本文關鍵詞：干擾素-γ及自噬相關基因ATG5缺陷對APC突變所致腸道腫瘤的影響

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【摘要】：研究背景結腸癌嚴重威脅人類健康。在西方國家,結腸癌成為第二高發(fā)癌癥,并且,其發(fā)病率和死亡率逐年上升。結腸癌的發(fā)生與發(fā)展是一個多階段,由多基因參與的分子病理學過程。臨床上,約85%的散發(fā)性結腸癌病人攜帶有腺瘤息肉病基因(adenomatous polyposis coli, APC)的突變,APC基因突變在早期可導致結直腸腺瘤,而大部分結腸癌源于結腸腺瘤,腺瘤癌變一般需要十幾年時間。干擾素-γ(Interferon-gamma, IFN-γ)作為一種具有抗癌活性的內源蛋白質,受到人們廣泛關注。除了重要的抗腫瘤作用外,IFN-γ還具有抗病毒、抗微生物、調節(jié)細胞周期、凋亡與分化和調節(jié)免疫反應等多種生物學功能。最近的研究報道,IFN-γ及其受體基因的突變與結直腸癌的發(fā)病風險及其預后有著密切的聯(lián)系。然而,關于IFN-γ及其受體在結直腸癌發(fā)病過程中的作用及意義尚不明確。本論文第一部分借助經典的APC突變所致腸道腫瘤模型(ApcMin/+小鼠模型)以及APC基因突變背景的人源結腸癌細胞,探討了干擾素-γ及其受體基因突變對APC突變誘發(fā)的腸道腫瘤發(fā)生和發(fā)展的影響,并對相關機制做了深入研究。細胞自噬是細胞對內外壓力的一種適應性反應,細胞吞噬自身細胞質蛋白或細胞器,形成自噬溶酶體,降解所包裹的內容物,藉此促進細胞的存活和恢復細胞穩(wěn)態(tài)。自噬相關基因-5(autophagy related gene-5, ATG5)是自噬過程中一種重要的ATG基因,參與早期自噬體的形成,在細胞自噬過程起到了重要的作用。ATG5蛋白在正常結腸細胞中有表達,而在23%的結直腸癌患者中發(fā)生缺失。盡管發(fā)病率較低,但ATG5基因缺陷可能在結腸癌的發(fā)病過程中起了重要作用。此外,體外研究表明,ATG5基因經小干擾RNAs (small interfering RNAs, siRNAs)沉默后可以大大增強化療藥物對腫瘤細胞的抑制作用。在第二部分,我們利用ApcMin/+小鼠模型和APC基因突變背景的人源結腸癌細胞,探討了ATG5基因缺陷對APC突變誘發(fā)的腸道腫瘤發(fā)生和發(fā)展的影響,并通過體內實驗證明了ATG5基因缺陷可以增強化療藥物對腫瘤的敏感性。第一部分IFN-y基因缺陷對APC突變誘發(fā)的腸道腫瘤的影響第一節(jié)內源性IFN-y基因缺陷對ApcMin/+小鼠腸道腫瘤的影響實驗目的：探討內源性IFN-γ基因缺陷對ApcMin/+小鼠腸道腫瘤發(fā)生發(fā)展的影響。實驗方法：選用經典的腸道腺瘤模型ApcMin/+小鼠模型以及IFN-γ基因缺陷的小鼠IFN-γ-/-或IFN-γ+/-小鼠,通過雜交繁育和基因鑒定等方法得到子代雙基因缺陷的ApcMin/+IFN-γ+/-小鼠。通過比較子代ApcMin/+IFN-γ+/+小鼠與ApcMin/+IFN-γ+/"小鼠腸道腺瘤大小和數(shù)目,確定IFN-γ缺陷對ApcMin/+小鼠腸道腫瘤的影響；通過組織病理學檢查得出IFN-γ缺陷對ApcMin/+小鼠腸道腫瘤惡性程度的影響；ELISA法檢測IFN-γ基因缺陷對小鼠血清IFN-γ水平的影響；免疫組化法檢測IFN-γ缺陷對腸道腫瘤微環(huán)境中免疫因子數(shù)量和分布的調節(jié)作用；進一步對腸道腫瘤進行western blotting分析,檢測IFN-γ基因缺陷對腫瘤組織中IFN-γ信號通路、Wnt/β-catenin以及EGFR/Erk1/2等信號通路的調控作用。實驗結果：小鼠正常飼養(yǎng)至6月齡時,大多數(shù)ApcMin/+IFN-γ+/+小鼠狀態(tài)良好,而接近半數(shù)的ApcMin/+IFN-γ+/-小鼠發(fā)生死亡,其余存活的ApcMin/+IFN-γ+/-小鼠狀態(tài)較差,大多出現(xiàn)便血或脫肛。解剖發(fā)現(xiàn),與ApcMin/+IFN-γ+/+小鼠相比,ApcMin/+IFN-γ+/-小鼠腸道腺瘤的大小和數(shù)目都有顯著的增加。組織病理學結果表明,41.7%的ApcMin/+IFN-γ+/-小鼠的腸道腺瘤發(fā)生了癌變。ELISA法檢測發(fā)現(xiàn)雜合性的IFN-γ缺陷降低了小鼠血清中IFN-γ水平；免疫組化檢測結果表明,IFN-γ缺陷可以調節(jié)腸道腫瘤微環(huán)境中免疫因子CD4、CD8及F4/80的數(shù)量和分布,進而限制了ApcMin/+小鼠的抗腫瘤細胞免疫能力。Western blotting實驗發(fā)現(xiàn),雜合性IFN-γ缺陷對IFN-γ信號通路具有一定的抑制作用,并且激活了腫瘤相關信號通路Wnt/β-catenin和EGFR/Erk1/2,促進腫瘤的生長。因此,IFN-γ缺陷可以促進ApcMin/+小鼠腸道腫瘤的發(fā)展,并且可以促使良性的ApcMin/+小鼠腸道腺瘤發(fā)生癌變。這一作用可能與IFN-γ缺陷對Wnt/β-catenin和EGFR/Erk1/2等腫瘤相關信號通路的活化作用有關。實驗結論：IFN-γ在APC突變誘發(fā)的腸道腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中扮演了限速因子的角色,這個結果揭示了IFN-γ在癌癥生物學中的一個新的作用。第二節(jié)干擾素-γ受體基因缺陷對APC突變背景的人源結腸癌細胞株生長的影響實驗目的：通過體外試驗,檢測IFN-γ受體基因發(fā)生缺失對結腸癌細胞生長的影響。實驗方法：使用轉染試劑lipofectamineTM 2000進行小干擾RNA細胞轉染試驗,下調HT-29結腸癌細胞中的IFNγR1基因水平；使用western blotting法檢測IFNγR1蛋白的表達水平,確定IFNγR1基因的沉默效率。通過MTT法檢測IFN-γ對HT-29細胞以及IFNγR1基因沉默的HT-29細胞的抑制作用,進一步驗證IFNγR1基因的沉默效果；通過MTT實驗和細胞克隆形成實驗檢測IFNγR1沉默對HT-29結腸癌細胞增殖的影響；通過使用western blotting法檢測IFNγR1沉默對HT-29細胞中Wnt/β-catenin和EGFR/Erk1/2等腫瘤相關信號通路的影響。使用MTT法反方向驗證外源性IFN-γ對HT-29和HCT-116結腸癌細胞增殖的抑制作用,通過western blotting法檢測IFN-γ抑制結腸癌細胞增殖的機制。實驗結果：通過lipofectamineTM 2000轉染IFNγR1-target siRNA,下調了HT-29細胞中IFNγR1水平,western blotting試驗發(fā)現(xiàn),siRNA可以顯著降低HT-29結腸癌細胞中的IFNγR1蛋白水平,沉默效率達70%以上。MTT法檢測發(fā)現(xiàn)IFN-γ對IFNγR1沉默的HT-29細胞的抑制作用不敏感,從而進一步證實了IFNγR1蛋白水平被有效下調。細胞克隆形成試驗得出,與沉默無關序列相比,沉默IFNγR1后HT-29細胞的克隆形成能力明顯增強。Western blotting結果顯示IFNγR1沉默顯著促進了Wnt/β-catenin和EGFR/Erk1/2信號通路。進一步MTT檢測結果表明,IFN-γ可顯著抑制APC突變背景的人源結腸癌細胞HT-29的增殖,抑制作用呈現(xiàn)時間和劑量依賴性,而IFN-γ對野生型APC基因背景的HCT-116人源結腸癌細胞的增殖無明顯抑制作用。利用western blotting方法進一步檢測了IFN-γ對HT-29細胞的作用機制,結果表明,IFN-γ刺激促進了STAT1磷酸化,激活了HT-29細胞中的IFN-γ信號通路,并且,IFN-γ可抑制HT-29細胞中的Wnt/β-catenin信號通路,通過增加β-catenin的磷酸化進而促進β-catenin的降解。實驗結論：IFN-γ可顯著抑制APC突變背景的人源結腸癌細胞HT-29的增殖,而對野生型APC基因背景的HCT-116人源結腸癌細胞的增殖無顯著影響。沉默IFNγR1可促進HT-29細胞的克隆形成,此作用可能與對腫瘤相關信號通路Wnt/β-catenin和EGFR/Erk1/2的調節(jié)作用相關。第二部分自噬相關基因ATG5缺陷對APC突變誘發(fā)的腸道腫瘤的影響第一節(jié)內源性ATG5基因缺陷對ApcMin/+小鼠腸道腫瘤的影響(體內試驗)實驗目的：探討內源性ATG5基因缺陷對ApcMin/+小鼠腸道腫瘤發(fā)展的影響。實驗方法：由于ATG5-/-小鼠是無法存活的,在這里,我們使用腸道腺瘤模型小鼠ApcMin/+以及ATG5基因雜合性缺失的ATG5+/-小鼠,通過雜交繁育和基因鑒定等方法得到子代ATG5缺陷的ApcMin/+小鼠模型。通過比較子代ApcMin/+ATG5+/+與ApcMin/+ATG5+/-小鼠腸道腺瘤的大小和數(shù)目,確定ATG5缺陷對ApcMin/+小鼠腸道腫瘤生長的影響；通過組織病理學試驗得出ATG5缺陷對ApcMin/+小鼠腸道腫瘤惡性程度的影響；進一步對腸道腫瘤進行western blotting分析,檢測ATG5缺陷對腫瘤組織中自噬信號、凋亡相關信號通路、Wnt/β-catenin和EGFR/Erk1/2等腫瘤相關信號通路的調控作用。實驗結果：基因缺陷小鼠生長至4月齡時,解剖發(fā)現(xiàn),ApcMin/+ATG5+/+小鼠與ApcMin/+ATG5+/-小鼠相比,腸道腺瘤的大小和數(shù)目無明顯差異(P0.05)；小鼠生長至6月齡時,解剖發(fā)現(xiàn),與ApcMin/+ATG5+/+小鼠相比,ApcMin/+ATG5+/-小鼠腸道腺瘤的數(shù)目有所增加,達到顯著性差異。組織病理學結果表明,雜合性ATG5缺陷不足以引起ApcMin/+小鼠的腸道腺瘤發(fā)生癌變,對腸道腺瘤的惡性程度無顯著影響。Western blotting實驗發(fā)現(xiàn),雜合性ATG5缺陷對腸道腫瘤細胞凋亡及自噬通路無顯著影響,但激活了腫瘤相關的Wnt/p-catenin和EGFR/Erk1/2信號通路,促進了腫瘤的生長。實驗結論：雜合性ATG5缺陷可以促進ApcMin/+小鼠腸道腫瘤的生長,但不足以引起ApcMin/+小鼠腸道腺瘤發(fā)生癌變。ATG5缺陷對腸道腫瘤生長的促進作用可能與對Wnt/β-catenin和EGFR/Erk1/2等腫瘤相關信號通路的促進作用有關,而與細胞的自噬和凋亡作用無關。第二節(jié)ATG5基因缺失對APC突變背景的結腸癌細胞株HT-29生長的影響(體外實驗)實驗目的：確定ATG5基因缺失對結腸癌細胞生長的影響。實驗方法：使用lipofectamineTM 2000轉染ATG5-target siRNA,下調HT-29結腸癌細胞中的ATG5基因水平；western blotting法檢測ATG5蛋白的表達水平,確定ATG5基因的沉默效率。通過MTT法檢測沉默ATG5對HT-29細胞增殖的影響；通過細胞克隆形成實驗檢測ATG5沉默對HT-29結腸癌細胞克隆形成能力的影響。實驗結果：使用ATG5-target siRNA,通過lipofectamineTM 2000轉染試劑轉染HT-29結腸癌細胞,western blotting試驗發(fā)現(xiàn),siRNA可以顯著降低ATG5的蛋白水平,沉默效率達90%以上。MTT法檢測發(fā)現(xiàn),ATG5沉默后HT-29細胞的增殖被顯著抑制。細胞克隆形成試驗得出相同的結論,即與沉默無關序列相比,沉默ATG5之后HT-29細胞的克隆形成能力受到顯著抑制。實驗結論：ATG5沉默可以顯著抑制HT-29細胞的增殖,并且顯著抑制了HT-29細胞的克隆形成。我們推測,ATG5缺失方式的不同以及實驗動物種屬的差異等原因可能是造成體內外實驗結果不一致的因素。第三節(jié)ATG5基因缺陷顯著提高IFN-γ對ApcMin/+小鼠腸道腫瘤的抑制作用實驗目的：通過動物實驗,驗證ATG5基因缺陷可以提高抗腫瘤藥物的藥效作用。實驗方法：使用腸道腺瘤ApcMin/+小鼠模型和雜合性ATG5缺陷的ATG5+/-小鼠模型,通過雜交繁育和基因鑒定等方法得到子代ApcMin/+ATG5+/-和ApcMin/+ATG5+/-小鼠模型。采用腹腔注射鼠源IFN-γ的方法,比較IFN-γ早期預防給藥以及晚期治療給藥前后ApcMin/+ATG5+/+與ApcMin/+ATG5+/-小鼠腸道腺瘤大小、數(shù)目的變化,通過組織病理學檢驗分析給藥前后小鼠腸道腫瘤惡性程度的變化,確定雜合性ATG5缺陷對IFN-y療效的影響,進一步確定ATG5基因缺陷是否可以提高IFN-y對ApcMin/+小鼠腸道腫瘤的抑制作用。通過對小鼠進行攝食量、體重及血常規(guī)檢測,分析IFN-y給藥所引起的毒性反應。通過western blotting分析,檢測ATG5缺陷對IFN-y誘導的腫瘤相關信號通路Wnt/β-catenin和EGFR/Erk1/2的影響。實驗結果：早期IFN-y預防給藥于腸道腫瘤尚未出現(xiàn)時開始,給藥3個月,中間休息一個月,晚期IFN-y治療給藥于腫瘤出現(xiàn)之后開始,給藥方式相同。給藥結束后解剖發(fā)現(xiàn),早期IFN-y預防給藥后,ApcMin/+ATG5+/-小鼠腸道腺瘤的數(shù)目與陰性對照組(給予生理鹽水)的ApcMin/+ATG5++/-小鼠相比明顯減少,下降了95.5%,組織病理學發(fā)現(xiàn),給藥后,ApcMin/+ATG5+/-小鼠的腸道腺瘤極少,大多數(shù)部位僅見增生。而ApcMin/+ATG5+/+小鼠早期給藥IFN-γ后,腸道腺瘤數(shù)目較陰性對照組的ApcMin/+ATG5+/+小鼠雖有所減少,下降了43.3%,但仍見數(shù)目較多的腸道腺瘤以及較為嚴重的發(fā)育不良等病理學特征。因此,ATG5缺陷可大大提高IFN-γ早期預防給藥的效果。此外,ATG5缺陷還可提高晚期IFN-γ給藥的藥效,但提高的幅度較早期給藥小。鑒于早期IFN-γ給藥出現(xiàn)的良好的腺瘤抑制效果,我們進一步檢測了IFN-γ給藥的毒性反應。研究發(fā)現(xiàn),IFN-γ給藥對小鼠攝食量和體重無明顯影響；血常規(guī)結果表明,IFN-γ給藥后不僅未出現(xiàn)白細胞、血小板等血細胞的減少,反而出現(xiàn)血小板的略微上升,因此IFN-γ給藥可能有助于提高小鼠的自身免疫水平。Western blotting分析發(fā)現(xiàn),ATG5缺陷提高了IFN-γ對腫瘤相關信號通路Wnt/β-catenin和EGFR/Erk1/2的抑制作用,進而提高了對腫瘤生長的抑制效果。實驗結論：ATG5基因缺陷提高了IFN-γ對ApcMin/+小鼠腸道腺瘤的抑制作用,此作用與ATG5缺陷提高了IFN-γ對Wnt/β-catenin和EGFR/Erk1/2信號通路的抑制作用有關,此結論與文獻所報道的體外細胞水平的實驗結論一致,即ATG5基因缺陷可以提高抗腫瘤藥物的藥效�？偟膩碚f,ATG5在腸道腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起了重要的作用,IFN-γ治療與ATG5基因缺陷或ATG5靶向抑制相結合可能成為結腸癌預防和治療的新方法。
【關鍵詞】：結腸癌 APC IFN-γ ATG5 腸道腺瘤
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R96
【目錄】：

• 中文摘要14-20
• ABSTRACT20-27
• 符號說明27-30
• 前言30-47
• 1 結腸癌綜述31-38
• 1.1 結腸癌的發(fā)病機制31-33
• 1.2 調控結腸癌發(fā)生和發(fā)展的基因33-36
• 1.3 APC基因與結腸癌36-38
• 2 Apc~(Min/+)小鼠模型38-41
• 2.1 Apc~(Min/+)小鼠模型介紹38-39
• 2.2 Apc~(Min/+)小鼠模型的應用39-40
• 2.3 雙基因突變小鼠模型介紹40-41
• 2.4 雙基因突變小鼠模型的建立和應用41
• 3 干擾素-γ基因缺陷與腸道腫瘤41-43
• 3.1 IFN-γ及其受體基因概述41-42
• 3.2 IFN-γ及其受體基因缺陷在腸道腫瘤研究中的意義42-43
• 4 自噬相關基因ATG5缺陷與腸道腫瘤43-47
• 4.1 自噬相關基因ATG5概述43-44
• 4.2 ATG5基因缺陷在腸道腫瘤研究中的意義44-45
• 4.3 ATG5基因缺陷在腸道腫瘤治療中的意義45-47
• 第一部分 干擾素-γ基因缺陷對APC突變所致腸道腫瘤的影響47-81
• 第一節(jié) 內源性干擾素-γ基因缺陷對Apc~(Min/+)小鼠腸道腫瘤的影響47-70
• 1 實驗材料47-54
• 1.1 動物47
• 1.2 試劑47-49
• 1.3 試劑配制49-53
• 1.4 儀器設備53-54
• 2 實驗方法54-60
• 2.1 雙基因缺陷小鼠模型的建立54
• 2.2 雙基因缺陷小鼠基因型鑒定54-56
• 2.3 小鼠腸道腫瘤大小與數(shù)目統(tǒng)計56
• 2.4 小鼠腸道腫瘤組織病理學研究56
• 2.5 使用ELISA法檢測小鼠血清IFN-γ水平56
• 2.6 免疫組化方法檢測小鼠腸道腫瘤組織中免疫分子的表達56-58
• 2.7 使用Western-blotting法檢測腸道腫瘤組織中相關蛋白的表達58-60
• 2.8 數(shù)據處理60
• 3 實驗結果60-67
• 3.1 雜合性IFN-γ缺失促進Apc~(Min/+)小鼠腸道腫瘤的生長60-62
• 3.2 雜合性IFN-γ缺失可以引起Apc~(Min/+)小鼠腸道腫瘤發(fā)生癌變62-63
• 3.3 雜合性IFN-γ缺失降低了血清干擾素-γ水平63-64
• 3.4 雜合性IFN-γ缺失調節(jié)腫瘤微環(huán)境中免疫因子的數(shù)目和分布64-65
• 3.5 雜合性IFN-γ缺失促進Wnt/β-catenin及EGFR/ERK1/2信號通路的活化65-67
• 3.6 雜合性IFN-γ缺失抑制β-catenin的降解67
• 4 討論與結論67-70
• 第二節(jié) 干擾素-γ受體基因缺失對APC突變背景的結腸癌細胞生長的影響70-81
• 1 實驗材料70-73
• 1.1 細胞株70
• 1.2 試劑70-71
• 1.3 試劑配制71-72
• 1.4 儀器設備72-73
• 2 實驗方法73-75
• 2.1 細胞轉染試驗73
• 2.2 MTT法檢測細胞增殖試驗73-74
• 2.3 細胞克隆形成試驗74
• 2.4 Western-blotting法檢測細胞中相關蛋白的表達74
• 2.5 數(shù)據處理74-75
• 3 實驗結果75-79
• 3.1 小干擾RNA有效抑制IFN_γR1蛋白的表達75
• 3.2 HT-29細胞沉默IFN_γR1后對IFN-γ的抑制作用不敏感75-76
• 3.3 MTT法未檢測到IFN_γR1缺陷對人結腸癌細胞HT-29增殖的影響76
• 3.4 IFN_γR1基因缺陷促進HT-29人結腸癌細胞的克隆形成76-77
• 3.5 IFN_γR1基因缺陷促進Wnt/β-catenin和EGFR/ERK1/2信號通路的活化77-78
• 3.6 IFN-γ對HT-29細胞(突變型APC基因)增殖具有顯著抑制作用,而對HCT-116細胞(野生型APC基因)的增殖無明顯抑制作用78-79
• 3.7 IFN-γ抑制HT-29細胞增殖的機制79
• 4 討論與結論79-81
• 第二部分 自噬相關基因ATG5缺陷對APC突變所致腸道腫瘤的影響81-106
• 第一節(jié) 內源性的ATG5基因缺陷對Apc~(Min/+)小鼠腸道腫瘤的影響81-90
• 1 實驗材料81-82
• 1.1 動物81-82
• 1.2 試劑82
• 1.3 試劑配制82
• 1.4 儀器設備82
• 2 實驗方法82-84
• 2.1 雙基因缺陷小鼠模型的建立82-83
• 2.2 雙基因缺陷小鼠基因型鑒定83
• 2.3 小鼠腸道腫瘤大小與數(shù)目統(tǒng)計83
• 2.4 小鼠腸道腫瘤組織病理學研究83
• 2.5 Western-blotting法檢測小鼠腸道腫瘤組織中相關蛋白的表達83
• 2.6 數(shù)據處理83-84
• 3 實驗結果84-88
• 3.1 ATG5基因缺陷可以在一定程度上促進Apc~(Min/+)小鼠腸道腫瘤的生長84-85
• 3.2 ATG5基因缺陷對Apc~(Min/+)小鼠腸道腫瘤的進展無顯著影響85-86
• 3.3 ATG5基因缺陷對細胞自噬水平無顯著影響86
• 3.4 ATG5基因缺陷對細胞凋亡水平無顯著影響86-87
• 3.5 ATG5基因缺陷促進Wnt/β-catenin信號通路的活化87-88
• 3.6 ATG5基因缺陷促進EGFR/Erk1/2信號通路的活化88
• 4 討論與結論88-90
• 第二節(jié) ATG5基因敲除對APC突變背景的結腸癌細胞生長的影響90-95
• 1 實驗材料90-91
• 1.1 細胞株90
• 1.2 試劑90
• 1.3 試劑配制90
• 1.4 儀器設備90-91
• 2 實驗方法91
• 2.1 細胞轉染試驗91
• 2.2 細胞增殖試驗91
• 2.3 細胞克隆形成試驗91
• 2.4 數(shù)據處理91
• 3 實驗結果91-93
• 3.1 ATG5基因缺陷可以顯著抑制人結腸癌細胞HT-29的增殖91-92
• 3.2 ATG5基因缺陷抑制人結腸癌細胞HT-29的克隆形成92-93
• 4 討論與結論93-95
• 第三節(jié) ATG5基因缺陷顯著提高了干擾素-γ對Apc~(Min/+)小鼠腸道腫瘤的抑制作用95-106
• 1 實驗材料95-96
• 1.1 動物95
• 1.2 試劑95-96
• 1.3 試劑配制96
• 1.4 儀器設備96
• 2 實驗方法96-97
• 2.1 小鼠腸道腫瘤大小與數(shù)目統(tǒng)計96
• 2.2 小鼠腸道腫瘤組織病理學研究96-97
• 2.3 小鼠體重和攝食量測定97
• 2.4 小鼠血常規(guī)測定97
• 2.5 Western-blotting法檢測腸道腫瘤組織中相關蛋白的表達97
• 2.6 數(shù)據處理97
• 3 實驗結果97-104
• 3.1 ATG5基因缺陷提高了IFN-γ對Apc~(Min/+)小鼠腸道腫瘤的抑制作用97-100
• 3.2 IFN-γ給藥對小鼠體重無顯著影響100-101
• 3.3 IFN-γ給藥對小鼠攝食量無顯著影響101
• 3.4 IFN-γ給藥不會降低小鼠外周血中白細胞及血小板的數(shù)量101-102
• 3.5 ATG5基因缺陷提高了IFN-γ對Wnt/β-catenin和EGFR/ERK1/2信號的抑制作用102-103
• 3.6 ATG5基因缺陷提高了IFN-γ對β-catenin核轉移的抑制作用103-104
• 4 討論與結論104-106
• 全文總結106-107
• 論文的創(chuàng)新性及意義107
• 論文的不足之處107-108
• 參考文獻108-121
• 致謝121-122
• 攻讀博士學位期間發(fā)表的學術論文122-123
• 代表性論文全文123-146
• 論文1123-131
• 論文2131-140
• 論文3140-146
• 附件146

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據庫 前7條

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本文編號：689079