本文關(guān)鍵詞：FOXC2在腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)并與其他腫瘤標(biāo)記物相關(guān)性研究及其臨床病理意義

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【摘要】：目的：膠質(zhì)瘤是常見(jiàn)的惡性原發(fā)性腦腫瘤,發(fā)病于各個(gè)年齡段。依據(jù)組織學(xué)其可分為低級(jí)別膠質(zhì)瘤(WTO Ⅰ-Ⅱ)和高級(jí)別膠質(zhì)瘤,包括毛細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤(WTOⅠ)、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤(WTO Ⅱ)、星形細(xì)胞瘤(WTO Ⅱ),間變星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤(WTO Ⅲ)和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(WTO Ⅳ)等。雖然目前采用了外科手術(shù)切除輔以放化療、光動(dòng)力學(xué)治療等多種綜合治療手段,膠質(zhì)瘤患者的的預(yù)后和生存期仍無(wú)明顯改善。其中膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者平均生存期僅為15個(gè)月。同時(shí)由于膠質(zhì)瘤容易復(fù)發(fā)和惡性進(jìn)展,因此探討膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制對(duì)于改善患者預(yù)后具有重要意義。叉頭框蛋白C2 (Forkhead box protein C2, FOXC2),也被稱(chēng)為間充質(zhì)叉頭蛋白(mesenchyme fork head protein 1, MFH1)是一種對(duì)血管和淋巴管等脈管系統(tǒng)生長(zhǎng)、發(fā)育起到重要調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄因子。近年來(lái)發(fā)現(xiàn),FOXC2在介導(dǎo)腫瘤上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(mesenchymal transition, EMT)方面發(fā)揮了重要調(diào)控作用,其已經(jīng)被證明在多種腫瘤組織中,包括乳腺癌、宮頸癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、胃癌和非小細(xì)胞肺癌中高表達(dá),與惡性轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。體外研究也發(fā)現(xiàn)抑制FOXC2的表達(dá)能夠抑制其增殖、遷移和侵襲。在食管癌研究中也發(fā)現(xiàn)FOXC2是預(yù)后不良的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。因此FOXC2可能是作為癌基因參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展,同時(shí)FOXC2也可能是一個(gè)潛在的癌癥治療靶點(diǎn)。本研究中,擬采用realtime-PCR、免疫組織化學(xué)染色法、免疫印跡法檢測(cè)FOXC2 mRNA和蛋白水平的表達(dá),及其在膠質(zhì)瘤組織中的定位,分析其臨床病理意義,并研究其與EMT相關(guān)指標(biāo)波形蛋白(Vimentin)、E-鈣粘蛋白(cadherin),以及與血管生成相關(guān)指標(biāo)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、血管內(nèi)皮標(biāo)記物CD34和干細(xì)胞標(biāo)記物CD133之間的關(guān)系。方法：收集河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)外科2007年-2013年手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本85例,所有患者術(shù)前均未接受放化療治療。其中男性49例,女性36例,年齡19-67歲(中位年齡47歲)。依據(jù)2000年WHO中樞神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)瘤分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí),其中低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤Ⅰ級(jí)10例、Ⅱ級(jí)18例,57例為高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤包括Ⅲ級(jí)31例和IV級(jí)26例。每一例手術(shù)提取標(biāo)本一部分經(jīng)液氮速凍后轉(zhuǎn)-80℃保存；其余采用10%福爾馬林固定,石蠟包埋,4μm切片。所有切片均經(jīng)河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院病理科醫(yī)生予以確認(rèn)其腫瘤類(lèi)型、分類(lèi)和級(jí)別,以其癌旁組織作為對(duì)照。采用realtime-PCR檢測(cè)FOXC2的mRNA表達(dá)水平,分析其與臨床病理參數(shù)(性別、年齡、KPS評(píng)分和腫瘤級(jí)別)的相關(guān)性以及對(duì)預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)FOXC2、 Vimentin、E-cadherin、VEGF、CD34(微血管密度)、CD133的定位與表達(dá),并分析其病理意義和相關(guān)性。所有資料應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：1在85例腦膠質(zhì)瘤樣本及其配對(duì)的癌旁腦組織中,FOXC2 mRNA表達(dá)水平在膠質(zhì)瘤組中為9.2±3.8,顯著高于癌旁腦組織的4.7±2.8,經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。進(jìn)一步分析顯示,在高級(jí)別(WTO Ⅲ-Ⅳ級(jí))腦膠質(zhì)瘤樣本中FOXC2 mRNA相對(duì)表達(dá)水平位10.8±3.5,而在低級(jí)別(WTO Ⅰ-Ⅱ級(jí))腦膠質(zhì)樣本中相對(duì)表達(dá)水平位5.9±1.8,與癌旁組相比差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000；P=0.029),且高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組與低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組比較差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。FOXC2 mRNA表達(dá)水平與年齡和性別無(wú)關(guān)。KPS評(píng)分(Karnofsky Performance Score)大于70分的有10例FOXC2 mRNA水平高表達(dá),占28.6%,而71.4%的共23例樣本其FOXC2 mRNA水平低表達(dá)；在KPS評(píng)分低于70分亞組中,32例FOXC2 mRNA表達(dá)水平高占64.0%,而18例表達(dá)水平下調(diào)占36.0%,經(jīng)χ(2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χχ2=9.030,P=0.033)。在低級(jí)別(I-II級(jí))腦膠質(zhì)瘤亞組中,28例樣本中有5例FOXC2 mRNA高表達(dá)占17.9%,而23例其mRNA表達(dá)水平較低占82.1%；在高級(jí)別(Ε-Ⅳ級(jí))腦膠質(zhì)瘤亞組中,57例樣本中有37例FOXC2 mRNA表達(dá)水平較高占64.9%,而低表達(dá)為20例占35.1%,經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χχ2=16.632,P=0.000)。FOXC2高表達(dá)亞組的平均生存周期為28.8個(gè)月,而FOXC2低表達(dá)亞組的平均生存周期為37.2個(gè)月,兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.017)。在進(jìn)展期腦膠質(zhì)瘤(WHOⅢ-Ⅳ級(jí))患者中,FOXC2高表達(dá)亞組與低表達(dá)亞組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.005)。Cox回歸分析顯示FOXC2過(guò)表達(dá)是綜合生存期獨(dú)立的預(yù)測(cè)因子(HR=5.27, CI=2.57-9.73, P=0.006)。2 FOXC2在腦膠質(zhì)瘤中陽(yáng)性表達(dá)率為49.41%(42/85),而在對(duì)照組中為5.88%(5/85)。腦膠質(zhì)瘤中的FOXC2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于對(duì)照組,兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=40.258, P-0.000)。 Vimentin在85例癌旁組樣本中,有6例陽(yáng)性,陽(yáng)性率為7.06%,而在腦膠質(zhì)瘤組中陽(yáng)性表達(dá)為62例,陽(yáng)性表達(dá)率為72.94%,經(jīng)χχ2檢驗(yàn)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=76.863, P=0.000)。E-cadherin在85例癌旁組織樣本中,E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)率為64.71%(55/85),而在85例膠質(zhì)瘤中陽(yáng)性表達(dá)18例,陽(yáng)性表達(dá)率為21.18%,經(jīng)χχ2檢驗(yàn)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=32.867,P=0.000)。免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果顯示,癌旁組、膠質(zhì)瘤低級(jí)別組和膠質(zhì)瘤高級(jí)別組FOXC2蛋白相對(duì)表達(dá)水平分別為0±0、0.18±0.04和0.87±0.24,膠質(zhì)瘤低級(jí)別組、高級(jí)別組與癌旁組比較,以及膠質(zhì)瘤低級(jí)別組與高級(jí)別組比較,經(jīng)方差分析差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=47.707,P0.05)。在低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組Vimentin蛋白相對(duì)表達(dá)水平為0.54±0.19,而在高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中為1.32±0.15,均顯著高于癌旁組的0±0,且高級(jí)別組顯著高于低級(jí)別組,經(jīng)方差分析,兩兩比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F-89.624, P 0.05)。E-cadherin在癌旁組的蛋白相對(duì)表達(dá)水平為0.81±0.21,顯著高于膠質(zhì)瘤低級(jí)別組的0.35±0.14和膠質(zhì)瘤高級(jí)別組的0.31±0.13,經(jīng)方差分析,兩兩比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=10.831,P0.05),而低級(jí)別組與高級(jí)別組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。FOXC2、Vimentin和E-cadherin蛋白在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)與患者性別、年齡無(wú)關(guān)(P0.05)。FOXC2在KPS評(píng)分低于70分亞組中FOXC2陽(yáng)性表達(dá)率為60.00%(30/50),顯著高于KPS評(píng)分超過(guò)70分的34.29%(12/35),經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.446,P=0.020)；在28例低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中FOXC2陽(yáng)性表達(dá)9例,陽(yáng)性表達(dá)率為32.14%,而在57例高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中FOXC2陽(yáng)性表達(dá)33例,陽(yáng)性表達(dá)率為57.89%,經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.981, P=0.026); Vimentin在KPS評(píng)分低于70分亞組中Vimentin陽(yáng)性表達(dá)率為84.00%(4.2/50),顯著高于評(píng)分超過(guò)70分的57.14%(20/35),經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.524,P=0.006)；在28例低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中Vimentin陽(yáng)性表達(dá)11例,陽(yáng)性表達(dá)率為39.29%,而在57例高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中Vimentin陽(yáng)性表達(dá)51例,陽(yáng)性表達(dá)率為89.47%,經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=23.932, P=0.000)。E-cadheirn在KPS評(píng)分低于70分亞組中E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)率為8.00%(4/50),顯著低于評(píng)分超過(guò)70分的40.00%(14/35),經(jīng)χ檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ(2=12.630,P=0.000)；在28例低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)15例,陽(yáng)性表達(dá)率為53.57%,而在57例高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)3例,陽(yáng)性表達(dá)率為5.26%,經(jīng)χχ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ(2=4.981,P=0.026)在腦膠質(zhì)瘤樣本中,FOXC2和Vimentin陽(yáng)性共表達(dá)為38例,二者呈正相關(guān)(r=0.390,P=0.000)；而FOXC2與E-cadherin呈負(fù)相關(guān)(r=-0.339,P=0.001)。3在腦膠質(zhì)瘤組中VEGF-A的陽(yáng)性表達(dá)率為76.47%(65/85),而在配對(duì)癌旁組織中陽(yáng)性表達(dá)率為21.18%(18/85),經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=52.005,P=0.000)。在85例癌旁組樣本中,其微血管密度為10.26±5.29,而在腦膠質(zhì)瘤組中微血管密度為43.62±14.38,經(jīng)t檢驗(yàn)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.389,P=0.022)在85例癌旁組織樣本中,CD133陽(yáng)性表達(dá)率為2.35%(2/85),而在85例膠質(zhì)瘤中陽(yáng)性表達(dá)46例,陽(yáng)性表達(dá)率為54.12%,經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χχ2=56.202,P=0.000)。VEGF-A. MVD和CD133在膠質(zhì)瘤組中的表達(dá)與年齡、性別無(wú)關(guān)。在KPS評(píng)分低于70分亞組中VEGF-A陽(yáng)性表達(dá)率為86.00%(43/50),顯著高于評(píng)分超過(guò)70分的62.86%(22/35),經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χχ2=6.128,P=0.013)；在28例低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中VEGF-A陽(yáng)性表達(dá)17例,陽(yáng)性表達(dá)率為60.71%,而在57例高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中VEGF-A陽(yáng)性表達(dá)48例,陽(yáng)性表達(dá)率為84.21%,經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.761, P=0.016); KPS評(píng)分低于70分亞組為微血管密度為50.18±16.76,顯著高于KPS評(píng)分超過(guò)70分的28.24+8.47,經(jīng)t檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.915,P=0.000)；在低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中微血管密度為30.44±7.25,而高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中為47.29±15.62,經(jīng)t檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.642,P=0.000)；KPS評(píng)分低于70分亞組中CD133陽(yáng)性表達(dá)率為64.00%(32/50),顯著高于評(píng)分超過(guò)70分的40.00%(14/35),經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.776,P=0.029)；在28例低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中CD133陽(yáng)性表達(dá)6例,陽(yáng)性表達(dá)率為21.43%,而在57例高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組中CD133陽(yáng)性表達(dá)40例,陽(yáng)性表達(dá)率為70.18%,經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=17.969,P=0.000)。在腦膠質(zhì)瘤樣本中,FOXC2與VEGF-A陽(yáng)性共表達(dá)為40例,二者呈正相關(guān)(r=0.437,P=0.000)；而FOXC2與CD133陽(yáng)性共表達(dá)32例,呈正相關(guān)(r=0.344,P=0.002)結(jié)論：1 FOXC2在膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展中起到了重要的調(diào)控作用,其可作為膠質(zhì)瘤進(jìn)展和預(yù)后的一個(gè)預(yù)測(cè)指標(biāo)。2 FOXC2可能通過(guò)促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞發(fā)生EMT,誘導(dǎo)腫瘤相關(guān)血管形成促進(jìn)膠質(zhì)瘤的進(jìn)展。
【關(guān)鍵詞】：FOXC2 膠質(zhì)瘤 轉(zhuǎn)錄因子 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化 血管生成
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R739.41
【目錄】：

• 摘要5-10
• ABSTRACT10-15
• 英文縮寫(xiě)15-17
• 引言17-19
• 第一部分 FOXC2 mRNA在腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)及其臨床病理意義19-35
• 前言19
• 材料與方法19-26
• 結(jié)果26-29
• 附圖29-31
• 附表31-32
• 討論32-33
• 小結(jié)33-34
• 參考文獻(xiàn)34-35
• 第二部分 FOXC2和Vimentin、E-cadherin蛋白在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其臨床病理意義35-58
• 前言35-36
• 材料與方法36-41
• 結(jié)果41-44
• 附圖44-48
• 附表48-52
• 討論52-54
• 小結(jié)54
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 第三部分 VEGF-A、CD34和CD133在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其臨床意義58-77
• 前言58
• 材料與方法58-60
• 結(jié)果60-63
• 附圖63-66
• 附表66-70
• 討論70-73
• 小結(jié)73
• 參考文獻(xiàn)73-77
• 結(jié)論77-78
• 綜述一 FOXC2的生物學(xué)作用研究進(jìn)展78-91
• 參考文獻(xiàn)85-91
• 綜述二 膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制研究進(jìn)展91-107
• 參考文獻(xiàn)99-107
• 致謝107-109
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷109-110

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 戴俊;王錦玉;楊麗麗;肖穎;瞿智玲;秦生輝;阮秋蓉;;Correlation of Forkhead Box c2 with Subtypes and Invasive Ability of Invasive Breast Cancer[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2014年06期

2 Ferenc Sipos;Orsolya Galamb;;Epithelial-to-mesenchymal and mesenchymal-to-epithelial transitions in the colon[J];World Journal of Gastroenterology;2012年07期

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本文編號(hào)：689314