背景:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種以滑膜炎為主要病理改變的系統(tǒng)性炎癥性自身免疫病,全球發(fā)病率約為0.5-1.0%。我國大陸地區(qū)患病率約為0.42%,總患病人數(shù)約500萬。目前,我國的RA治療效果尚不理想,據(jù)估計(jì)有超過50%的中國RA患者,在診斷后沒有經(jīng)過規(guī)范治療。作為一種常見的致殘性疾病,本病的長期治療及預(yù)后不佳,給患者家庭及社會帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此,迫切需要探求早期診斷、評估病情的生物標(biāo)志物及有效的治療靶點(diǎn)。細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子(suppressor of cytokine signaling,SOCS)家族是特征性SOCS盒胞漿蛋白分子家族。SOCS是細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)的經(jīng)典抑制劑,由SOCS1-7和CIS等8種成分組成。其中,SOCS1在免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。SOCS1的SH2結(jié)構(gòu)域可直接與激活的Janus激酶(JAKs)環(huán)結(jié)合,且通過其激酶抑制區(qū)域直接抑制JAK酪氨酸激酶活性。并且Janus激酶/信號傳導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子(Janus kinase-signal transducer and activator of trans...

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 外周血SOCS1 mRNA與 RA相關(guān)性的系統(tǒng)評價(jià)
    2.1 前言
    2.2 資料
        2.2.1 文獻(xiàn)檢索
        2.2.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)
        2.2.3 結(jié)局指標(biāo)
    2.3 方法
        2.3.1 文獻(xiàn)篩選
        2.3.2 質(zhì)量評價(jià)
        2.3.3 資料提取
        2.3.4 數(shù)據(jù)分析
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 文獻(xiàn)檢索
        2.4.2 納入文獻(xiàn)的一般特征及文獻(xiàn)評價(jià)
        2.4.3 Meta分析結(jié)果
    2.5 討論
    2.6 結(jié)論
第3章 RA患者PBL中miR-150-5p、SOCS1 mRNA的表達(dá)及其臨床意義
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 研究對象和實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 納入受試者
        3.3.2 收集患者及健康對照者一般資料
        3.3.3 RT-PCR法測定miR-150-5p的表達(dá)水平
        3.3.4 RT-PCR法測定SOCS1mRNA的表達(dá)水平
        3.3.5 ELISA法測定RA患者血清炎癥細(xì)胞因子水平
        3.3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 一般臨床資料及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)
        3.4.2 RA患者PBL中 miR-150-5p表達(dá)水平的變化
        3.4.3 RA患者PBL中 SOCS1 mRNA表達(dá)水平的變化
        3.4.4 RA患者外周血TNF-α、IL-6及IL-21 表達(dá)水平的變化
        3.4.5 miR-150-5p、SOCS1 mRNA對 RA診斷的預(yù)測分析
        3.4.6 miR-150-5p與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)及臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析
        3.4.7 SOCS1 mRNA與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)及臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析
    3.5 討論
    3.6 結(jié)論
第4章 miR-150-5p對 RASFs細(xì)胞生長和SOCS1 表達(dá)的影響
    4.1 前言
    4.2 材料
        4.2.1 細(xì)胞株
        4.2.2 購置試劑
        4.2.3 主要儀器設(shè)備及耗材
    4.3 方法
        4.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.3.2 miR-150-5p mimic及miR-150-5p NC的設(shè)計(jì)及合成
        4.3.3 克隆載體的構(gòu)建
        4.3.4 雙熒光素酶試驗(yàn)
        4.3.5 流式細(xì)胞學(xué)方法檢測細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期
        4.3.6 CCK8 法測定細(xì)胞增殖水平
        4.3.7 RT-PCR測定miR-150-5p的表達(dá)水平
        4.3.8 RT-PCR測定SOCS1 m RNA的表達(dá)
        4.3.9 Western Blot蛋白測定
        4.3.10 ELISA測定TNF-α、IL-6 的表達(dá)水平
        4.3.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    4.4 結(jié)果
        4.4.1 miR-150-5p促進(jìn)MH7A細(xì)胞生長
        4.4.2 miR-150-5p靶向結(jié)合于SOCS1 基因
        4.4.3 miR-150-5p抑制SOCS1m RNA的表達(dá)
        4.4.4 miR-150-5p對SOCS1 蛋白及JAK2/ STAT3 蛋白的影響
        4.4.5 miR-150-5p對MH7A細(xì)胞IL-6 及TNF-α 的影響
    4.5 討論
    4.6 結(jié)論
第5章 全文總結(jié)與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3782521