多孔n-HA/PGS -M復(fù)合支架的制備及其材料學(xué)特性和體內(nèi)外生物學(xué)特性的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2023-04-15 00:33
背景:骨缺損疾病的治療始終是困擾臨床骨科醫(yī)生的一大難題。盡管目前采用自體骨或同種異體骨填充骨缺損進(jìn)行重建有較好的臨床效果,但其來(lái)源受限以及取材部位并發(fā)癥等缺點(diǎn)限制其在臨床上的廣泛應(yīng)用。隨著骨組織工程等學(xué)科在天然材料改進(jìn)或人工合成材料制備等方面的發(fā)展為用于骨缺損治療的移植材料選擇方面提供了希望。利用人工合成有機(jī)和無(wú)機(jī)材料制備成的復(fù)合支架材料有多方面的性能優(yōu)勢(shì),如生物相容性好,可降解性和韌性高等而受到研發(fā)以及臨床工作者的廣泛重視。人工合成高分子復(fù)合材料具有良好的力學(xué)性能,且可降解,復(fù)合材料在完成其功能之后,直接在體內(nèi)降解,避免了二次手術(shù)。聚癸二酰甘油酯(PGS)是一種可降解的高分子材料,因具有良好的體內(nèi)相容性和生物活性,在臨床研究中廣泛被應(yīng)用。馬來(lái)酸酐(MAH)能通過(guò)為復(fù)合物提供羧基和羥基促進(jìn)成骨細(xì)胞的粘附、增殖和分化,促進(jìn)組織形成和生長(zhǎng),提升復(fù)合物的性能。納米羥基磷灰石(n-HA)作為骨和牙齒最主要的無(wú)機(jī)成分,這種材料不會(huì)引發(fā)明顯排異反應(yīng),但由于其脆性限制了其應(yīng)用范圍。將聚癸二酰甘油酯(PGS)接枝馬來(lái)酸軒(MAH)制備成一種可降解的新型高分子材料(PGS-M),促進(jìn)成骨細(xì)胞粘附、增殖和...
【文章頁(yè)數(shù)】:120 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
第1章 緒論
1.1 前言
1.2 骨缺損主要原因
1.3 骨缺損主要治療材料
1.4 骨組織工程的發(fā)展前景
1.5 骨組織工程的免疫研究
1.6 本論文目標(biāo)內(nèi)容及創(chuàng)新
第2章 材料制備及表征
2.1 前言
2.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 制備PGS-M
2.3.2 制備PGS-M-n-HA
2.3.3 氫核磁共振譜(H-NMR)分析化學(xué)結(jié)構(gòu)
2.3.4 傅立葉紅外光譜儀(FT-IR)分析化學(xué)結(jié)構(gòu)
2.3.5 掃描電鏡(SEM)檢測(cè)材料表面形態(tài)孔隙,液體置換法測(cè)定孔隙率
2.3.6 熱學(xué)性能測(cè)試
2.3.7 降解性能測(cè)試
2.3.8 力學(xué)性能測(cè)試
2.4 結(jié)果
2.4.1 PGS-M-n-HA的化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
2.4.2 PGS-M-n-HA的孔隙結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
2.4.3 PGS-M-n-HA的熱學(xué)性能特點(diǎn)
2.4.4 PGS-M-n-HA的降解性能
2.4.5 PGS-M-n-HA的力學(xué)性能特點(diǎn)
2.4.6 討論
2.5 結(jié)論
第3章 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)n-HA/PGS-M復(fù)合支架材料生物學(xué)性能
3.1 前言
3.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
3.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3.1 細(xì)胞分離、培養(yǎng)和鑒定
3.3.2 細(xì)胞懸液制備
3.3.3 接種細(xì)胞
3.3.4 材料處理
3.3.5 CCK-8 實(shí)驗(yàn)
3.3.6 RNA提取
3.3.7 q PCR實(shí)驗(yàn)
3.3.8 WB檢測(cè)蛋白表達(dá)
3.3.9 免疫熒光
3.3.10 細(xì)胞支架材料在模擬體液中的生物活性檢測(cè)
3.3.11 結(jié)果統(tǒng)計(jì)
3.4 生物學(xué)性能檢測(cè)的結(jié)果
3.4.1 PGS-M-n-HA復(fù)合材料的細(xì)胞活性檢測(cè)
3.4.2 PGS-M-n-HA復(fù)合材料的成骨分化能力
3.4.3 PGS-M-n-HA復(fù)合材料引起的炎癥反應(yīng)
3.4.4 PGS-M-n-HA復(fù)合材料引起的細(xì)胞凋亡情況
3.4.5 PGS-M-n-HA復(fù)合材料的鈣磷沉淀能力
3.5 討論
3.6 結(jié)論
第4章n-HA/PGS-M復(fù)合支架體內(nèi)促進(jìn)成骨功能
4.1 前言
4.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 動(dòng)物模型的建立
4.3.2 肉眼大體觀(guān)察
4.3.3 薄層三維CT掃描
4.3.4 組織學(xué)觀(guān)察染色
4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
4.4.1 大體觀(guān)察與顱骨取材時(shí)外觀(guān)
4.4.2 CT檢測(cè)骨缺損處新骨生成和灰度值統(tǒng)計(jì)
4.4.3 HE組織切片的觀(guān)察
4.4.4 討論
4.5 結(jié)論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及科研成果
致謝
本文編號(hào):3790877
【文章頁(yè)數(shù)】:120 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
第1章 緒論
1.1 前言
1.2 骨缺損主要原因
1.3 骨缺損主要治療材料
1.4 骨組織工程的發(fā)展前景
1.5 骨組織工程的免疫研究
1.6 本論文目標(biāo)內(nèi)容及創(chuàng)新
第2章 材料制備及表征
2.1 前言
2.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 制備PGS-M
2.3.2 制備PGS-M-n-HA
2.3.3 氫核磁共振譜(H-NMR)分析化學(xué)結(jié)構(gòu)
2.3.4 傅立葉紅外光譜儀(FT-IR)分析化學(xué)結(jié)構(gòu)
2.3.5 掃描電鏡(SEM)檢測(cè)材料表面形態(tài)孔隙,液體置換法測(cè)定孔隙率
2.3.6 熱學(xué)性能測(cè)試
2.3.7 降解性能測(cè)試
2.3.8 力學(xué)性能測(cè)試
2.4 結(jié)果
2.4.1 PGS-M-n-HA的化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
2.4.2 PGS-M-n-HA的孔隙結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
2.4.3 PGS-M-n-HA的熱學(xué)性能特點(diǎn)
2.4.4 PGS-M-n-HA的降解性能
2.4.5 PGS-M-n-HA的力學(xué)性能特點(diǎn)
2.4.6 討論
2.5 結(jié)論
第3章 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)n-HA/PGS-M復(fù)合支架材料生物學(xué)性能
3.1 前言
3.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
3.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3.1 細(xì)胞分離、培養(yǎng)和鑒定
3.3.2 細(xì)胞懸液制備
3.3.3 接種細(xì)胞
3.3.4 材料處理
3.3.5 CCK-8 實(shí)驗(yàn)
3.3.6 RNA提取
3.3.7 q PCR實(shí)驗(yàn)
3.3.8 WB檢測(cè)蛋白表達(dá)
3.3.9 免疫熒光
3.3.10 細(xì)胞支架材料在模擬體液中的生物活性檢測(cè)
3.3.11 結(jié)果統(tǒng)計(jì)
3.4 生物學(xué)性能檢測(cè)的結(jié)果
3.4.1 PGS-M-n-HA復(fù)合材料的細(xì)胞活性檢測(cè)
3.4.2 PGS-M-n-HA復(fù)合材料的成骨分化能力
3.4.3 PGS-M-n-HA復(fù)合材料引起的炎癥反應(yīng)
3.4.4 PGS-M-n-HA復(fù)合材料引起的細(xì)胞凋亡情況
3.4.5 PGS-M-n-HA復(fù)合材料的鈣磷沉淀能力
3.5 討論
3.6 結(jié)論
第4章n-HA/PGS-M復(fù)合支架體內(nèi)促進(jìn)成骨功能
4.1 前言
4.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 動(dòng)物模型的建立
4.3.2 肉眼大體觀(guān)察
4.3.3 薄層三維CT掃描
4.3.4 組織學(xué)觀(guān)察染色
4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
4.4.1 大體觀(guān)察與顱骨取材時(shí)外觀(guān)
4.4.2 CT檢測(cè)骨缺損處新骨生成和灰度值統(tǒng)計(jì)
4.4.3 HE組織切片的觀(guān)察
4.4.4 討論
4.5 結(jié)論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及科研成果
致謝
本文編號(hào):3790877
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