研究背景:結(jié)核是由結(jié)核分枝桿菌引起的一種嚴(yán)重的傳染性疾病,至今為止它仍然是全球十大致死原因之一,同樣也是單一傳染源導(dǎo)致的感染性疾病中最主要的死因。目前結(jié)核治療中面臨的兩大最主要困難是治療過(guò)程中的結(jié)核耐藥和結(jié)核免疫逃逸,正是這兩大因素導(dǎo)致結(jié)核治療困難、化療程長(zhǎng)且容易復(fù)發(fā)。我們通過(guò)研究結(jié)核分枝桿菌CRISPR-Cas系統(tǒng)中一個(gè)關(guān)鍵蛋白Cas1和結(jié)核感染過(guò)程中誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的RNA結(jié)合蛋白,探討結(jié)核治療中耐藥發(fā)生的機(jī)制及逃避機(jī)體初級(jí)免疫的機(jī)制。研究方法:1.我們通過(guò)收集來(lái)自重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院初次確診肺結(jié)核,且痰培養(yǎng)陽(yáng)性的臨床分類結(jié)核樣本,通過(guò)PCR檢測(cè)其Cas1基因及其側(cè)翼序列的缺失情況。2.利用分枝桿菌噬菌體D29感染BCG構(gòu)建共感染模型,利用高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)BCG受到分枝桿菌噬菌體D29感染后的CRISPR插入序列的變化情況,研究CRISPR-Cas在分枝桿菌噬菌體抵抗中的作用。3.構(gòu)建分枝桿菌穿梭質(zhì)粒在M.smegmatis中異源性表達(dá)結(jié)核分枝桿菌Cas1蛋白。4.通過(guò)H₂O₂,SDS和酸化培養(yǎng)基模擬環(huán)境壓力條件,分別計(jì)算重組M.sme...

【文章頁(yè)數(shù)】：118 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 CAS1蛋白在結(jié)核致病中的作用
    1 材料與方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
第二部分 RNA結(jié)合蛋白在結(jié)核免疫逃逸中的作用
    1 材料與方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述:結(jié)核的免疫逃逸機(jī)制
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀博士研究生期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
攻讀博士研究生期間參加的學(xué)術(shù)會(huì)議



本文編號(hào)：3925890