背景:自噬是機(jī)體抵抗應(yīng)激、提高生存能力的重要過程。腦缺血發(fā)生后,胞內(nèi)衰老和受損的成分可經(jīng)自噬降解產(chǎn)生代謝底物被循環(huán)利用,幫助細(xì)胞維持能量穩(wěn)態(tài)并提高生存率。作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)中主要的細(xì)胞類型,腦缺血后星形膠質(zhì)細(xì)胞可通過激活自噬改變其存活及功能狀態(tài),從而對改善卒中后腦損傷及神經(jīng)功能發(fā)揮重要作用。unc-51樣激酶1(Unc-51 like kinase 1,ULK1)是啟動自噬的關(guān)鍵蛋白,雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,m TOR)可通過磷酸化ULK1的絲氨酸757位點抑制其活化。既往研究表明,應(yīng)激條件下激活的AMP依賴的蛋白激酶(Adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)可以解除m TOR對ULK1的抑制作用,從而促進(jìn)自噬發(fā)生。然而,目前關(guān)于缺血后星形膠質(zhì)細(xì)胞中AMPK/m TOR/ULK1通路對自噬調(diào)控的相關(guān)研究尚少。此外,選擇性自噬是細(xì)胞對胞內(nèi)特定成分的選擇性清除,目前有許多研究涉及絲氨酸757位點磷酸化的ULK1(p S757-ULK1)對自噬的調(diào)控,卻很少有研究探索自...

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞對照表
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 缺血性腦卒中概述
    1.2 自噬概述
        1.2.1 自噬的生理功能
        1.2.2 自噬的分子機(jī)制
        1.2.3 選擇性自噬
    1.3 自噬在缺血性腦卒中中的作用
        1.3.1 神經(jīng)元自噬與缺血性腦卒中
        1.3.2 神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞自噬與缺血性腦卒中
        1.3.3 腦內(nèi)皮細(xì)胞自噬與缺血性腦卒中
    1.4 丹酚酸B對自噬的促進(jìn)作用
    1.5 丹酚酸B在缺血性腦損傷中的作用
    1.6 展望
第2章 腦缺血損傷體內(nèi)、體外模型的建立
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗方法
        2.2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 小鼠大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系的建立
        2.3.2 小鼠大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞純度鑒定
        2.3.3 小鼠大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞OGD模型的建立
        2.3.4 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞OGD模型中SalB工作濃度的選擇
        2.3.5 小鼠MCAO模型的建立及MCAO模型中SalB給藥濃度的選擇
    2.4 討論
    2.5 結(jié)論
第3章 自噬在小鼠缺血性腦損傷模型中的神經(jīng)保護(hù)作用及SalB對其促進(jìn)作用
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 實驗方法
        3.2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞中自噬標(biāo)志物水平的上調(diào)及SalB對其促進(jìn)作用
        3.3.2 OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞自噬流的增強(qiáng)及SalB對其促進(jìn)作用
        3.3.3 自噬提高OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞的存活率及SalB對其促進(jìn)作用
        3.3.4 自噬降低OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡比率及SalB對其促進(jìn)作用
        3.3.5 自噬調(diào)節(jié)OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞炎性細(xì)胞因子的釋放及SalB對其調(diào)控作用
        3.3.6 自噬對MCAO小鼠腦梗死體積的影響及SalB的神經(jīng)保護(hù)作用
        3.3.7 自噬對MCAO小鼠神經(jīng)功能學(xué)評分的影響及SalB的神經(jīng)保護(hù)作用
    3.4 討論
    3.5 結(jié)論
第4章 AMPK/mTOR/ULK1通路對OGD后小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞中自噬的調(diào)控及SalB對其促進(jìn)作用
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗方法
        4.2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞自噬的增強(qiáng)與AMPK/mTOR/ULK信號通路的激活有關(guān)
        4.3.2 SalB通過調(diào)控AMPK/mTOR/ULK1信號通路增強(qiáng)OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞自噬
    4.4 討論
    4.5 結(jié)論
第5章 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞糖氧剝奪后pS757-ULK1的降解機(jī)制及SalB對pS757-ULK1的調(diào)控作用
    5.1 前言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 實驗材料
        5.2.2 實驗方法
        5.2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    5.3 實驗結(jié)果
        5.3.1 OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞中pS757-ULK1通過自噬降解及SalB對其降解的促進(jìn)作用
        5.3.2 OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞中pS757-ULK1降解與選擇性自噬的關(guān)系及SalB對其調(diào)控作用
        5.3.3 免疫共沉淀法探究SalB對OGD后小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞中pS757-ULK1與選擇性自噬受體連接的影響
        5.3.4 免疫熒光法探究SalB對OGD后HeLa細(xì)胞中pS757-ULK1與選擇性自噬受體連接的影響
    5.4 討論
    5.5 結(jié)論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝



本文編號：3877129