目的:乳腺癌在全世界女性罹患癌癥統(tǒng)計中的發(fā)病率和死亡率最高。三陰性乳腺癌(TNBC)作為其中侵襲性最強的一個亞型,由于缺乏有效治療靶點,TNBC的治療手段僅限于手術(shù)、化療和放療,容易發(fā)生早期的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā),并且預(yù)后極差。對三陰性乳腺癌治療模式的進一步探索在臨床上有很大的意義。目前BRCA1/2突變已經(jīng)被證實是最常見的乳腺癌的基因突變類型,TNBC中約有80%患者同時具備BRCA1/2基因突變。聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制劑通過阻斷DNA雙鏈斷裂的修復(fù),導(dǎo)致BRCA1/2介導(dǎo)的合成致死效應(yīng),從而抑制腫瘤細胞的增殖進而殺傷腫瘤細胞。PARP抑制劑(PARPi)已成為BRCA突變腫瘤或者TNBC患者的最有前景的靶向治療方式。然而,在臨床應(yīng)用中表現(xiàn)出了一部分患者對PARP抑制劑的耐藥性,降低了臨床療效。目前PARPi的耐藥機制是一個正處于積極研究的領(lǐng)域。研究方法:以2種已經(jīng)被FDA認證的并且已經(jīng)應(yīng)用于臨床的PARPi,奧拉帕尼(Olaparib)和魯卡帕尼(Rucaparib)分別處理PARPi敏感和耐藥的細胞株,建立三陰性乳腺癌細胞系中穩(wěn)定表達的PARPi適應(yīng)性耐藥性克隆。首先通過...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 :PARP抑制劑誘導(dǎo)TNBC發(fā)生EMT
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)和處理
            2.2.2 形態(tài)學(xué)分析
            2.2.3 免疫印跡
            2.2.4 定量實時聚合酶鏈反應(yīng)
            2.2.5 微球體分析
            2.2.6 遷移試驗
            2.2.7 細胞侵襲實驗
    3 實驗結(jié)果
        3.1 PARP誘導(dǎo)TNBC細胞的散射和形態(tài)變化
        3.2 PARP在 TNBC中誘導(dǎo)EMT標(biāo)志物表達
        3.3 PARPi處理的穩(wěn)定克隆表現(xiàn)出干細胞特征
        3.4 PARP促進細胞遷移和侵襲
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :二甲雙胍逆轉(zhuǎn)PARPi誘導(dǎo)的EMT和PD-L1上調(diào)
    6 前言
    7 材料和方法
        7.1 主要試劑和儀器
            7.1.1 主要試劑
            7.1.2 主要儀器
        7.2 實驗方法
            7.2.1 細胞培養(yǎng)和治療
            7.2.2 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染
            7.2.3 流式細胞術(shù)分析
    8 實驗結(jié)果
        8.1 PARPi誘導(dǎo)TNBC腫瘤細胞的PD-L1表達上調(diào)
        8.2 二甲雙胍逆轉(zhuǎn)PARPi誘導(dǎo)的PD-L1上調(diào)
        8.3 TOPII抑制劑和二甲雙胍均可通過p-Akt調(diào)節(jié)EMT和PD-L1的表達
        8.4 PARP通過激活磷酸化Akt(p-Akt)誘導(dǎo)EMT并上調(diào)PD-L
    9 討論
    10 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述 PARP抑制劑的耐藥的機制與應(yīng)用
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3904210