研究背景及目的:Hippo信號通路異常會導致胃癌發(fā)生和進展。Hippo信號通路的核心成分主要受泛素-蛋白酶體調控,如LATS1/2激酶結構域PPx Y序基能與WD40結構域直接結合并被泛素化、降解。F-box蛋白家族是SCF(Skp1-Cullin1-F-box protein)E3連接酶復合物中的重要一員,發(fā)揮特異性識別底物的功能,FBXW5作為F-box蛋白家族的新成員,含有重復的WD40結構片段,然而其在胃癌中的作用還不清楚。本研究旨在探討FBXW5與Hippo信號通路的關系及其在胃癌中的臨床意義。研究方法:利用生物信息學分析網(wǎng)站或工具分析FBXW5的表達及其預后意義、分析FBXW5與Hippo通路下游相關癌基因表達的關系;利用免疫組織化學法分析臨床胃癌石蠟樣本中各蛋白的表達以及分析裸鼠皮下瘤體中各蛋白的表達;蛋白免疫印跡法(Western blot)分析新鮮臨床標本及裸鼠瘤體中FBXW5的表達,及各樣本或細胞中FBXW5蛋白與Hippo通路相關蛋白的調控關系;利用熒光定量PCR探討FBXW5對Hippo通路相關癌基因的調控作用;免疫熒光法用于探討YAP1的細胞內定位的改變;Tr...

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
前言
    胃癌治療靶點的研究概述
    Hippo信號通路概述
    泛素化概述
第一部分 FBXW5 在胃癌中的表達以及臨床意義
    1.引言
    2.材料及方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3.結果
        3.1 FBXW5 在人類常見惡性腫瘤中廣泛表達
        3.2 FBXW5 在胃癌中的表達及其與預后的關系
    4.討論
    5.結論
第二部分 FBXW5 促進胃癌細胞的侵襲、轉移及耐藥
    1.引言
    2.材料及方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3.實驗結果
        3.1 檢驗FBXW5 干擾及過表達的轉染效能
        3.2 FBXW5 促進胃癌細胞的侵襲、遷移及EMT
        3.3 FBXW5 促進胃癌細胞的耐藥
    4.討論
    5.結論
第三部分 FBXW5對Hippo信號通路的調控
    1.引言
    2.材料及方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3.實驗結果
        3.1 FBXW5 調控Hippo信號通路下游靶基因的表達
        3.2 FBXW5 在胃癌細胞中調控Hippo信號通路
        3.3 FBXW5 結合LATS1 并促進其降解
        3.4 FBXW5 促進LATS1 蛋白的泛素化
        3.5 阻斷LATS1-YAP1 導致FBXW5對Hippo通路的調控喪失
        3.6 裸鼠成瘤實驗驗證FBXW5 的功能及機制
    4.討論
    5.結論
全文總結
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3788233