目的:通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn),觀察中藥復(fù)方冠心康改善ERK5-MKO/LDLR^-/-小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊和巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號(hào)分子的表達(dá)情況,特別是從ERK5信號(hào)通路調(diào)控巨噬細(xì)胞胞葬作用來探討冠心康抗動(dòng)脈粥樣硬化的可能機(jī)制。方法:(1)ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型評價(jià)采用ERK5-MKO/LDLR^-/-小鼠,高脂飲食法喂養(yǎng)24周,建立ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型。通過分析小鼠的體重、血脂水平和主動(dòng)脈病理形態(tài)等來評價(jià)小鼠模型。(2)組織病理檢測為了檢測各種干預(yù)措施對動(dòng)脈粥樣硬化斑塊大小和易損性的影響,取小鼠主動(dòng)脈根進(jìn)行如下檢測:H&E染色檢測斑塊大小,油紅O染色檢測斑塊脂質(zhì)含量,Masson染色檢測膠原蛋白含量,免疫組化染色檢測斑塊巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞含量,免疫熒光染色檢測凋亡細(xì)胞含量。(3)實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot為了進(jìn)一步探討各種干預(yù)措施調(diào)控巨噬細(xì)胞胞葬功能的作用機(jī)制,用RT-q PCR和Western blot技術(shù)檢測小鼠主動(dòng)脈...

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
ABSTRACT
引言
第一部分 ERK5基因?qū)?dòng)脈粥樣硬化小鼠巨噬細(xì)胞胞葬作用的影響
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2. 主要實(shí)驗(yàn)試劑、耗材
        1.3. 主要儀器和耗材
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1. 小鼠基因型鑒定方法
        2.2. 小鼠AS斑塊模型的建立方法
        2.3. 取材和組織保存
        2.4. 小鼠的一般情況及外周血脂水平的檢測
        2.5. 小鼠AS主動(dòng)脈根晚期斑塊病理學(xué)的檢測
        2.6. Western blot檢測各組主動(dòng)脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號(hào)分子的蛋白表達(dá)量
        2.7. TRIzol法提取總RNA、反轉(zhuǎn)錄和實(shí)時(shí)定量PCR
        2.8. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1. 小鼠基因型的鑒定結(jié)果
        3.2. ERK5基因敲除對AS小鼠體重的影響
        3.3. ERK5基因敲除對AS小鼠血脂的影響
        3.4. ERK5基因敲除對AS主動(dòng)脈根斑塊大小的影響
        3.5. ERK5基因敲除對AS主動(dòng)脈根斑塊處凋亡情況的影響
        3.6. ERK5基因敲除對AS主動(dòng)脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號(hào)分子基因表達(dá)情況的影響
        3.7. ERK5基因敲除對AS主動(dòng)脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號(hào)分子蛋白表達(dá)情況的影響
    4.分析和討論
        4.1. 動(dòng)脈粥樣硬化的認(rèn)識(shí)
        4.2. 動(dòng)脈粥樣硬化的形成機(jī)制
        4.3. 胞葬作用的相關(guān)信號(hào)分子
        4.4. ERK5和巨噬細(xì)胞胞葬功能
        4.5. ERK5的認(rèn)識(shí)
        4.6. ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣模型小鼠
    5.小結(jié)
第二部分 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣硬化小鼠巨噬細(xì)胞胞葬作用的影響
    1.實(shí)驗(yàn)耗材
        1.1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2. 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.3. 主要實(shí)驗(yàn)試劑、耗材
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1. 實(shí)驗(yàn)分組、飼養(yǎng)以及給藥方法
        2.2. 取材和組織保存
        2.3. 小鼠的一般情況及外周血脂水平的檢測
        2.4. 小鼠AS主動(dòng)脈根晚期斑塊病理學(xué)的檢測
        2.5. Western blot檢測各組主動(dòng)脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號(hào)分子的蛋白表達(dá)量
        2.6. TRIzol法提取總RNA、反轉(zhuǎn)錄和實(shí)時(shí)定量PCR
        2.7. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣硬化小鼠體重的影響
        3.2. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣硬化小鼠血脂的影響
        3.3. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣硬化小鼠主動(dòng)脈根斑塊大小的影響
        3.4. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣硬化小鼠主動(dòng)脈根斑塊穩(wěn)定性的評價(jià)
        3.5. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣硬化小鼠主動(dòng)脈根斑塊處細(xì)胞凋亡情況的影響
        3.6. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣硬化小鼠主動(dòng)脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號(hào)分子各基因表達(dá)情況的影響
        3.7. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動(dòng)脈粥樣硬化小鼠主動(dòng)脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號(hào)分子各蛋白表達(dá)情況的影響
    4.討論
        4.1. AS易損斑塊的產(chǎn)生
        4.2. 巨噬細(xì)胞胞葬作用防治AS的研究進(jìn)展
        4.3. 中醫(yī)學(xué)對動(dòng)脈粥樣硬化的認(rèn)識(shí)
        4.4. 冠心康抗動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性研究
        4.5. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR^-/-小鼠的血脂異常
        4.6. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR^-/-小鼠的斑塊易損性
        4.7. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR^-/-小鼠的巨噬細(xì)胞胞葬功能
    5.小結(jié)
創(chuàng)新點(diǎn)
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄一 文獻(xiàn)綜述 ERK5介導(dǎo)炎癥性疾病的研究進(jìn)展
        參考文獻(xiàn)
    附錄二 已發(fā)表文章
    附錄三
    附錄四 參與課題及學(xué)術(shù)會(huì)議



本文編號(hào)：3782469