背景:自噬是機體抵抗應激、提高生存能力的重要過程。腦缺血發(fā)生后,胞內衰老和受損的成分可經自噬降解產生代謝底物被循環(huán)利用,幫助細胞維持能量穩(wěn)態(tài)并提高生存率。作為中樞神經系統(tǒng)中主要的細胞類型,腦缺血后星形膠質細胞可通過激活自噬改變其存活及功能狀態(tài),從而對改善卒中后腦損傷及神經功能發(fā)揮重要作用。unc-51樣激酶1(Unc-51 like kinase 1,ULK1)是啟動自噬的關鍵蛋白,雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,m TOR)可通過磷酸化ULK1的絲氨酸757位點抑制其活化。既往研究表明,應激條件下激活的AMP依賴的蛋白激酶(Adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)可以解除m TOR對ULK1的抑制作用,從而促進自噬發(fā)生。然而,目前關于缺血后星形膠質細胞中AMPK/m TOR/ULK1通路對自噬調控的相關研究尚少。此外,選擇性自噬是細胞對胞內特定成分的選擇性清除,目前有許多研究涉及絲氨酸757位點磷酸化的ULK1(p S757-ULK1)對自噬的調控,卻很少有研究探索自...

【文章頁數】：118 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞對照表
第1章 文獻綜述
    1.1 缺血性腦卒中概述
    1.2 自噬概述
        1.2.1 自噬的生理功能
        1.2.2 自噬的分子機制
        1.2.3 選擇性自噬
    1.3 自噬在缺血性腦卒中中的作用
        1.3.1 神經元自噬與缺血性腦卒中
        1.3.2 神經膠質細胞自噬與缺血性腦卒中
        1.3.3 腦內皮細胞自噬與缺血性腦卒中
    1.4 丹酚酸B對自噬的促進作用
    1.5 丹酚酸B在缺血性腦損傷中的作用
    1.6 展望
第2章 腦缺血損傷體內、體外模型的建立
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗方法
        2.2.3 統(tǒng)計學分析
    2.3 實驗結果
        2.3.1 小鼠大腦皮層星形膠質細胞培養(yǎng)體系的建立
        2.3.2 小鼠大腦皮層星形膠質細胞純度鑒定
        2.3.3 小鼠大腦皮層星形膠質細胞OGD模型的建立
        2.3.4 小鼠星形膠質細胞OGD模型中SalB工作濃度的選擇
        2.3.5 小鼠MCAO模型的建立及MCAO模型中SalB給藥濃度的選擇
    2.4 討論
    2.5 結論
第3章 自噬在小鼠缺血性腦損傷模型中的神經保護作用及SalB對其促進作用
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 實驗方法
        3.2.3 統(tǒng)計學分析
    3.3 實驗結果
        3.3.1 OGD后星形膠質細胞中自噬標志物水平的上調及SalB對其促進作用
        3.3.2 OGD后星形膠質細胞自噬流的增強及SalB對其促進作用
        3.3.3 自噬提高OGD后星形膠質細胞的存活率及SalB對其促進作用
        3.3.4 自噬降低OGD后星形膠質細胞的凋亡比率及SalB對其促進作用
        3.3.5 自噬調節(jié)OGD后星形膠質細胞炎性細胞因子的釋放及SalB對其調控作用
        3.3.6 自噬對MCAO小鼠腦梗死體積的影響及SalB的神經保護作用
        3.3.7 自噬對MCAO小鼠神經功能學評分的影響及SalB的神經保護作用
    3.4 討論
    3.5 結論
第4章 AMPK/mTOR/ULK1通路對OGD后小鼠星形膠質細胞中自噬的調控及SalB對其促進作用
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗方法
        4.2.3 統(tǒng)計學分析
    4.3 實驗結果
        4.3.1 OGD后星形膠質細胞自噬的增強與AMPK/mTOR/ULK信號通路的激活有關
        4.3.2 SalB通過調控AMPK/mTOR/ULK1信號通路增強OGD后星形膠質細胞自噬
    4.4 討論
    4.5 結論
第5章 小鼠星形膠質細胞糖氧剝奪后pS757-ULK1的降解機制及SalB對pS757-ULK1的調控作用
    5.1 前言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 實驗材料
        5.2.2 實驗方法
        5.2.3 統(tǒng)計學分析
    5.3 實驗結果
        5.3.1 OGD后星形膠質細胞中pS757-ULK1通過自噬降解及SalB對其降解的促進作用
        5.3.2 OGD后星形膠質細胞中pS757-ULK1降解與選擇性自噬的關系及SalB對其調控作用
        5.3.3 免疫共沉淀法探究SalB對OGD后小鼠星形膠質細胞中pS757-ULK1與選擇性自噬受體連接的影響
        5.3.4 免疫熒光法探究SalB對OGD后HeLa細胞中pS757-ULK1與選擇性自噬受體連接的影響
    5.4 討論
    5.5 結論
第6章 結論
參考文獻
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
致謝



本文編號：3877129