組蛋白賴氨酸特異性去甲基酶1(Lysine specific demethylase 1,LSD1)是一個黃素依賴的胺基氧化酶。它可以去除組蛋白H3的第4位、第9位賴氨酸的單、雙甲基。LSD1在多種腫瘤組織中處于高表達狀態(tài),且在腫瘤的形成、增殖、轉(zhuǎn)移侵襲和分化過程中發(fā)揮著重要作用。LSD1作為抗腫瘤藥物研發(fā)的新靶點被廣泛關(guān)注,因此,獲取高效靶向LSD1的抑制劑或者誘導(dǎo)生物體內(nèi)源性降解LSD1是治療癌癥的新途徑。通過文獻調(diào)研以及課題組的研究表明,以含氮雜環(huán)為骨架的雜環(huán)類化合物是一類重要的LSD1抑制劑。因此,探究靶向LSD1的含氮雜環(huán)化合物抗腫瘤活性具有重要意義。本論文首先利用原核系統(tǒng)表達LSD1,并利用親和、凝膠和陰離子交換色譜對其進行純化。然后,基于熒光的方法對三種不同結(jié)構(gòu)類型的氮雜環(huán)化合物進行篩選,探討了它們抑制LSD1活性的機理,并進一步評價它們的抗腫瘤活性。另外,我們也對類泛素修飾neddylation對LSD1穩(wěn)定性的影響和修飾位點做了初步研究。本論文的具體研究內(nèi)容包括以下幾個方面:(1)芳肼類LSD1抑制劑的發(fā)現(xiàn)及抗腫瘤活性研究通過在雜環(huán)骨架[1,2,4]三氮唑[1,5-α...

【文章頁數(shù)】：191 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１?ＬＳＤ１的晶體結(jié)構(gòu)（ＰＤＢ：２ＨＫＯ）

????８?＾?Ａ??＞?ｌ?１７２?２７１?＜１７?＆２２?８３３?９５２??圖１．１?ＬＳＤ１的晶體結(jié)構(gòu)（ＰＤＢ：２ＨＫＯ）。紫色是ＳＷＩＲＭ結(jié)構(gòu)域，藍色（ＦＡＤ結(jié)合??區(qū)域）和綠色（底物結(jié)合區(qū)域）是ＡＯＬ結(jié)構(gòu)域，黃色是Ｔｏｗｅｒ結(jié)構(gòu)域；灰色是Ｎ端??自由變構(gòu)區(qū)及Ｃ端未顯示的....

圖１．２?ＬＳＤ１去甲基反應(yīng)機理圖??

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圖１．１３本論文研究思路流程圖??

??｜?三類含氮＾環(huán)化合物?｜?ｆ?ＬＳＤ１類泛素化修飾１??丨光祕?￣，??＿?＿?ｉ?，?．?．??＇???「芳禮吾］ｆＥＧＦＲ－ＴＫ�。�?ｆ?、??ｉ成化合物?１抑制劑［生物減?＂＂對ＬＳＤ１穩(wěn)定＇｜？ｅｄｄｙｌａｔｉｏｎ修飾??）?ｉ篩選：：?Ｔ篩選：??———￣Ｊ?—逢....

圖２．１蛋白純化常用的色譜方法??

?ＬＳＤ１全長蛋白的載體構(gòu)建與原核表達純化???２?ＬＳＤ１全長蛋白的載體構(gòu)建與原核表達純化??２．１前言??利用原核細胞表達真核基因已經(jīng)成為基因重組技術(shù)中不可或缺的研究手??段。大腸桿菌表達系統(tǒng)具有遺傳背景清晰、操作方便、蛋白表達水平高、成??本低、遺傳較穩(wěn)定、商業(yè)化表達載體和....

本文編號：3984134