)UBE2Q1 和Ki-67 在HCC及其對(duì)應(yīng)癌旁石蠟切片組織中的表達(dá)情況26
• 3.1.3 UBE2Q1 和Ki-67 在HCC組織中表達(dá)的相關(guān)性分析26-27
• 3.2 UBE2Q1 的表達(dá)與HCC臨床病理因素的相關(guān)性27-29
• 3.3 HCC預(yù)后相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析29-31
• 3.3.1 單因素生存分析29-30
• 3.3.2 UBE2Q1 的表達(dá)對(duì)HCC患者生存率的影響30
• 3.3.3 Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型多因素生存分析30-31
• 3.4 UBE2Q1 在肝細(xì)胞肝癌細(xì)胞株及正常肝細(xì)胞株中的表達(dá)31-32
• 3.5 UBE2Q1 對(duì)HepG2 細(xì)胞株增殖的影響32-37
• 3.5.1 血清饑餓釋放對(duì)HepG2 細(xì)胞株細(xì)胞周期的影響32-33
• 3.5.2 HepG2 細(xì)胞增殖過(guò)程中UBE2Q1 表達(dá)的變化33-34
• 3.5.3 UBE2Q1 表達(dá)的下調(diào)對(duì)于HepG2 細(xì)胞株細(xì)胞增殖的影響34-36
• 3.5.4 UBE2Q1 表達(dá)的下調(diào)對(duì)HepG2 細(xì)胞株細(xì)胞周期及其相關(guān)蛋白的影響36-37
• 3.6 UBE2Q1 對(duì)BEL-7404 細(xì)胞株增殖的影響37-42
• 3.6.1 血清饑餓釋放對(duì)BEL-7404 細(xì)胞株細(xì)胞周期的影響37-38
• 3.6.2 BEL-7404 細(xì)胞增殖過(guò)程中UBE2Q1 表達(dá)的變化38-39
• 3.6.3 UBE2Q1 表達(dá)的下調(diào)對(duì)于BEL-7404 細(xì)胞株細(xì)胞增殖的影響39-40
• 3.6.4 UBE2Q1 表達(dá)的下調(diào)對(duì)BEL-7404 細(xì)胞株細(xì)胞周期及其相關(guān)蛋白的影響40-42
• 第四章 討論42-46
• 第五章 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 綜述53-86
• 參考文獻(xiàn)71-86
• 在攻讀博士學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文與參加的項(xiàng)目86-87
• 英文縮寫詞表87-90
• 致謝90-91

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 朱立新,耿小平;肝細(xì)胞肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素、預(yù)防及治療[J];肝膽外科雜志;2000年06期

2 季偉,王慧芬;乙型肝炎病毒感染合并肝細(xì)胞肝癌153例臨床分析[J];中華肝臟病雜志;2001年06期

3 陳孝平;張志偉;楊甲梅;沈鋒;;肝細(xì)胞肝癌外科治療方法的選擇[J];中華普通外科學(xué)文獻(xiàn)(電子版);2008年06期

4 董碩;謝廣茹;吳雄志;;男性肝細(xì)胞肝癌術(shù)后預(yù)后因素分析[J];中國(guó)腫瘤臨床;2008年08期

5 陳孝平;張志偉;楊甲梅;沈鋒;;肝細(xì)胞肝癌外科治療方法的選擇[J];中華普通外科學(xué)文獻(xiàn)(電子版);2009年02期

6 郭洪生;杜智;高英堂;薛春祥;張勤;朱爭(zhēng)艷;王偉麗;;磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及意義[J];中國(guó)腫瘤臨床;2009年08期

7 陳孝平;張志偉;楊甲梅;沈鋒;;肝細(xì)胞肝癌外科治療方法的選擇[J];中華普通外科學(xué)文獻(xiàn)(電子版);2010年01期

8 徐霽;;多齒針大劑量乙醇消融治療直徑5.0cm以內(nèi)的肝細(xì)胞肝癌[J];國(guó)際醫(yī)學(xué)放射學(xué)雜志;2010年01期

9 張國(guó)強(qiáng);楊定華;李相z，

本文編號(hào)：963859