[目的]篩選系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者外周靜脈血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)中在轉(zhuǎn)錄水平與正常對(duì)照具有顯著差異表達(dá)的基因;驗(yàn)證ETS1的表達(dá)水平,并分析該基因的表達(dá)與單核苷酸多態(tài)性(SNP)的相關(guān)性,探索SNP影響ETS1表達(dá)及其在B淋巴細(xì)胞中的機(jī)制及功能效應(yīng);根據(jù)SNP的基因位置,尋找影響ETS1變化的上游機(jī)制,并檢測(cè)下游ETS1對(duì)B細(xì)胞功能的影響;同時(shí),探索SNP對(duì)SLE患者不同臨床表現(xiàn)的影響。本研究將為臨床早期診斷和疾病預(yù)后提供潛在標(biāo)記物。[方法]收集3例SLE患者和3例健康對(duì)照的外周靜脈血,用二代測(cè)序技術(shù)篩查PBMC中具有顯著差異性表達(dá)的基因,進(jìn)而通過GO、KEGG和Cytoscape分析顯著差異表達(dá)基因(DEGs)的富集情況。擴(kuò)大樣本量后,用定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)檢測(cè)ETS1在兩組樣本PBMC、B和Th淋巴細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)水平,SNaPshot技術(shù)進(jìn)行基因分型;構(gòu)建rs4937333位點(diǎn)為野生型C或突變型T的ETS1質(zhì)粒并包裝慢病毒,感染SLE患者外周靜脈血B淋巴細(xì)胞,用qPCR和蛋白免疫印跡法(Western Blot,WB)檢測(cè)并比較ETS1的表達(dá)。進(jìn)而將不同等位基因質(zhì)...

【文章頁數(shù)】：160 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 高通量測(cè)序分析
    引言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論及小結(jié)
第二部分 SLE患者淋巴細(xì)胞ETS1及其SNP檢測(cè)
    引言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論及小結(jié)
第三部分 SNP通過ETS1影響B(tài)細(xì)胞的分化
    引言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論及小結(jié)
第四部分 miR-5003影響ETS1突變位點(diǎn)的功能
    引言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論及小結(jié)
全文總結(jié)
局限性
展望
參考文獻(xiàn)
附錄
綜述 ETS1在狼瘡B細(xì)胞和Th細(xì)胞中作用機(jī)制的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果
致謝



本文編號(hào)：3787240