由于我國經(jīng)濟的高速發(fā)展以及城市化的加劇,發(fā)達國家所經(jīng)歷的不同工業(yè)發(fā)展階段的大氣污染問題在我國以壓縮的方式同時集中顯現(xiàn)。污染情況最為突出的便是近年來頻發(fā)的霧霾事件,其強度高、持續(xù)時間長且涉及區(qū)域廣。我國大氣細顆粒物(PM_2.5)來源與成因十分復雜,其毒性組分和毒理學機制尚不清楚,國外的研究模式與結果解析不能很好的適用于我國PM_2.5的污染情況。因此,結合我國大氣霧霾的特點,開展大氣細顆粒物的健康危害與分子機制研究,將有助于理解我國霧霾對人群健康的危害,從而推動我國環(huán)境污染與健康研究的發(fā)展。為此本課題擬首先基于表觀遺傳調控探討PM_2.5與氣態(tài)污染物SO₂、NO₂復合暴露對肺損傷的影響,在此基礎上,針對PM_2.5研究不同生命階段小鼠對PM_2.5的易感性,并針對易感性最強的小鼠探究PM_2.5暴露后的恢復效應,最后,建立PM_2.5孕期暴露模型,探討PM_2.5孕期暴露對子代小鼠肺發(fā)...

【文章頁數(shù)】：138 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 大氣污染的現(xiàn)狀及健康危害
        1.1.1 大氣污染的現(xiàn)狀
        1.1.2 大氣污染的健康危害
    1.2 PM_2.5 的污染現(xiàn)狀以及呼吸系統(tǒng)健康效應
        1.2.1 PM_2.5 污染現(xiàn)狀以及健康危害
        1.2.2 PM_2.5對COPD的影響
        1.2.3 PM_2.5 對哮喘的影響
        1.2.4 PM_2.5 對肺癌的影響
    1.3 PM_2.5 誘導呼吸系統(tǒng)疾病的分子機制
        1.3.1 炎性機制
        1.3.2 氧化應激
        1.3.3 表觀遺傳機制
            1.3.3.1 DNA甲基化修飾
            1.3.3.2 非編碼RNA調控
            1.3.3.3 組蛋白修飾
    1.4 孕期PM_2.5 暴露對子代呼吸系統(tǒng)的影響
        1.4.1 PM_2.5 的跨胎盤效應
        1.4.2 孕期PM_2.5 暴露與胎兒發(fā)育
        1.4.3 PM_2.5 孕期暴露與子代呼吸系統(tǒng)發(fā)育
    1.5 本研究課題的提出及科學意義
第二章 PM_2.5與SO₂、NO₂ 復合暴露誘導小鼠肺動脈高壓樣損傷的分子機制
    2.1 前言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 材料、試劑與儀器
        2.2.2 PM_2.5 樣品的收集
        2.2.3 實驗動物的處理方法
        2.2.4 miRNA芯片分析
        2.2.5 生物信息學分析
        2.2.6 實時熒光定量PCR分析(RT-PCR)
        2.2.7 免疫印跡分析(Western blot)
        2.2.8 雙熒光素酶報告基因分析
        2.2.9 蘇木精–伊紅(HE)染色及透射電鏡(TEM)觀察
        2.2.10 肺功能檢測
        2.2.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    2.3 結果
        2.3.1 PM_2.5和SO₂、NO₂ 復合暴露引起氣道氣流受限
        2.3.2 PM_2.5和SO₂、NO₂ 復合暴露導致肺動脈高壓樣損傷
        2.3.3 PM_2.5和SO₂、NO₂ 復合暴露對小鼠肺組織miRNAs表達的影響..
        2.3.4 miR-338-5p在 PM_2.5和SO₂、NO₂ 復合暴露誘導肺動脈高壓的調控機制
    2.4 討論與結論
第三章 PM_2.5 暴露對不同生命階段小鼠肺損傷的影響
    3.1 前言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 材料、試劑與儀器
        3.2.2 PM_2.5 樣品收集
        3.2.3 動物處理方法
        3.2.4 肺功能檢測
        3.2.5 HE染色
        3.2.6 ROS水平檢測
        3.2.7 抗氧化酶SOD和 GSH-Px活力檢測
        3.2.8 RT-PCR分析
        3.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    3.3 結果
        3.3.1 PM_2.5 的特征
        3.3.2 PM_2.5 暴露對不同生命階段小鼠肺功能的影響
        3.3.3 PM_2.5 暴露對不同生命階段小鼠肺組織病理學結構的影響
        3.3.4 PM_2.5 暴露對不同生命階段小鼠肺部氧化應激效應的影響
        3.3.5 PM_2.5 暴露對不同生命階段小鼠肺部炎性反應的影響
    3.4 討論與結論
第四章 組蛋白修飾在PM_2.5 暴露誘導肺損傷及恢復過程中的調控機制
    4.1 前言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 材料、試劑與儀器
        4.2.2 PM_2.5 樣品收集
        4.2.3 動物處理
        4.2.4 染色質免疫共沉淀分析(ChIP)
        4.2.5 ChIP-測序(ChIP-seq)分析
        4.2.6 肺功能檢測
        4.2.7 ELISA分析
        4.2.8 支氣管肺泡灌洗液(BALF)和細胞分類計數(shù)
        4.2.9 RT-PCR分析
        4.2.10 核蛋白提取和Western blot分析
        4.2.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    4.3 結果
        4.3.1 PM_2.5 暴露對小鼠肺功能的不良影響及恢復效應
        4.3.2 PM_2.5 暴露對BALF細胞學的不良影響及恢復效應
        4.3.3 PM_2.5 暴露對組蛋白修飾的不良影響及恢復效應
        4.3.4 PM_2.5 暴露對H3K27ac相關肺部炎癥的不良影響以及恢復作用
    4.4 討論與結論
第五章 孕期PM_2.5 暴露與子代小鼠支氣管肺發(fā)育不良
    5.1 前言
    5.2 材料和方法
        5.2.1 材料、試劑與儀器
        5.2.2 PM_2.5 樣品的收集
        5.2.3 實驗動物
        5.2.4 PM_2.5 暴露
        5.2.5 HE染色
        5.2.6 肺組織形態(tài)學測量
        5.2.7 免疫組化(IHC)和免疫熒光(IF)
        5.2.8 TEM觀察
        5.2.9 Western blot分析
        5.2.10 RT-PCR分析
        5.2.11 肺功能檢測
        5.2.12 組織中重金屬含量測定
        5.2.13 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    5.3 結果
        5.3.1 PM_2.5 暴露直接或間接影響胎兒發(fā)育
        5.3.2 孕期PM_2.5 暴露和子鼠出生體重
        5.3.3 孕期PM_2.5 暴露和子鼠肺泡化
        5.3.4 孕期PM_2.5 暴露和子鼠肺組織血管生成
        5.3.5 孕期PM_2.5 暴露和子鼠氣道分泌功能
        5.3.6 孕期PM_2.5 暴露和子鼠氣道炎性
        5.3.7 孕期PM_2.5 暴露和子鼠肺功能
    5.4 討論與結論
第六章 結論與展望
    6.1 結論
    6.2 展望
縮略詞
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
參與科研項目
致謝
個人簡況及聯(lián)系方式



本文編號：3933273