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中藥西紅花烘干工藝及有效成分的提取工藝和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-07-17 15:10

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【摘要】:中藥西紅花在醫(yī)藥、化妝品、食品等領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用,需求量較大。但在西紅花采收過程中,卻一直存在烘干工藝標(biāo)準(zhǔn)不一;原料提取工藝研究薄弱以及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不明確等問題。本論文進(jìn)行了西紅花多種烘干、提取工藝比較和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究,為建立統(tǒng)一的烘干標(biāo)準(zhǔn)、高效的提取工藝和篩選主要活性成分提供參考,具體內(nèi)容如下:(1)為了比較烘干工藝對(duì)西紅花化學(xué)成分的影響,檢測(cè)手段十分重要,本論文采用UPLC-ESI-TOF MS/MS技術(shù)定性鑒別了西紅花原料中的包括西紅花苷類、西紅花苦苷及其類似物、黃酮類等14種主要化學(xué)成分;采用HPLC-DAD技術(shù)定量測(cè)定了其中5種西紅花苷類和1種西紅花苦苷的含量。基于此兩種分析結(jié)果,本文研究了普通烘箱烘干法、真空烘干法、冷凍烘干和微波烘干法對(duì)西紅花中主要化學(xué)成分含量的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)微波干燥法具有烘干時(shí)間短、原料中化學(xué)成分高等優(yōu)勢(shì),并通過對(duì)烘干功率和時(shí)間考察,發(fā)現(xiàn)在功率為中火的條件下,微波干燥8min時(shí),西紅花中Picrocrocin、trans-4-GG、trans-3-Gg、trans-2-gg和cis-4-GG等5種化合物的含量最高,分別可達(dá)到22.46%、23.18%、8.49%、1.82%和1.86%。(2)本論文采用響應(yīng)面優(yōu)化法建立了西紅花總苷的超聲提取工藝,以乙醇為提取溶劑,最佳工藝為:料液比為1mg/m L,乙醇體積分?jǐn)?shù)41%,提取溫度為40℃和提取時(shí)間29min。以HP-β-環(huán)糊精水溶液為提取溶劑的較佳提取工藝為提取溫度為50℃、提取時(shí)間為40min、料液比為1mg/m L,HP-β-環(huán)糊精的濃度為2%。兩種方法對(duì)西紅花總苷的提取率分別為18.51%和18.08%,相差2.38%,說(shuō)明采用HP-β-環(huán)糊精水溶液可替代乙醇溶液作為西紅花總苷的提取溶劑。并且,采用閃式提取法建立西紅花總苷的提取工藝,經(jīng)過工藝優(yōu)化,較佳的提取工藝為提取電壓111.2V、提取時(shí)間40s、乙醇濃度70%、提取溫度57℃和液料比1mg/m L,在此條件下,西紅花總苷提取率為22.76%,提取率遠(yuǎn)高于超聲提取法,并且具有提取時(shí)間短等優(yōu)勢(shì)。此外,本論文還采用分子印跡法建立西紅花中山奈酚的提取工藝,較佳的工藝條件為以濾紙作為分子印跡聚合物的支撐材料,山奈酚為模板分子,丙烯酰胺(AM)為功能單體,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)為交聯(lián)劑,偶氮異二丁腈(AIBN)為引發(fā)劑,四氫呋喃為致孔劑,醋酸纖維素酯為粘合劑,在模板分子:功能單體:交聯(lián)劑的摩爾比為1:8:40,聚合溫度為55℃時(shí),能使分子印跡聚合物在濾紙上均勻聚合,分子印跡膜的吸附性最高。通過對(duì)西紅花供試品溶液中山奈酚對(duì)照品的特異性吸附實(shí)驗(yàn),山奈酚純度由17%左右提高到95%以上(面積歸一化法)。(3)本論文基于Pharm Mapper反向藥效團(tuán)匹配法、以DAVID為分析工具的KEGG通路分析和Cytoscape軟件等網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)計(jì)算手段,獲取了西紅花中40個(gè)主要化合物的110個(gè)靶標(biāo)蛋白和31條信號(hào)通路,構(gòu)建了西紅花主要化學(xué)成分-靶點(diǎn)蛋白-通路網(wǎng)絡(luò),分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)西紅花可能對(duì)癌癥、內(nèi)分泌、免疫和神經(jīng)等系統(tǒng)的疾病治療效果較佳,并且發(fā)現(xiàn)化合物(4R)-4-hydroxy-2,6,6 trimethylcyclohex-1-enecarboxylic acid O-β-D-glucopyranoside 6-hydroxy-3-(hydroxyl-methyl)-2,4,4-trimethylcyclohexa-2,5-dienone 6-O-β-Dglucopyranoside、(5S)-5-hydroxy-7,7-dimethyl-4,5,6,7-tetrahydro-3Hsobenzofuran-1-one O-β-D-glucopyranoside、(2Z)-3-methylpent-2-enedioic acid 1-[1-(2,4,4-trimethyl-3,6-dioxocyclohexenyloxy)-O-β-D-glucopyranosid-6-yl]ester、3-hydroxy-β-ionone、crocusatins H、adenosine、picrocrocin、cis-crocetin、1R)-3,5,5-trimethylcyclohex-3-enol O-β-D-glucopyranoside和safranal等11種化合物可能是其發(fā)揮功效的重點(diǎn)活性成分。
【關(guān)鍵詞】:西紅花 烘干工藝 提取工藝 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)
【學(xué)位授予單位】:浙江工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R284.2
【目錄】:
  • 摘要4-7
  • ABSTRACT7-13
  • 第一章 文獻(xiàn)綜述13-47
  • 1.1 前言13-14
  • 1.2 西紅花的生物學(xué)特性及栽培方法14
  • 1.3 西紅花化學(xué)成分研究現(xiàn)狀14-20
  • 1.3.1 已分離得到的化合物及其結(jié)構(gòu)式14-20
  • 1.3.2 本段小結(jié)20
  • 1.4 西紅花化學(xué)成分分析的研究現(xiàn)狀20-32
  • 1.4.1 紫外-可見光分光光度法20-21
  • 1.4.2 薄層掃描法21-22
  • 1.4.3 GC/GC-MS法22-25
  • 1.4.4 HPLC/HPLC-MS法25-31
  • 1.4.5 其它方法31-32
  • 1.4.6 本段小結(jié)32
  • 1.5 西紅花烘干工藝研究現(xiàn)狀32-37
  • 1.5.1 實(shí)際生產(chǎn)中的烘干工藝32-33
  • 1.5.2 西紅花的烘干工藝考察33-34
  • 1.5.3 與烘干工藝相關(guān)的西紅花化學(xué)成分變化情況34-37
  • 1.5.4 本段小結(jié)37
  • 1.6 西紅花有效成分提取純化工藝研究現(xiàn)狀37-39
  • 1.6.1 磁力攪拌法38
  • 1.6.2 超聲提取法38
  • 1.6.3 高壓脈沖電場(chǎng)輔助提取38
  • 1.6.4 固相萃取法38-39
  • 1.6.5 本段小結(jié)39
  • 1.7 西紅花的藥理活性及物質(zhì)基礎(chǔ)研究現(xiàn)狀39-43
  • 1.7.1 抗癌和抗腫瘤39-41
  • 1.7.2 糖尿病41
  • 1.7.3 對(duì)精神類疾病的治療作用41-42
  • 1.7.4 治療神經(jīng)退行性疾病42
  • 1.7.5 心腦血管疾病42-43
  • 1.7.6 其它作用43
  • 1.7.7 本段小結(jié)43
  • 1.8 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用情況43-45
  • 1.9 本章小結(jié)及本文主要研究?jī)?nèi)容45-47
  • 第二章 基于UPLC-ESI- TOF MS/MS技術(shù)分析西紅花的化學(xué)成分47-62
  • 2.1 前言47
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)部分47-49
  • 2.2.1 儀器與試劑47-48
  • 2.2.2 供試品的制備方法48
  • 2.2.3 液質(zhì)條件48-49
  • 2.3 結(jié)果與討論49-61
  • 2.3.1 液相色譜圖和總離子流圖49-51
  • 2.3.2 西紅花中主要化合物的定性鑒別和裂解規(guī)律研究51-61
  • 2.4 本章小結(jié)61-62
  • 第三章 基于HPLC-DAD分析技術(shù)的西紅花中主要化學(xué)成分含量測(cè)定方法研究62-81
  • 3.1 前言62
  • 3.2 實(shí)驗(yàn)部分62-64
  • 3.2.1 儀器與試劑62-63
  • 3.2.2 對(duì)照品的制備方法63
  • 3.2.4 供試品的制備方法63
  • 3.2.5 液相條件63-64
  • 3.3 結(jié)果與討論64-80
  • 3.3.1 線性關(guān)系考察64-65
  • 3.3.2 提取工藝考察65-70
  • 3.3.3 方法學(xué)考察70-74
  • 3.3.4 基于摩爾系數(shù)法的西紅花中主要西紅花苷類化合物的含量測(cè)定74-79
  • 3.3.5 兩種提取率測(cè)定方法的差異性比較79-80
  • 3.4 本章小結(jié)80-81
  • 第四章 西紅花的烘干工藝研究81-98
  • 4.1 前言81-82
  • 4.2 實(shí)驗(yàn)部分82-84
  • 4.2.1 儀器與試藥82
  • 4.2.2 樣品的烘干工藝82-83
  • 4.2.3 樣品中水分的測(cè)定方法83
  • 4.2.4 供試品的制備方法83
  • 4.2.5 西紅花中主要化合物的測(cè)定方法83-84
  • 4.3 結(jié)果與討論84-96
  • 4.3.1 烘干方法對(duì)西紅花中水分含量的影響84-87
  • 4.3.2 西紅花中主要化合物的含量測(cè)量87-90
  • 4.3.3 烘干方法對(duì)西紅花化學(xué)成分的影響90-96
  • 4.4 本章小結(jié)96-98
  • 第五章 西紅花中西紅花總苷的提取工藝研究98-117
  • 5.1 前言98
  • 5.2 實(shí)驗(yàn)部分98-100
  • 5.2.1 儀器與試劑98-99
  • 5.2.2 供試品的制備方法99
  • 5.2.3 西紅花總苷提取率的測(cè)定99-100
  • 5.3 結(jié)果與討論100-116
  • 5.3.1 以乙醇溶液為提取溶劑的西紅花總苷超聲提取工藝研究100-106
  • 5.3.2 以HP-β-環(huán)糊精溶液為提取溶劑的西紅花總苷提取工藝研究106-111
  • 5.3.3 西紅花總苷的閃式提取工藝研究111-116
  • 5.4 本章小結(jié)116-117
  • 第六章 山奈酚分子印跡膜的制備及其應(yīng)用117-128
  • 6.1 前言117
  • 6.2 實(shí)驗(yàn)部分117-121
  • 6.2.1 實(shí)驗(yàn)材料117-118
  • 6.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器118
  • 6.2.3 原料的前處理118
  • 6.2.4 山奈酚的含量測(cè)定方法118-119
  • 6.2.5 山奈酚分子印跡膜的制備過程119-120
  • 6.2.6 山奈酚分子印跡膜吸附量研究120
  • 6.2.7 山奈酚分子印跡膜的表征120
  • 6.2.8 山奈酚分子印跡膜在分離純化西紅花中山奈酚中的應(yīng)用120-121
  • 6.3 結(jié)果與分析121-127
  • 6.3.1 功能單體種類對(duì)山奈酚分子印跡膜吸附性的影響121
  • 6.3.2 模板分子與功能單體用量比對(duì)山奈酚分子印跡膜吸附性的影響121-122
  • 6.3.3 交聯(lián)劑用量對(duì)山奈酚分子印跡膜吸附性的影響122-123
  • 6.3.4 聚合溫度對(duì)山奈酚分子印跡膜吸附性的影響123-124
  • 6.3.6 分子印跡膜的表征124-125
  • 6.3.7 山奈酚分子印跡膜在山奈酚分離中的應(yīng)用125-127
  • 6.4 本章小結(jié)127-128
  • 第七章 西紅花有效成分的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究128-142
  • 7.1 前言128
  • 7.2 實(shí)驗(yàn)部分128-130
  • 7.2.1 西紅花化學(xué)成分的收集與整理128
  • 7.2.2 類藥性分析128-129
  • 7.2.3 西紅花主要活性成分潛在靶點(diǎn)預(yù)測(cè)129
  • 7.2.4 通路注釋和分析129
  • 7.2.5 分析西紅花中主要活性成分-靶點(diǎn)-通路關(guān)系129-130
  • 7.3 結(jié)果與討論130-141
  • 7.3.1 西紅花主要化學(xué)成分潛在靶點(diǎn)信息130-134
  • 7.3.2 西紅花主要化學(xué)成分潛在靶點(diǎn)蛋白的通路注釋和分析134-138
  • 7.3.3 西紅花主要化學(xué)成分-靶點(diǎn)蛋白-通路網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建138-141
  • 7.4 本章小結(jié)141-142
  • 第八章 全文總結(jié)與展望142-144
  • 參考文獻(xiàn)144-163
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄163-164
  • 致謝164

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 饒君鳳;王根法;呂偉德;;浙江省西紅花“二段法”優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)栽培技術(shù)研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年09期

2 郁健,杜春波,周素娣;西紅花及注射用西紅花苷的HPLC指紋圖譜研究[J];中草藥;2004年12期

3 譚安雄;李小云;;西紅花酸對(duì)大鼠腦缺血再灌注Caspase-3mRNA和NF-κB表達(dá)的影響[J];中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志;2012年01期



本文編號(hào):554159

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