本文關(guān)鍵詞：氯化兩面針堿及Wnt通路受體FZD7在CML中的作用及機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分c-Myc-microRNAs軸在氯化兩面針堿誘導(dǎo)的CML細(xì)胞紅系分化及凋亡中的作用及機(jī)制研究研究背景：慢性髓性白血病(Chronic myeloid leukemia, CML)是一種起源于多能造血干細(xì)胞的惡性克隆性疾病,具有特征性的t(9；22)(q34；q11)染色體易位(Ph染色體)并形成BCR-ABL融合基因。該融合基因編碼的蛋白具有極強(qiáng)的酪氨酸激酶活性,可抑制正常造血細(xì)胞分化和凋亡,最終導(dǎo)致白血病的發(fā)生。近年來(lái),酪氨酸激酶抑制劑(tyrosine kinase inhibitors, TKIs)的應(yīng)用較大的改善了CML的預(yù)后,但目前臨床上TKIs的耐藥問(wèn)題日益嚴(yán)重。因此,尋找新的治療方法仍是CML研究的主要方向之一。隨著腫瘤發(fā)病學(xué)研究的深入,誘導(dǎo)分化療法成為腫瘤治療的新思路。全反式維甲酸在人急性早幼粒白血病的誘導(dǎo)分化治療中已獲得確切療效,而目前慢性髓性白血病誘導(dǎo)分化治療的研究還處于起步階段,因此,研究CML細(xì)胞分化阻滯機(jī)制并尋找新的分化誘導(dǎo)劑對(duì)于CML的治療具有重要意義。原癌基因c-Myc在細(xì)胞增殖、凋亡和分化等命運(yùn)決定中起重要作用,其突變或異常表達(dá)與多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。研究顯示,c-Myc在CML急變期異常高表達(dá)并與不良預(yù)后相關(guān)。BCR-ABL可通過(guò)Jak2或MAPK信號(hào)通路上調(diào)c-Myc,過(guò)表達(dá)的c-Myc可拮抗伊馬替尼(Imatinib, IM)誘導(dǎo)的CML細(xì)胞紅系分化及凋亡,降低IM的藥物敏感性。另有研究報(bào)道,c-Myc可影響多種microRNAs的表達(dá),并通過(guò)他們發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。因此,靶向c-Myc-microRNAs軸可能成為CML誘導(dǎo)分化治療的有效手段。氯化兩面針堿(nitidine chloride, NC)是從廣西特有藥用植物兩面針的根莖中分離的生物堿類。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)NC可有效抑制乳腺癌和腎癌細(xì)胞的侵襲能力；在肝癌、胃癌、腎癌和鼻咽癌中,NC可以通過(guò)抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡發(fā)揮其抗腫瘤效應(yīng)。然而,NC在CML中的作用尚未見(jiàn)報(bào)道。研究目的：研究NC對(duì)K562細(xì)胞及原代CML細(xì)胞分化和凋亡的影響,闡明NC對(duì)c-Myc及c-Myc激活的microRNAs的影響,探討NC作為治療CML藥物的可能性。研究方法：1.NC對(duì)K562細(xì)胞紅系分化的影響：用不同濃度NC處理K562細(xì)胞后,應(yīng)用聯(lián)苯胺染色法檢測(cè)細(xì)胞的分化率；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)紅系分化抗原CD71和CD235a; Real-time RT-PCR檢測(cè)紅系分化指標(biāo)；Western blot方法檢測(cè)globin y蛋白水平。2.NC對(duì)K562細(xì)胞凋亡的影響：用不同濃度NC處理K562細(xì)胞24或48小時(shí)后,MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活；Annexin V/PI雙染后流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡；Western blot檢測(cè)Caspase3和Parp-1等凋亡相關(guān)蛋白。3. C-Myc在NC誘導(dǎo)的紅系分化及凋亡中的作用：首先應(yīng)用Western blot和real-time RT-PCR檢測(cè)NC對(duì)c-Myc蛋白和mRNA水平的影響；應(yīng)用CHX chase實(shí)驗(yàn)檢測(cè)NC對(duì)c-Myc蛋白降解的影響；構(gòu)建高表達(dá)或敲除c-Myc的細(xì)胞系并用NC處理48小時(shí),Western blot檢測(cè)紅系分化指標(biāo)globin γ,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡。4.NC對(duì)c-Myc降解的影響極其作用機(jī)制：只有Thr58磷酸化的c-Myc才能被E3泛素連接酶SCFFbW7識(shí)別并通過(guò)泛素-蛋白酶體降解,因此我們應(yīng)用Western blot檢測(cè)NC對(duì)c-Myc Thr58磷酸化水平的影響；在K562細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染野生型及T58A突變的c-Myc質(zhì)粒并用NC處理后,CHX chase實(shí)驗(yàn)檢測(cè)NC對(duì)野生型c-Myc及T58A點(diǎn)突變體降解的影響。5. C-Myc激活的microRNAs在NC誘導(dǎo)的紅系分化及凋亡中的作用：應(yīng)用Real-time RT-PCR方法檢測(cè)NC處理或下調(diào)c-Myc對(duì)K562細(xì)胞中c-Myc相關(guān)microRNAs表達(dá)的影響；Western blot檢測(cè)NC對(duì)miR-17/20下游靶基因P21的影響；Western blot檢測(cè)miR-17/20對(duì)紅系分化蛋白globin γ水平的影響,明確miR-17/20在NC誘導(dǎo)的紅系分化中的作用；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)miR-17/20對(duì)NC誘導(dǎo)的凋亡的影響。6.NC對(duì)K562、K562/G01的IM敏感性的影響：用NC、IM或NC+IM處理K562細(xì)胞后,軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)觀察NC、IM或二者聯(lián)合作用對(duì)K562集落形成能力的影響；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)NC、IM或二者聯(lián)合作用對(duì)K562和K562/G01凋亡的影響。7.NC對(duì)原代CML細(xì)胞的影響：收集5例CML患者骨髓,分離單個(gè)核細(xì)胞,其中病例1-3為IM敏感型,4和5為IM耐藥型。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)NC對(duì)原代CML細(xì)胞的凋亡影響；Western blot檢測(cè)NC對(duì)原代CML細(xì)胞中c-Myc蛋白表達(dá)的影響；Real-time RT-PCR檢測(cè)NC對(duì)原代CML細(xì)胞中miR-17/20表達(dá)的影響。研究結(jié)果：1.NC對(duì)K562細(xì)胞紅系分化的影響：應(yīng)用聯(lián)苯胺染色實(shí)驗(yàn)顯示NC可明顯增加K562細(xì)胞的分化率,且其誘導(dǎo)分化效應(yīng)具有時(shí)間、劑量反應(yīng)關(guān)系。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示NC可明顯增加K562細(xì)胞表面紅系分化抗原CD71、CD235a。Real-time RT-PCR結(jié)果顯示NC可明顯增加globin α、globin ε、globin γ、CD235a、AHSP等紅系分化指標(biāo)的mRNA水平。Western blot結(jié)果顯示NC可明顯增加K56細(xì)胞中g(shù)lobin y蛋白表達(dá)水平。2.NC對(duì)K562細(xì)胞凋亡的影響：MTT結(jié)果顯示NC可抑制K562的生長(zhǎng)。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示NC顯著增加K562細(xì)胞的凋亡率,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)NC影響K562細(xì)胞中Caspase-3、Parp-1等凋亡相關(guān)蛋白。3. c-Myc在NC誘導(dǎo)的K562紅系分化及凋亡中的作用：原癌基因c-Myc通路在白血病細(xì)胞增殖、分化及凋亡等多種生物學(xué)行為中起重要作用,我們發(fā)現(xiàn)NC可下調(diào)c-Myc蛋白的表達(dá),且具有時(shí)間、劑量反應(yīng)關(guān)系。在K562細(xì)胞中,過(guò)表達(dá)c-Myc可逆轉(zhuǎn)NC誘導(dǎo)的globin y上調(diào),下調(diào)c-Myc可增強(qiáng)NC誘導(dǎo)的globin y上調(diào)；過(guò)表達(dá)c-Myc可逆轉(zhuǎn)NC誘導(dǎo)的凋亡,下調(diào)c-Myc可增強(qiáng)NC誘導(dǎo)的凋亡。以上結(jié)果說(shuō)明NC誘導(dǎo)的K562紅系分化及凋亡是通過(guò)下調(diào)c-Myc起作用的。4.NC對(duì)c-Myc降解的影響極其作用機(jī)制：NC對(duì)c-Myc mRNA的影響不具有顯著性,由此推測(cè)NC對(duì)c-Myc的調(diào)控發(fā)生在轉(zhuǎn)錄后水平。應(yīng)用CHX chase實(shí)驗(yàn)顯示NC可加快c-Myc蛋白降解。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)NC可升高Thr58磷酸化的c-Myc與總c-Myc的比值,NC可加速野生型c-Myc的降解,而對(duì)T58A的c-Myc蛋白降解的影響不顯著。以上結(jié)果說(shuō)明,NC通過(guò)上調(diào)T58磷酸化加速c-Myc的降解。5.c-Myc激活的microRNAs在NC誘導(dǎo)的紅系分化及凋亡中的作用：應(yīng)用Real-time RT-PCR檢測(cè)顯示NC處理或下調(diào)c-Myc可抑制K562細(xì)胞中miR-17、miR-20a、miR-30a、miR-221、miR-222和miR-378的表達(dá)。Western blot顯示NC可顯著上調(diào)miR-17/20下游靶基因P21。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),miR-17和miR-20a上調(diào)可逆轉(zhuǎn)NC誘導(dǎo)的globin γ水平升高及細(xì)胞凋亡,由此可見(jiàn),NC誘導(dǎo)的K562紅系分化及凋亡是通過(guò)下調(diào)miR-17、miR-20a起作用的。6.NC對(duì)K562、K562/G01對(duì)伊馬替尼的敏感性的影響：NC、IM或聯(lián)合(NC+IM)均可下調(diào)K562集落形成能力,且NC可增加IM的效力。K562/G01為伊馬替尼不敏感,但NC對(duì)仍有殺傷作用,且NC可增加伊馬替尼誘導(dǎo)的K562/G01細(xì)胞凋亡。7.NC對(duì)原代CML細(xì)胞的影響：NC可誘導(dǎo)原代CML細(xì)胞凋亡,并增加其對(duì)伊馬替尼敏感性,更重要的是,NC對(duì)伊馬替尼耐藥的細(xì)胞仍具有殺傷作。NC可下調(diào)原代CML細(xì)胞中c-Myc蛋白及miR-17和miR-20a的表達(dá)。結(jié)論：1.NC可誘導(dǎo)K562細(xì)胞紅系分化和凋亡；2.NC通過(guò)增加Thr58磷酸化水平加快c-Myc的降解,并可下調(diào)c-Myc激活的miRNAs:3.NC對(duì)伊馬替尼耐藥的K562/G01細(xì)胞及原代CML細(xì)胞仍有殺傷作用；4.NC可能成為一個(gè)新的抗白血病藥物,為CML的治療提供新的方案及實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。第二部分Wnt通路分子FZD7在CML中的表達(dá)及其在骨髓基質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)耐藥中作用研究背景：伊馬替尼(Imatinib, IM)是一種酪氨酸激酶抑制劑,能選擇性抑制BCR-ABL的酪氨酸激酶活性,誘導(dǎo)大多數(shù)慢性期慢性髓性白血病(Chronic myeloid leukemia, CML)患者完全緩解。然而,隨著IM在臨床上的廣泛應(yīng)用和時(shí)間的推移,其耐藥現(xiàn)象日益明顯,復(fù)發(fā)率逐漸增高,因此研究CML耐藥機(jī)制對(duì)于CML的治療具有重要意義。越來(lái)越多的證據(jù)表明,血液系統(tǒng)腫瘤與其所處的骨髓微環(huán)境之間的相互作用在腫瘤耐藥中起重要的作用。骨髓微環(huán)境的諸多成分中,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs)是參與腫瘤生存及耐藥的最重要因素。Gordon等研究表明BMSCs可通過(guò)直接接觸及釋放IL-6等可溶性細(xì)胞因子,減弱c-Kit抑制劑誘導(dǎo)的白血病細(xì)胞凋亡。Moshaver等同樣發(fā)現(xiàn),BMSCs可調(diào)節(jié)慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)細(xì)胞中癌基因TCL1的表達(dá),并激活TCL1相關(guān)的miRNAs,降低CLL細(xì)胞的藥物敏感性。以上研究提示,靶向BMSCs與白血病細(xì)胞之間的相互作用可成為克服白血病細(xì)胞耐藥的有力手段。白血病細(xì)胞與BMSCs之間的相互作用涉及多重調(diào)控機(jī)制和信號(hào)通路,其中Wnt/β-catenin信號(hào)通路是發(fā)現(xiàn)較早、研究較多的重要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之一。Hu等研究發(fā)現(xiàn),BMSCs可釋放galectin-3分子,激活A(yù)kt信號(hào)通路使GSK3β失活,抑制β-catenin的降解,從而介導(dǎo)AML細(xì)胞耐藥。另有研究顯示,BMSCs可通過(guò)直接接觸激活CML干細(xì)胞中的Wnt/β-catenin信號(hào)通路,維持CML干細(xì)胞的存活。由此可見(jiàn), BMSCs可激活CML細(xì)胞中的Wnt信號(hào)通路,然而Wnt/p-catenin在CML細(xì)胞中激活的原因及調(diào)控機(jī)制目前尚不明確。FZD7屬于frizzled受體家族,FZD7在肝癌、胃癌和乳腺癌等多種實(shí)體瘤中表達(dá)異常增加,且FZD7基因的表達(dá)水平與腫瘤的惡性程度和預(yù)后密切相關(guān)。此外,有研究報(bào)道,FZD7可調(diào)節(jié)耐藥基因MDR1的表達(dá)參與腫瘤細(xì)胞耐藥。我們發(fā)現(xiàn),將BMSCs與CML細(xì)胞共培養(yǎng)后,CML細(xì)胞中FZD7表達(dá)增高。由此推測(cè)FZD7上調(diào)可能是共培養(yǎng)后Wnt/β-catenin信號(hào)通路激活的原因,靶向FZD7可切斷BMSCs與白血病細(xì)胞之間的相互作用,或可成為克服CML耐藥的有力手段。研究目的：研究FZD7在CML患者中的表達(dá)水平；探討FZD7異常表達(dá)對(duì)白血病細(xì)胞藥物敏感性及藥物誘導(dǎo)凋亡的影響；闡明FZD7在BMSCs介導(dǎo)的IM耐藥中的作用,為逆轉(zhuǎn)IM多藥耐藥提供新的靶點(diǎn)。研究方法：1.收集16例初診未經(jīng)TKIs治療的CML患者及6例正常對(duì)照骨髓標(biāo)本,磁珠分選CD34+細(xì)胞,Real-time RT-PCR檢測(cè)CD34+細(xì)胞中10種FZD分子的表達(dá)情況。16例CML患者根據(jù)治療后情況,分為伊馬替尼敏感(imatinib sensitive, IMS)組(9例)和伊馬替尼抵抗(imatinib resistant, IMR)組(7例),分析兩組間FZD7分子的表達(dá)差異。2.我們收集了3例CML(C1、C2和C3)及2例正常對(duì)照(N1和N2)骨髓標(biāo)本,體外培養(yǎng)BMSCs細(xì)胞,并將其與CML細(xì)胞共培養(yǎng)后,Western blot方法檢測(cè)CML細(xì)胞中FZD7、β-catenin口MDR1的等Wnt通路分子的蛋白水平改變；Real-time RT-PCR檢測(cè)CML細(xì)胞中FZD7及Wnt下游基因MDR1、c-Myc、 Survivin、CD44和Trib2的mRNA水平的改變。3.包裝攜帶FZD7 shRNA的慢病毒,感染K562細(xì)胞72小時(shí)后熒光顯微鏡觀測(cè)感染效率,用Real-time RT-PCR和Western blot方法檢測(cè)病毒感染后FZD7下調(diào)情況。4.細(xì)胞增殖檢測(cè)：MTT方法檢測(cè)FZD7下調(diào)對(duì)細(xì)胞的增殖的影響；PI染色后利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)FZD7對(duì)細(xì)胞周期的改變。5.IM的敏感性檢測(cè)：將感染后的細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)板中,加入不同濃度的IM,培養(yǎng)48或72小時(shí),MTT方法檢測(cè)細(xì)胞對(duì)IM的敏感性,計(jì)算伊馬替尼的半數(shù)抑制濃度(IC50)；AnnexinV/PI雙染后利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率的變化。6.將感染了ShFZD7-2或ShCtrl慢病毒的K562細(xì)胞與不同來(lái)源的BMSCs共培養(yǎng)48小時(shí)后,采用標(biāo)準(zhǔn)洗滌方法收集共培養(yǎng)后的K562細(xì)胞,加入伊馬替尼(0.2μM)處理48小時(shí),應(yīng)用MTT檢測(cè)細(xì)胞存活率,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。7.用ShFZD7-2或ShCtrl慢病毒感染K562細(xì)胞72小時(shí)后,與不同來(lái)源的BMSCs共培養(yǎng)48小時(shí)后,采用標(biāo)準(zhǔn)洗滌方法收集共培養(yǎng)后的K562細(xì)胞,應(yīng)用Western blot和Real-time RT-PCR檢測(cè)FZD7及Wnt下游基因的表達(dá)情況。研究結(jié)果：1.CML患者中FZD7表達(dá)情況：相對(duì)于正常CD34+細(xì)胞,CML CD34+細(xì)胞中FZD7表達(dá)升高。Real-time RT-PCR結(jié)果顯示伊馬替尼抵抗組(IMR,7例)FZD7表達(dá)水平明顯高于伊馬替尼敏感組(IMS,9例)。Western blot檢測(cè)3例正常對(duì)照骨髓、3例IMS和3例IMR的CD34+細(xì)胞中FZD7表達(dá)水平,IMR CD34+細(xì)胞中FZD7蛋白水平明顯高于IMS組,與Real-time RT-PCR結(jié)果一致。2. BMSCs與CML細(xì)胞系K562及原代CML細(xì)胞直接共培養(yǎng)后,K562及原代CML細(xì)胞中FZD7、β-catenin和MDR1的蛋白表達(dá)水平較單獨(dú)培養(yǎng)組明顯升高,并且CML來(lái)源的BMSCs較正常對(duì)照來(lái)源的BMSCs對(duì)CML細(xì)胞中Wnt/β-catenin信號(hào)激活更為顯著。此外,Real-time RT-PCR結(jié)果顯示BMSCs與CML細(xì)胞系K562共培養(yǎng)后,CML細(xì)胞中FZD7及Wnt下游基因MDR1、c-Myc、Survivin、CD44和Trib2的mRNA表達(dá)水平較單獨(dú)培養(yǎng)組亦明顯增高。3.包裝FZD7 shRNA慢病毒并感染K562細(xì)胞72小時(shí)后,熒光顯微鏡觀察感染效率達(dá)95%以上,Real-time RT-PCR和Western blot結(jié)果顯示攜帶FZD7 shRNA的慢病毒可有效下調(diào)FZD7表達(dá)。4.FZD7下調(diào)抑制CML增殖：MTT結(jié)果顯示,FZD7干擾組的增殖速率顯著低于對(duì)照組。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期結(jié)果顯示,干擾組G0/G1期細(xì)胞比例明顯高于陰性對(duì)照組。利用Western blot檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白表達(dá)發(fā)現(xiàn),阻斷FZD7可升高CML細(xì)胞中P21、P27并降低Cyclin D1和CDK4的表達(dá)水平。5.FZD7下調(diào)增加CML細(xì)胞對(duì)伊馬替尼的敏感性：MTT檢測(cè)發(fā)現(xiàn),干擾FZD7表達(dá)后K562細(xì)胞對(duì)IM的敏感性的增加。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率結(jié)果顯示,下調(diào)FZD7后IM的誘導(dǎo)凋亡率顯著升高。Western blot結(jié)果表明FZD7干擾組caspase 3及PARP-1的活性片段表達(dá)上調(diào)。6.FZD7下調(diào)能減少BMSCs誘導(dǎo)的伊馬替尼耐藥：MTT結(jié)果顯示,FZD7下調(diào)顯著抑制BMSCs誘導(dǎo)的IM耐藥。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡發(fā)現(xiàn),在共培養(yǎng)的K562細(xì)胞中下調(diào)FZD7后IM的誘導(dǎo)凋亡率顯著升高。7.FZD7下調(diào)能減少BMSCs誘導(dǎo)的Wnt/β-catenin信號(hào)通路激活：Western blot結(jié)果顯示,FZD7下調(diào)能有效逆轉(zhuǎn)BMSCs誘導(dǎo)的FZD7和MDR1蛋白上調(diào)；Real-time RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,FZD7下調(diào)能抑制BMSCs介導(dǎo)的MDR1和CD44 mRNA水平升高。由此可見(jiàn),FZD7高表達(dá)可能是共培養(yǎng)后Wnt/p-catenin信號(hào)通路激活的原因。結(jié)論：1.相對(duì)于正常CD34+細(xì)胞,CML CD34+細(xì)胞中FZD7表達(dá)上升；IM抵抗型CML患者FZD7表達(dá)水平顯著高于IM敏感型。2.CML細(xì)胞與BMSCs共培養(yǎng)能上調(diào)CML細(xì)胞中FZD7的表達(dá),激活Wnt/p-catenin信號(hào)通路。3.FZD7下調(diào)抑制CML細(xì)胞增殖和集落形成能力,增強(qiáng)對(duì)IM的敏感性。4.靶向FZD7可有效阻斷BMSCs與CML細(xì)胞之間的聯(lián)系,逆轉(zhuǎn)BMSCs介導(dǎo)CML耐藥。
【關(guān)鍵詞】：氯化兩面針堿 慢性髓性白血病 紅系分化 c-Myc microRNAs FZD7 Wnt信號(hào)通路 CML BMSCs 藥物敏感性
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R733.72
【目錄】：

• 中文摘要6-14
• ABSTRACT14-23
• 符號(hào)說(shuō)明23-25
• 第一部分 c-Myc-microRNAs軸在氯化兩面針堿誘導(dǎo)的CML細(xì)胞紅系分化及凋亡中的作用及機(jī)制研究25-68
• 前言25-27
• 材料與方法27-42
• 結(jié)果42-47
• 討論47-49
• 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-59
• 附圖59-66
• 附表66-68
• 第二部分 Wnt通路分子FZD7在CML中的表達(dá)及其在骨髓基質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)耐藥中作用68-97
• 前言68-69
• 材料與方法69-72
• 結(jié)果72-76
• 討論76-80
• 結(jié)論80
• 參考文獻(xiàn)80-89
• 附圖89-95
• 附表95-97
• 致謝97-98
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文98-99
• 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表99-100
• 英文論文1100-128
• 英文論文2128-154

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 莊祥云;干擾素對(duì)慢性髓細(xì)胞性白血病(CML)的治療[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;1985年12期

2 ;慢性粒細(xì)胞白血病(CML)的分期標(biāo)準(zhǔn)[J];臨床薈萃;1990年07期

3 ;慢性粒細(xì)胞白血病(CML)的分期標(biāo)準(zhǔn)[J];實(shí)用內(nèi)科雜志;1990年03期

4 劉利;劉強(qiáng);陳任安;何華;蔣姍姍;杜娟;梁英民;;7例格列衛(wèi)聯(lián)合非清髓造血干細(xì)胞移植治療加速期、急變期CML的臨床觀察[J];中國(guó)腫瘤臨床;2006年17期

5 楊文西;;Ph~1陽(yáng)性慢性粒細(xì)胞白血病(CML)的存活:與診斷時(shí)的發(fā)現(xiàn)和第一療程后疾病動(dòng)力學(xué)的關(guān)系[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊(cè);1986年04期

6 張守寬,李強(qiáng);檢測(cè)和診斷Ph~+CML的一種簡(jiǎn)單、可靠和敏感的方法——外周血細(xì)胞間期熒光原位雜交[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊(cè);2000年02期

7 劉鴻;某治療中心16年觀察所見(jiàn)430例CML病人初診時(shí)的臨床特征[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊(cè);1997年04期

8 秦春圃;應(yīng)用FISH評(píng)估IFN治療CML的療效[J];生物技術(shù)通報(bào);2002年06期

9 李雅琴;胡予;;慢性粒細(xì)胞白血病(CML)細(xì)胞分裂中期9和22號(hào)染色體的空間關(guān)系[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊(cè);1989年01期

10 熊玉寧;IL-1β和TNF-α與CML病程進(jìn)展的關(guān)系研究[J];白血病;1999年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 劉利;梁英民;劉強(qiáng);郝淼旺;陳任安;蔣姍姍;張繼良;王黎紅;何華;吳絨麗;杜娟;葉盛開(kāi);尹單單;韓驊;;格列衛(wèi)聯(lián)合非清髓造血干細(xì)胞移植治療加速期、急變期CML的臨床研究[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

2 王琳;徐衛(wèi)東;;治療性血液成分去除術(shù)在難治性ITP、CML高危組和PV中的臨床應(yīng)用研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

3 顧樂(lè)怡;倪兆慧;Yasuhiko Tomino;錢家麒;;NF-κB和Sp1調(diào)節(jié)CML誘導(dǎo)的足細(xì)胞MCP-1基因轉(zhuǎn)錄[A];“中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2004年年會(huì)”暨“第二屆全國(guó)中青年腎臟病學(xué)術(shù)會(huì)議”論文匯編[C];2004年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉娜;氯化兩面針堿及Wnt通路受體FZD7在CML中的作用及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

2 羅依;CML酪氨酸激酶抑制劑分子靶向藥物及異基因造血干細(xì)胞移植分層治療研究[D];浙江大學(xué);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 伊娜;親緣間異基因外周血造血干細(xì)胞移植治療CML的臨床療效分析[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：氯化兩面針堿及Wnt通路受體FZD7在CML中的作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：404406