XAB2(Xeroderma pigmentosum group A-binding protein 2,著色性干皮病組A結(jié)合蛋白2)是2000年首次發(fā)現(xiàn)的一個(gè)高度保守的重要的多功能基因,參與了轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)錄偶聯(lián)的DNA修復(fù),pre-mRNA的剪接及同源重組修復(fù)等多個(gè)重要生命過程的調(diào)控,XAB2對(duì)小鼠的胚胎發(fā)育同樣至關(guān)重要,敲除XAB2導(dǎo)致小鼠胚胎致死。本實(shí)驗(yàn)室的前期工作發(fā)現(xiàn)XAB2能夠結(jié)合在影響天然無內(nèi)含子mRNA出核的順式作用元件上,敲低XAB2能夠明顯抑制mRNA的出核,表明XAB2也參與了mRNA出核調(diào)控。盡管XAB2蛋白在基因表達(dá)調(diào)控中發(fā)揮了重要的功能,但其下游靶基因以及在人類細(xì)胞中發(fā)揮的生理功能目前仍不是很清楚,有待進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)和研究。為此,我們首先在HeLa細(xì)胞中利用shRNA敲低XAB2,基因芯片分析顯示XAB2敲低導(dǎo)致調(diào)控細(xì)胞周期尤其是有絲分裂期相關(guān)基因(如著絲粒蛋白CENPE)的表達(dá)發(fā)生異常,提示XAB2有可能通過調(diào)控CENPE表達(dá)影響有絲分裂。有絲分裂是細(xì)胞周期的重要組成部分,它能夠保證細(xì)胞分裂過程中攜帶遺傳信息的染色體的精確分離,從而維持了親代與子代之間遺傳的穩(wěn)定性,...

【文章頁數(shù)】：140 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一部分 XAB2下調(diào)通過抑制CENPE表達(dá)影響有絲分裂的機(jī)制研究
    前言
    材料和方法
        1.實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.實(shí)驗(yàn)方法
    結(jié)果
        1.基因芯片分析顯示XAB2敲低導(dǎo)致調(diào)控細(xì)胞周期相關(guān)基因表達(dá)異常???
        2.XAB2敲低造成有絲分裂阻滯??
        3.XAB2敲低促進(jìn)有絲分裂災(zāi)難與細(xì)胞死亡??
        4.XAB2敲低導(dǎo)致染色體排列與分離異常??
        5.XAB2敲低導(dǎo)致紡錘體極、細(xì)胞核形態(tài)及微管組裝異常??
        6.XAB2敲低促進(jìn)細(xì)胞DNA損傷??
        7.XAB2敲低通過下調(diào)CENPE表達(dá)影響有絲分裂??
        8.XAB2在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控CENPE的表達(dá)??
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二部分 XAB2下調(diào)通過抑制POLR2A表達(dá)影響轉(zhuǎn)錄的機(jī)制研究
    前言
    材料和方法
        1.實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.實(shí)驗(yàn)方法
    結(jié)果
        1.XAB2敲低導(dǎo)致POLR2A下調(diào)及新生RNA減少?
        2.XAB2敲低導(dǎo)致POLR2A mRNA先于蛋白下調(diào)且mRNA的 下調(diào)不依賴于轉(zhuǎn)錄
        3.XAB2敲低導(dǎo)致嚴(yán)重的POLR2A剪接損傷?
        4.剪接抑制劑madrasin導(dǎo)致POLR2A表達(dá)及轉(zhuǎn)錄活性下降
        5.抑制翻譯或敲低Dom34 能夠恢復(fù)POLR2A的表達(dá)??
        6.XAB2與剪接體組分相互作用共同維持POLR2A的表達(dá)?…
        7.XAB2通過2-4及11-12號(hào)TPR結(jié)構(gòu)域與SNW1 作用維持POLR2A的表達(dá)??
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
總結(jié)與展望
綜述 轉(zhuǎn)錄與剪接研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號(hào)：3848728