本文關(guān)鍵詞：脊髓α7nAChRs在瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏中的作用及其機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 瑞芬太尼 痛覺(jué)過(guò)敏 α7nAChRs α7nAChR 膠質(zhì)細(xì)胞 促炎性因子 NMDA BDNF

【摘要】：第一部分瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏及激活脊髓α 7nAChRs對(duì)瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏行為學(xué)的影響對(duì)于急性慢性疼痛的治療,阿片類藥物目前仍是最為主要的治療措施。靜脈內(nèi)注射阿片受體激動(dòng)劑,如芬太尼、阿芬太尼、舒芬太尼、瑞芬太尼等是日常手術(shù)麻醉過(guò)程中最常用的鎮(zhèn)痛方式,其在手術(shù)麻醉的維持中占主導(dǎo)地位。臨床使用此類藥物的過(guò)程中發(fā)現(xiàn),停用阿片類藥物后會(huì)使得患者出現(xiàn)痛覺(jué)過(guò)敏。此種痛覺(jué)過(guò)敏不僅增加了術(shù)后鎮(zhèn)痛藥物的用量,而且加重了患者術(shù)后不適并影響患者的術(shù)后恢復(fù)。阿片藥物所誘發(fā)的痛覺(jué)過(guò)敏OIH(opioid-induced hyperalgesia)是指暴露于阿片藥物的患者出現(xiàn)一種以痛閾降低及對(duì)正常刺激的過(guò)激反應(yīng)為特點(diǎn)的感覺(jué)異�，F(xiàn)象。瑞芬太尼作為超短效μ阿片受體激動(dòng)劑,具有鎮(zhèn)痛作用強(qiáng),起效快、作用時(shí)間短、消除迅速、連續(xù)輸注無(wú)蓄積,代謝不依賴于肝腎功能的特點(diǎn),在臨床麻醉中應(yīng)用廣泛。但是對(duì)臨床應(yīng)用瑞芬太尼的研究發(fā)現(xiàn),瑞芬太尼在提供良好的鎮(zhèn)痛效果的同時(shí),可誘發(fā)停用后的患者痛覺(jué)過(guò)敏。且其超短效的藥理學(xué)特性,使瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏加重了患者不適,影響患者術(shù)后康復(fù),限制了該藥在臨床的應(yīng)用。對(duì)于瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏的研究表明,其發(fā)生與多種機(jī)制及信號(hào)傳導(dǎo)通路有關(guān),但是其確切的發(fā)生機(jī)制仍未闡明。α7亞型乙酰膽堿受體(α7nAChRs)可介導(dǎo)中樞及外周神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的免疫反應(yīng)。對(duì)中樞及外周神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn),α7nAChRs激動(dòng)劑能夠明顯降低神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞促炎性產(chǎn)物的生成。在炎性疼痛及神經(jīng)病理性疼痛中,激活α7nAChRs可降低此類動(dòng)物模型的痛覺(jué)過(guò)敏現(xiàn)象。但α7nAChRs在阿片類藥物所致的痛覺(jué)過(guò)敏中的作用仍未見(jiàn)有相關(guān)報(bào)道。在本實(shí)驗(yàn)中,我們采用Brennan法,制備標(biāo)準(zhǔn)大鼠切口痛模型。在模型制備的過(guò)程中,皮下泵注瑞芬太尼40μg/kg,輸注時(shí)間為30min,制備瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏模型。通過(guò)鞘內(nèi)注射α7nAChRs的激動(dòng)劑及變構(gòu)激活劑,探討脊髓α7nAChRs激活對(duì)瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏的影響。對(duì)痛行為學(xué)的評(píng)定我們采用兩種方式,即大鼠機(jī)械縮足反射閾值(Paw Withdrawal Mechanical Threshold, PWMT))和大鼠熱縮足潛伏期(Paw Withdrawal Thermal Latency, PWTL)。對(duì)瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏行為學(xué)的測(cè)定在分別在術(shù)前24h(基礎(chǔ)值),術(shù)后的2h,6h,24h,48h進(jìn)行。α7nAChRs激動(dòng)劑與變構(gòu)激活劑的注射時(shí)間選在瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏較為穩(wěn)定的術(shù)后24h,并在注射后0.5h,1h,2h,4h,6h檢測(cè)行為學(xué)變化。結(jié)果顯示1、術(shù)中泵注瑞芬太尼可誘發(fā)顯著的術(shù)后痛覺(jué)過(guò)敏；2、α7nAChRs激動(dòng)劑(PHA-543613)及Ⅱ型變構(gòu)激活劑(PNU-120596)可劑量依賴性抑制瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏,但Ⅰ型變構(gòu)激活劑(NS-1738)則無(wú)此效應(yīng)；3、PHA-543613和PNU-120596的鎮(zhèn)痛作用可被α7nAChRs拮抗劑MLA阻斷；4、亞鎮(zhèn)痛劑量的α7nAChRs激動(dòng)劑及Ⅱ型變構(gòu)激活劑聯(lián)合注射亦可抑制瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏。綜上所述,本實(shí)驗(yàn)采用切口痛模型制作過(guò)程中泵注瑞芬太尼制備瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏模型,并首次研究了脊髓α7nAChRs的激活對(duì)瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏的作用。結(jié)果表明,α7nAChRs激動(dòng)劑和Ⅱ型變構(gòu)激活劑及兩者的聯(lián)用可抑制瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏,但Ⅰ型變構(gòu)激活劑無(wú)此效應(yīng)。本研究為尋找并確定治療瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏藥物作用靶點(diǎn)提供了新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。第二部分脊髓α 7nAChRs激活抑制瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏機(jī)制的研究疼痛是由于外圍到大腦皮層感通路可塑性的變化所引起,中樞及外周的免疫細(xì)胞均在此過(guò)程中發(fā)揮著重要作用,參與了疼痛的發(fā)生及維持。脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)重要的免疫相關(guān)細(xì)胞,激活的膠質(zhì)細(xì)胞及其釋放的促炎性產(chǎn)物目前被認(rèn)為是疼痛過(guò)程中參與疼痛維持的重要因素。因此,對(duì)激活的膠質(zhì)細(xì)胞及其促炎性反應(yīng)產(chǎn)物的抑制可作為治療疼痛的靶點(diǎn)。脊髓水平α7nAChRs在星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)。研究顯示,通過(guò)激活α7nAChRs,可以下調(diào)促炎性因子的合成,在多種疼痛模型中產(chǎn)生明顯的抗傷害效應(yīng)。結(jié)合課題組之前對(duì)于促炎性因子在瑞芬痛覺(jué)過(guò)敏中作用的研究,提示激活脊髓α7nAChRs可能通過(guò)抑制小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞以及膠質(zhì)細(xì)胞源性的多種細(xì)胞因子而產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用。在痛覺(jué)敏化形成以及維持的過(guò)程中,突觸傳遞的興奮性傳導(dǎo)通路增強(qiáng)是其中重要的組成部分。大量的研究證明,N-甲基-D-天冬氨酸受體(NMDA受體)在興奮性突觸中傳遞過(guò)程中發(fā)揮核心作用。阿片類藥物所誘發(fā)的痛覺(jué)過(guò)敏與脊髓水平NMDA受體過(guò)度激活密切相關(guān)。我們團(tuán)隊(duì)的前期研究發(fā)現(xiàn),瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏可增加脊髓水平酪氨酸磷酸化NR2B(功能型NMDA受體亞基)的表達(dá)。脊髓α7nAChRs的激活能否通過(guò)減弱酪氨酸磷酸化NR2B的表達(dá),抑制興奮性傳導(dǎo)通路增強(qiáng),從而緩解瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏,仍未見(jiàn)有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。疼痛產(chǎn)生及維持的過(guò)程中,興奮性通路增強(qiáng)的同時(shí),抑制性通路的減弱也參與了痛覺(jué)敏化的過(guò)程。中樞神經(jīng)元的突觸抑制是通過(guò)Y-氨基丁酸(GABA)和甘氨酸(Gly)介導(dǎo)。GABAAR和GlyR通過(guò)通透陰離子,如氯離子(Cl-)和碳酸氫根離子(HCO3-),發(fā)揮抑制性作用。神經(jīng)元氯離子的穩(wěn)態(tài)是通過(guò)K+-Cl-協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(KCC2)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)以維持。KCC2將Cl-順著K+的濃度梯度移出細(xì)胞外,從而保持細(xì)胞內(nèi)較低的Cl-濃度,這是GABAAR和GlyR發(fā)揮抑制性效應(yīng)的先決條件。脊髓膠質(zhì)細(xì)胞激活后釋放的腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF),通過(guò)結(jié)合神經(jīng)元受體酪氨酸受體激酶B (TrkB)快速下調(diào)KCC2的表達(dá),從而減少C1-的胞內(nèi)向胞外轉(zhuǎn)運(yùn),消弱GABAAR和GlyR的抑制性作用。這些結(jié)果提示,激活脊髓α7nAChRs可能通過(guò)抑制BDNF-TrkB信號(hào)通路,增強(qiáng)抑制性通路的活性,從而緩解瑞芬太尼術(shù)后痛覺(jué)過(guò)敏。因此,結(jié)合第一部分行為學(xué)結(jié)果,本部分實(shí)驗(yàn)研究α7nAChRs激動(dòng)劑及Ⅱ型正性變構(gòu)激活劑(Positive allosteric modulator, PAMs)抑制瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏作用機(jī)制。通過(guò)三個(gè)方面：1、α7nAChRs激動(dòng)劑及Ⅱ型PAMs對(duì)瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏中脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞及促炎性產(chǎn)物的影響；2、α7nAChRs激動(dòng)劑及Ⅱ型PAMs對(duì)瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏中脊髓絡(luò)氨酸磷酸化NR2B (p-NR2B)的影響；3、α7nAChRs激動(dòng)劑及Ⅱ型PAMs對(duì)瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏中脊髓BDNF的影響。分別闡明激活脊髓α7nAChRs后,膽堿能抗炎通路,興奮性傳遞通路,抑制性傳遞通路的改變?cè)谝种迫鸱彝从X(jué)過(guò)敏中的作用。結(jié)果表明,激活脊髓α7nAChRs可顯著降低小膠質(zhì)細(xì)胞,星形膠質(zhì)細(xì)胞,腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素-6(interleukin-6, IL-6)及p-NR2B和BDNF的表達(dá)。綜上所述,本實(shí)驗(yàn)首次研究并報(bào)道了激活脊髓α7nAChRs抑制瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏的可能機(jī)制。研究顯示,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及促炎性因子的減弱,興奮性傳導(dǎo)通路的抑制,抑制性傳導(dǎo)通路的增強(qiáng),這些機(jī)制均參與了激活脊髓α7nAChRs對(duì)瑞芬太尼痛覺(jué)的抑制作用。這一結(jié)果為尋找合理防治瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏的方案提供了新的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：瑞芬太尼 痛覺(jué)過(guò)敏 α7nAChRs α7nAChR 膠質(zhì)細(xì)胞 促炎性因子 NMDA BDNF
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R614
【目錄】：

• 縮略詞表5-7
• 中文摘要7-11
• 英文摘要11-17
• 第一部分 瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏及激活脊髓α7nAChRs對(duì)瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏行為學(xué)的影響17-45
• 前言17-26
• 參考文獻(xiàn)20-26
• 材料和方法26-39
• 討論39-42
• 參考文獻(xiàn)42-44
• 結(jié)論44-45
• 第二部分 脊髓α7nAChRs激活抑制瑞芬太尼痛覺(jué)過(guò)敏機(jī)制的研究45-82
• 前言45-56
• 參考文獻(xiàn)49-56
• 材料和方法56-72
• 討論72-75
• 參考文獻(xiàn)75-81
• 結(jié)論81-82
• 文獻(xiàn)綜述82-111
• 參考文獻(xiàn)96-111
• 附錄111-114
• 致謝114

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李娜;程晉成;齊一龍;張文娟;孫靈迪;邵先安;;急性顱腦損傷患者血清和腦脊液白細(xì)胞介素-1β表達(dá)的意義[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2013年23期

2 王康樂(lè);簡(jiǎn)道林;;膽堿能抗炎通路疼痛調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年27期

3 尹小虎;蔣永亮;趙曉蕓;方劍喬;;神經(jīng)病理性疼痛的臨床治療進(jìn)展[J];廣西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2013年04期

4 羅妮;鄭衛(wèi)紅;李余星;;神經(jīng)病理性疼痛機(jī)制的研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué);2015年01期

5 姚志華;裘敏蕾;樊天佑;;炎癥細(xì)胞因子在骨性關(guān)節(jié)炎疼痛中的作用機(jī)制[J];中國(guó)骨與關(guān)節(jié)雜志;2014年05期

6 王利軍;;帕瑞昔布鈉抑制鼻內(nèi)鏡術(shù)后早期急性疼痛的臨床觀察[J];河北醫(yī)藥;2013年21期

7 鄧北強(qiáng);牟楊;趙義剛;鄧文平;;頸椎病中疼痛患者血清細(xì)胞因子表達(dá)與其疼痛的相關(guān)性研究[J];頸腰痛雜志;2013年05期

8 陳巍;陳前波;嚴(yán)曉娣;周雙瓊;袁紅斌;孫彭齡;;鞘內(nèi)注射氫水對(duì)病理性疼痛大鼠脊髓背角p38MAPK和TNF-α影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];臨床軍醫(yī)雜志;2013年11期

9 王翠翠;劉曉紅;曹永成;畢利泉;耿明;;小膠質(zhì)細(xì)胞在兔減壓病脊髓損傷中的作用[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2014年03期

10 張惷;龍超;黎逢球;董文理;廖衛(wèi)寧;;氫嗎啡酮預(yù)防瑞芬太尼復(fù)合麻醉患者術(shù)后痛覺(jué)過(guò)敏的臨床效果[J];臨床麻醉學(xué)雜志;2014年10期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫雅潔;水通道4在神經(jīng)病理性疼痛中的作用及可能機(jī)制[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2013年

2 朱小燕;p300介導(dǎo)調(diào)控神經(jīng)病理性疼痛因子COX-2的表觀遺傳學(xué)研究[D];中南大學(xué);2013年

3 陳彥文;功能性消化不良上腹痛綜合征的腦區(qū)活動(dòng)及其影響因素[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

4 朱槞槞;頻率和時(shí)間模式依賴的海馬突觸可塑性及其機(jī)制研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2012年

5 許丹;梔子苷的提取分離及藥物調(diào)控神經(jīng)病理性疼痛的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2014年

6 馬延超;ERK1/2信號(hào)通路調(diào)控成年大鼠脊髓損傷后谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體GLAST和GLT-1表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2014年

7 劉岳鵬;脊髓ephrinB-EphB信號(hào)通路在慢性疼痛和嗎啡耐受/戒斷中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 潘志遠(yuǎn);膽堿和阿司匹林協(xié)同抗炎作用及其藥理學(xué)機(jī)制的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2014年

9 劉靖芷;背根神經(jīng)節(jié)脈沖射頻對(duì)CCI和炎性痛大鼠的作用及對(duì)帶狀皰疹后神經(jīng)痛患者的療效及安全性[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

10 孫亞男;實(shí)驗(yàn)性血管性認(rèn)知障礙關(guān)于膽堿能機(jī)制的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李建民;內(nèi)源性大麻素配體2-AG在大鼠脊髓水平的鎮(zhèn)痛機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：682342