本文關(guān)鍵詞：阻斷cx3cr1表達(dá)對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷后小膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分：視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷動(dòng)物模型的制備及視網(wǎng)膜組織病理學(xué)的改變目的 觀察視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷動(dòng)物模構(gòu)建后不同時(shí)間段視網(wǎng)膜組織OCT影像學(xué)的變化及相應(yīng)組織病理學(xué)改變的特點(diǎn)。方法采用成年SD大鼠,通過前房灌注法建立視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的動(dòng)物模型,模型建立后2h、12h、24h、48h、168h分別行視網(wǎng)膜OCT檢查及HE染色病理學(xué)檢查,并使用OCT測(cè)量大鼠視網(wǎng)膜厚度,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果與正常對(duì)照組相比,缺血再灌注2h組OCT顯示各層次結(jié)構(gòu)相對(duì)正常,12h、24h、48h組視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層水腫、厚度增加,各層結(jié)構(gòu)的分界已不能清晰顯示,呈逐漸加重趨勢(shì)。視網(wǎng)膜厚度與正常對(duì)照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,至168h視網(wǎng)膜厚度明顯減少,萎縮明顯。病理學(xué)檢查提示缺血再灌注2h組,視網(wǎng)膜輕度水腫,偶見視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層和內(nèi)核層空泡變性；12h及2411組視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層均出現(xiàn)大量空泡,厚度增加；48h水腫到達(dá)高峰；168h神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層核濃縮明顯增加,細(xì)胞數(shù)量減少、視網(wǎng)膜變薄。結(jié)論視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的主要病變趨勢(shì)為：早期以神經(jīng)纖維層和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層水腫為主要表現(xiàn),隨損傷進(jìn)展,出現(xiàn)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞消失、視網(wǎng)膜萎縮。第二部分：激活的小膠質(zhì)細(xì)胞在大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷動(dòng)物模型中的作用研究目的 探討活化的小膠質(zhì)細(xì)胞在視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷過程中的作用。方法前房灌注法建立視網(wǎng)膜缺血再灌注的動(dòng)物模型,在缺血再灌注損傷發(fā)生后2h、12h、24h、48h、72h,采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞特異性抗原標(biāo)志物CD68的表達(dá),觀察活化小膠質(zhì)細(xì)胞的分布、活化程度等指標(biāo)；同時(shí)結(jié)合相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的視網(wǎng)膜超微結(jié)構(gòu)變化,分析二者之間的關(guān)系。結(jié)果正常對(duì)照組中視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞主要位于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,缺血再灌注2h組視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞的分布部位、表達(dá)量等基本與正常對(duì)照組；缺血再灌注損傷12h視網(wǎng)膜中CD68+細(xì)胞表達(dá)增多,內(nèi)叢狀層開始陽性細(xì)胞。缺血再灌注24h組CD68+細(xì)胞表達(dá)明顯增多,部分向視網(wǎng)膜外層遷移。缺血再灌注48h組進(jìn)入視網(wǎng)膜外層的CD68+細(xì)胞多,出現(xiàn)于視網(wǎng)膜內(nèi)從狀層、內(nèi)核層、外叢狀層。缺血再灌注損傷發(fā)生后72h,活化小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量達(dá)到觀察組最高水平。視網(wǎng)膜超微結(jié)構(gòu)顯示缺血再灌注12h開始出現(xiàn)損傷表現(xiàn),RGC細(xì)胞間隙擴(kuò)大、光感受器細(xì)胞外節(jié)膜盤疏松變形、可見散在小膠質(zhì)細(xì)胞；缺血再灌注24h組RGC細(xì)胞間隙繼續(xù)擴(kuò)大、數(shù)目減少,光感受器細(xì)胞外節(jié)膜盤疏松變形、斷裂,線粒體腫脹明顯,出現(xiàn)空泡化,在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損傷附近,小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量明顯增多；缺血再灌注72h組病變繼續(xù)加重,RGCs數(shù)量明顯減少,細(xì)胞核膜腫脹溶解,細(xì)胞器溶解。光感受器細(xì)胞膜盤部分無完整膜型,成絲狀、溶解。此組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層內(nèi)可見凋亡小體、小膠質(zhì)細(xì)胞、部分胞漿內(nèi)可見光感受器外節(jié)盤膜的吞噬體,直接證明了小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)光感受器的損傷作用。結(jié)論隨視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷發(fā)生及進(jìn)展,出現(xiàn)明顯小膠質(zhì)細(xì)胞活化,與視網(wǎng)膜超微結(jié)構(gòu)損傷呈一致性,活化的小膠質(zhì)細(xì)胞在視網(wǎng)膜超微結(jié)構(gòu)的損傷中發(fā)揮著重要作用。第三部分：阻斷cx3crl表達(dá)對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷后小膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)元影響的實(shí)驗(yàn)研究目的 探討阻斷cx3crl表達(dá)對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響及對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用,以及玻璃體腔注射治療的安全性。方法將實(shí)驗(yàn)大鼠分為正常對(duì)照組、空白干預(yù)組、陽性對(duì)照組、及抗體干預(yù)組�？贵w干預(yù)組采用玻璃體腔注射抗cx3crl,檢測(cè)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡情況、免疫組織化學(xué)法檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞活化的抑制程度、PCR檢測(cè)相關(guān)炎性因子分泌表達(dá)情況,與正常對(duì)照組及陽性干預(yù)組對(duì)比分析,同時(shí)觀察空白干預(yù)組中抗cx3crl對(duì)視網(wǎng)膜組織的影響。結(jié)果與陽性對(duì)照組相比,抗體干預(yù)組大鼠視網(wǎng)膜cx3crl表達(dá)下調(diào)、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡水平受到明顯抑制,超微結(jié)構(gòu)及炎性因子分泌的定量檢測(cè)證實(shí)其作用機(jī)制為包括小膠質(zhì)細(xì)胞活化抑制后對(duì)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞吞噬能力的降低,及炎癥因子分泌抑制避免過度炎癥反應(yīng)造成的損傷。同時(shí)正常干預(yù)組與空白對(duì)照組未見明顯差異,證明玻璃體腔注射cx3crl是安全可行的。結(jié)論抑制cx3crl的表達(dá)可明顯抑制視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞活化,從而保護(hù)缺血再灌注損傷中的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。
【關(guān)鍵詞】：視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷 動(dòng)物模型 OCT HE染色 視網(wǎng)膜厚度 視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞 缺血再灌注損傷 CD68 電鏡 免疫組織化學(xué) cx3crl 小膠質(zhì)細(xì)胞 TNF-a 凋亡 免疫組化 RT-PCR
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R774.1
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 縮略詞表10-12
• 前言12-16
• 第一部分 視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷動(dòng)物模型制備及相關(guān)組織病理學(xué)改變的研究16-35
• 材料與設(shè)備17-18
• 實(shí)驗(yàn)方法18-22
• 結(jié)果22-27
• 討論27-32
• 結(jié)論32
• 關(guān)于本部分xO究的創(chuàng)新與不足32-33
• 參考文獻(xiàn)33-35
• 第二部分 激活的小膠質(zhì)細(xì)胞在大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷動(dòng)物模型中的作用研究35-56
• 材料與設(shè)備36-37
• 實(shí)驗(yàn)方法37-39
• 結(jié)果39-48
• 討論48-52
• 結(jié)論52-53
• 關(guān)于本部分研究的創(chuàng)新與不足53
• 參考文獻(xiàn)53-56
• 第三部分 阻斷cx3cr1表達(dá)對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷后小膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究56-84
• 材料與設(shè)備57-58
• 實(shí)驗(yàn)方法58-64
• 結(jié)果64-77
• 討論77-80
• 結(jié)論80-81
• 關(guān)于本部分xO究的創(chuàng)新與不足81
• 參考文獻(xiàn)81-84
• 全文總結(jié)84-85
• 綜述一85-94
• 參考文獻(xiàn)90-94
• 綜述二94-100
• 參考文獻(xiàn)98-100
• 文章發(fā)表及學(xué)術(shù)交流100-102
• 致謝102

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李彤;趙建峰;;鈣離子通道阻滯劑在視網(wǎng)膜缺血損傷中的應(yīng)用[J];中國眼耳鼻喉科雜志;2003年04期

2 程輝;李秀云;鞠學(xué)紅;;大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注模型的建立與觀察[J];解剖學(xué)研究;2009年02期

3 王浩;劉索新;鞠學(xué)紅;;視網(wǎng)膜缺血再灌注模型的建立與觀察研究進(jìn)展[J];國際眼科雜志;2012年10期

4 費(fèi)佩芬;;糖尿病性視網(wǎng)膜病變的視網(wǎng)膜缺血[J];國外醫(yī)學(xué)參考資料.眼科學(xué)分冊(cè);1977年01期

5 劉哲峰,劉英奇;視網(wǎng)膜缺血的電生理和形態(tài)學(xué)研究的進(jìn)展[J];眼科新進(jìn)展;1986年02期

6 劉哲峰;劉英奇;張希蘭;孫芳娥;雷建章;李淑榮;劉貴生;;實(shí)驗(yàn)性視網(wǎng)膜缺血的超微結(jié)構(gòu)研究[J];河北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1988年01期

7 周浩,周韻秋,高洪瑞,蔡季平,王強(qiáng);視網(wǎng)膜缺血對(duì)兔視神經(jīng)纖維損害的定量研究[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1998年03期

8 楊楠,李莉,劉業(yè)滋;視網(wǎng)膜缺血的藥物防治[J];中國冶金工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;1998年06期

9 過貴元,張忠,吳生泉,申洪;大鼠視網(wǎng)膜缺血的組織學(xué)觀察[J];福建醫(yī)藥雜志;2001年04期

10 王琳,Nahoko Ogata,Kanji Takahashi,惠延年;色素上皮衍生因子對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J];中華眼底病雜志;2001年02期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 過貴元;申洪;;大鼠視網(wǎng)膜缺血眼底鏡下形態(tài)學(xué)變化的觀察[A];首屆粵港生物物理學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];1999年

2 吳雅臻;李漫麗;戚卉;李沭巖;崔妤;;大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注后葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78的時(shí)相性表達(dá)及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

3 何凡;唐羅生;;組織蛋白酶B在視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷中的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

4 李娜;李筱榮;袁佳琴;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植在視網(wǎng)膜缺血再灌注大鼠中的實(shí)驗(yàn)研究[A];中國眼底病論壇·全國眼底病專題學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

5 宋毅;吳星偉;宮嬡嬡;解正高;;依達(dá)拉奉對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

6 羅敏;李瑾;范先群;趙莼;;非球面人工晶狀體視覺質(zhì)量的初步評(píng)價(jià)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

7 張鳳霞;趙玲;趙素華;;大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷過程中Survivin,Caspase-3和IL-1a的動(dòng)態(tài)變化及意義[A];中華護(hù)理學(xué)會(huì)2009全國五官科護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會(huì)議論文匯編[C];2009年

8 王予偉;楊廷桐;張鄧民;衡昆山;;大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注血清中IL—1的動(dòng)態(tài)性表達(dá)的生物學(xué)意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

9 陳芝清;姚克;;E-64-D對(duì)視網(wǎng)膜缺血再灌注中的抑制Calpain上調(diào)的初步研究[A];2005年浙江省眼科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

10 肖迎;張效房;金學(xué)民;張金嵩;;神經(jīng)節(jié)苷脂GM-1對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 中國中醫(yī)科學(xué)院眼科醫(yī)院 周尚昆;糖尿病性視網(wǎng)膜病變 防治宜早不宜遲[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2010年

2 冀京蕊;眼睛缺血莫大意[N];中國婦女報(bào);2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李娟娟;阻斷cx3cr1表達(dá)對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷后小膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

2 張薇;缺氧預(yù)處理對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注的保護(hù)作用的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

3 陳芝清;鈣蛋白酶在高眼壓誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷發(fā)生機(jī)制中的作用[D];浙江大學(xué);2008年

4 喬淑紅;促紅細(xì)胞生成素對(duì)視網(wǎng)膜缺血及視網(wǎng)膜變性的防治作用[D];青島大學(xué);2005年

5 李漫麗;葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78基因轉(zhuǎn)染對(duì)視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的保護(hù)作用研究[D];吉林大學(xué);2008年

6 陳

本文編號(hào)：379340