目的 順鉑(Cisplatin)是常用的化療藥物,但腎毒性限制了其臨床應(yīng)用。黃芪多糖(AstragalusPolysaccharides,APS)是中藥黃芪中的有效活性成分之一,具有抗炎、抗氧化等作用。本實(shí)驗(yàn)通過順鉑誘導(dǎo)小鼠急性腎損傷模型以及人腎近曲小管上皮細(xì)胞(HK-2細(xì)胞),探討黃芪多糖的保護(hù)作用和機(jī)制。方法 1.在注射順鉑小鼠和注射APS+順鉑小鼠中,比較血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、腎損傷因子(Kim-1)表達(dá)差異;ELISA檢測腎組織勻漿中腎損傷分子Kim-1、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(Ngal)表達(dá)差異。2.TUNEL染色檢測小鼠腎組織細(xì)胞凋亡,免疫組織化學(xué)檢測3-硝基酪氨酸(3-NT)表達(dá)差異,ELISA檢測腎組織勻漿中CuZn/Mn-SOD酶活性、總谷胱甘肽過氧化物酶活性,研究APS拮抗氧化損傷和抗凋亡作用。3.在單獨(dú)順鉑和APS+順鉑處理HK-2細(xì)胞中,CCK-8法檢測細(xì)胞活力差異;TUNEL檢測細(xì)胞凋亡,觀察APS在細(xì)胞水平的保護(hù)作用;4.DCFH-DA流式細(xì)胞術(shù)和Mito SOX?Red熒光顯微鏡檢測細(xì)胞和線粒體內(nèi)活性氧(ROS),研究APS抗氧化...

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圖2.小鼠經(jīng)不同濃度順鉑注射后72小時(shí)后血肌酐水平（Cisplatin20mg/kg組Vs.Cisplatin5mg/kg組，**P＜0.05；Cisplatin30mg/kg組Vs.Cisplatin20mg/kg組，##P<0.01）

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文24圖2.小鼠經(jīng)不同濃度順鉑注射后72小時(shí)后血肌酐水平（Cisplatin20mg/kg組Vs.Cisplatin5mg/kg組，**P＜0.05；Cisplatin30mg/kg組Vs.Cisplatin20mg/kg組，##P<0.01）。Contro....

圖3.APS改善順鉑所致小鼠急性腎損傷

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文25APS組（3）Cisplatin組（4）APS+Cisplatin組（具體干預(yù)見：方法2.2.2.實(shí)驗(yàn)分組以及順鉑誘導(dǎo)小鼠急性腎損傷模型的建立，以及圖1）。APS組小鼠血肌酐、尿素氮、Kim-1與對照Control組無差異，說明黃芪多糖不影響小鼠腎功能....

圖4.各組小鼠腎臟組織病理切片HE染色和PAS染色（原始放大×200；bar=250μm；*受損小管）

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文263.3.黃芪多糖可以減輕順鉑對腎臟的破壞將3個(gè)實(shí)驗(yàn)組小鼠的腎臟標(biāo)本組織固定及制作切片，行HE染色和PAS染色。Control組小鼠腎臟組織結(jié)構(gòu)完整；Cisplatin組小鼠腎臟組織皮髓質(zhì)區(qū)出現(xiàn)廣泛腎小管上皮細(xì)胞壞死腫脹，填塞腎小管，大量蛋白管型形成，P....

圖5.各組小鼠腎臟組織病理切片Kim-1免疫組織化學(xué)（原始放大×200倍；bar=250μmKim-1

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文273.4.黃芪多糖減少順鉑誘導(dǎo)的急性腎損傷標(biāo)志物Kim-1、Ngal在腎臟組織中的表達(dá)Kim-1是腎臟近曲小管上皮細(xì)胞一種跨膜糖蛋白，在正常腎臟中微量表達(dá)，而當(dāng)近曲小管上皮細(xì)胞受損時(shí)，表達(dá)顯著增強(qiáng)；Ngal是一種脂質(zhì)運(yùn)載蛋白，當(dāng)發(fā)生急性腎小管損傷時(shí)，Ng....

本文編號：3912524