本文關(guān)鍵詞：C5L2基因和C5aR1基因與冠心病的關(guān)聯(lián)分析及臨床預(yù)后研究

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【摘要】：目的:(1)采用聚合酶鏈反應(yīng)-直接測序法在在新疆漢族、維吾爾族冠心病患者中檢測C5L2基因和C5a R1基因新的突變位點(diǎn)。(2)探討C5L2基因新的突變位點(diǎn)及標(biāo)簽SNP位點(diǎn)基因多態(tài)性與新疆漢族及維吾爾族冠心病的相關(guān)性研究及其危險(xiǎn)因素,C5L2基因不同基因型和冠心病PCI術(shù)后患者預(yù)后的關(guān)系;(3)探討根據(jù)C5a R1基因新的突變位點(diǎn)及標(biāo)簽SNP位點(diǎn)與新疆漢族及維吾爾族冠心病及其危險(xiǎn)因素的關(guān)系,進(jìn)一步探討C5a R1基因不同基因型和冠心病PCI術(shù)后患者預(yù)后的關(guān)系;方法:(1)采用聚合酶鏈反應(yīng)-直接測序法選擇經(jīng)冠狀動脈造影檢查明確診斷為冠心病患者96例,其中包括維吾爾族48例和漢族48例;在C5a R1基因以及C5L2基因啟動子區(qū)和編碼區(qū)進(jìn)行擴(kuò)增,并利用DNAMan軟件和Chromas軟件做測序結(jié)果與下砸序列的對比,將發(fā)現(xiàn)的SNP位點(diǎn)在人類基因組數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行了比對,如在Hap Map數(shù)據(jù)庫、NCBI/SNP數(shù)據(jù)庫以及日本基因組數(shù)據(jù)庫中均沒有發(fā)現(xiàn)此SNP位點(diǎn),所以將我們新發(fā)現(xiàn)的SNP位點(diǎn)認(rèn)定為新的SNP位點(diǎn)。(2)采用病例-對照研究的方法,選擇經(jīng)冠脈造影檢查確診的冠心病患者1364例和性別、年齡、民族均匹配的正常健康對照人群1589例,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法對C5L2基因新的突變位點(diǎn)以及標(biāo)簽SNP進(jìn)行基因分型,分析C5L2基因新的突變位點(diǎn)以及標(biāo)簽SNPs和冠心病的相關(guān)性關(guān)系;采用隊(duì)列研究的方法,入選經(jīng)皮冠狀動脈內(nèi)支架植入(PCI)術(shù)后患者397例,采用限制性片段長度多態(tài)性方法對其進(jìn)行C5L2基因型檢測,對其進(jìn)行為期1年的隨訪,觀察人群術(shù)后支架內(nèi)血栓、非致死性心肌梗死、總死亡以及出血事件的發(fā)生率之間的差異;(3)采用病例-對照研究,病例及對照組同第二部分,對C5a R1基因進(jìn)行分型,分析C5a R1基因新的突變位點(diǎn)以及標(biāo)簽SNPs和冠心病的關(guān)系。對冠心病組不同基因型進(jìn)行為期一年隨訪,觀察不同基因型與冠心病預(yù)后關(guān)系。結(jié)果:(1)在C5L2基因第二外顯子區(qū)發(fā)現(xiàn)新的突變位點(diǎn)2個(gè),分別是754CA和602GA,分別使得在199位置上的GCG轉(zhuǎn)變?yōu)镚CA和248位置上的CCC置換為CCA。但是這兩個(gè)突變位點(diǎn)的改變均未引起氨基酸的改變屬于同義突變。在C5a R1基因第2外顯子區(qū)也檢測到了一個(gè)新的突變位點(diǎn),發(fā)生547GA置換,使得在183位置上GCC置換為ACC,導(dǎo)致丙氨酸置換為蘇氨酸(A183T)屬于錯(cuò)義突變。2)C5L2基因754CA位點(diǎn)的變異與新疆維吾爾族冠心病發(fā)生有關(guān)聯(lián),754CA突變攜帶CC基因型者發(fā)生冠心病的風(fēng)險(xiǎn)增加,且冠脈血管病變較嚴(yán)重。C5L2基因的標(biāo)簽SNP位點(diǎn)(rs2972607和rs8112962)與冠心病的發(fā)病具有相關(guān)性,rs2972607的相加模型(AG vs AA+GG)和rs8112962的相加模型(CT vs TT+CC)在漢族人群中均與冠心病具有相關(guān)性(P值分別為0.009和0.005)。去除混雜因素后仍具有相關(guān)性(OR=1.489,95%confidence interval[CI]:1.082~2.050,P=0.015和OR=1.556 95%CI:1.111~2.207,P=0.010)。(3)C5a R1基因547GA位點(diǎn)多態(tài)性與新疆地區(qū)漢族及維族人群冠心病的發(fā)病存在一定的關(guān)聯(lián)性,漢族人群純合子突變AA基因型攜帶者發(fā)生冠心病的風(fēng)險(xiǎn)顯著增加,維族人群純合子突變TT基因型攜帶者發(fā)生冠心病的風(fēng)險(xiǎn)較低。新疆地區(qū)漢族人群C5a R1基因547GA不同基因型間心血管不良事件發(fā)生率有顯著差異,純合突變基因型TT患者發(fā)生心血管不良事件發(fā)生率明顯高于其他兩種基因型攜帶者。維族人群中,C5a R1基因547GA多態(tài)性與冠心病預(yù)后沒有相關(guān)性。結(jié)論:(1)直接測序法在C5L2基因和C5a R1基因第二外顯子區(qū)進(jìn)行測序,我們在C5L2基因位于第2外顯子區(qū)檢測到兩個(gè)新的突變位點(diǎn)和C5a R1基因1個(gè)新的突變位點(diǎn)。(2)C5L2基因新的突變位點(diǎn)多態(tài)性與新疆維漢族及維吾爾族冠心病發(fā)生有關(guān)聯(lián),且與冠脈血管病變程度有關(guān);(3)C5a R1基因547GA多態(tài)性與新疆地區(qū)漢族及維族人群冠心病的發(fā)病存在一定的關(guān)聯(lián)性,漢族人群中攜帶AA突變基因型者發(fā)生心血管不良事件風(fēng)險(xiǎn)增加。
【關(guān)鍵詞】：直接測序法 C5L2基因 C5aR1基因 單核苷酸位點(diǎn)多態(tài)性 冠狀動脈粥樣硬化性心臟病
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R541.4
【目錄】：

• 摘要8-10
• ABSTRACT10-13
• 前言13-20
• 第一部分20-35
• 1. 研究內(nèi)容與方法20-28
• 1.1 研究對象20-21
• 1.2 內(nèi)容與方法21-26
• 1.3 質(zhì)量控制26-28
• 2. 結(jié)果28-31
• 3. 討論31-34
• 4. 小結(jié)34-35
• 第二部分35-71
• 1. 研究內(nèi)容與方法36-45
• 1.1 研究對象36-37
• 1.2 主要材料和試劑配制方法37-39
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法39-43
• 1.4 隨訪及臨床終點(diǎn)判定43
• 1.5 質(zhì)量控制43-44
• 1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析44-45
• 2. 結(jié)果45-63
• 3. 討論63-70
• 4. 小結(jié)70-71
• 第三部分71-107
• 1. 研究內(nèi)容與方法72-75
• 1.1 研究對象72-73
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法73-74
• 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析74-75
• 2. 結(jié)果75-99
• 3. 討論99-106
• 4. 小結(jié)106-107
• 結(jié)論107-108
• 致謝108-109
• 參考文獻(xiàn)109-127
• 綜述127-133
• 參考文獻(xiàn)130-133
• 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文133-134
• 個(gè)人簡歷134-135
• 導(dǎo)師評閱表135

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉永銘,嚴(yán)祥,劉艷英;補(bǔ)體與動脈粥樣硬化[J];中華心血管病雜志;2005年09期

2 吳錫桂;我國人群冠心病流行現(xiàn)況與趨勢[J];中國慢性病預(yù)防與控制;2003年04期

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本文編號：645299