背景/目的:線粒體谷胱甘肽（mitochondrial glutathione,mGSH）作為一種細胞抗氧化劑,對人視網膜色素上皮（human retinal pigment epithelium,hRPE）細胞的功能具有重要保護作用。雖然,目前對mGSH的轉運機制尚未完全了解,但以往的研究表明,位于線粒體內膜的2-氧戊二酸酯（OGC;SLC25A11）和二羧酸鹽（DIC;SLC25A10）作為mGSH轉運體,在肝、腎和肺組織細胞中發(fā)揮重要作用。本課題主要研究OGC和DIC在hRPE細胞中的表達及定位特性,在氧化應激狀態(tài)下的表達變化、對細胞凋亡的影響,以及參與調節(jié)細胞mGSH平衡的作用。方法:通過免疫印跡和共聚焦顯微鏡觀察OGC和DIC在非極化、極化hRPE細胞以及小鼠視網膜中的表達和定位特性。分別用H₂O₂、琥珀酸苯基酯（phenylsuccinate,PS）或丙二酸丁酯（butylmalonate,BM）作用于hRPE細胞24小時,觀察在不同時間、不同劑量刺激條件下,OGC和DIC的表達變化情況。通過測定抑制OGC或DIC后,細胞凋亡（TU...

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

上海交通大學博士學位論文29圖1.OGC和DIC在人視網膜色素上皮細胞中表達OGC和DIC在hRPE細胞的基因和蛋白質水平顯著表達。圖1A，hRPE細胞中OGC和DIC在mRNA水平表達。利用兩個供體來源的RPE細胞，RPE1來自供體M，RPE2來自供體N，neg：陰性對照。圖1....

上海交通大學博士學位論文30圖2.OGC和DIC在人視網膜色素上皮細胞中的定位OGC和DIC在hRPE細胞中的免疫熒光染色的共聚焦圖像。圖2A、B第一行圖分別表示細胞中的OGC和DIC（綠色熒光標記）與線粒體（Mitotracker，紅色熒光標記）共染色，其中細胞核用DAPI復染....

上海交通大學博士學位論文32圖3.極化狀態(tài)對hRPE細胞中OGC和DIC表達的影響及ZO-1蛋白的變化極性狀態(tài)對hRPE細胞中OGC和DIC表達的影響，ZO-1熒光染色的圖像顯示細胞間緊密連接。Westernblot分析顯示，極化較非極化的RPE細胞中OGC和DIC的表達均明顯增....

上海交通大學博士學位論文34圖4.H2O2誘導的氧化應激條件下OGC和DIC的表達變化暴露于H2O2的hRPE細胞中OGC和DIC蛋白表達呈劑量和時間依賴性降低。給予不同濃度的H2O2（50，100，200，300μM）處理hRPE細胞24小時（圖A、B，E、F）；同時觀察200....

本文編號：4009519