骨組織修復(fù)與再生的關(guān)鍵問(wèn)題是骨組織修復(fù)或替換材料與骨組織的適配性及體內(nèi)礦化性能。本研究針對(duì)骨組織修復(fù)與再生對(duì)支架材料礦化性能的要求,利用“堿性磷酸酶(ALP)調(diào)控透析礦化”的方法制備了一種與天然骨組織的結(jié)構(gòu)和組成相近的納米羥基磷灰石/殼聚糖(n-HAP/CS)復(fù)合支架材料,并對(duì)其進(jìn)行了初步的生物學(xué)評(píng)價(jià)。本研究以分級(jí)多孔的三維CS支架為基質(zhì)材料,利用“ALP調(diào)控透析礦化”方法,制備了三維n-HAP/CS復(fù)合支架材料。主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)是:以ALP為調(diào)控酶,甘油磷酸鈣(Ca-GP)和Ca Cl₂為礦化過(guò)程中鈣磷源,借助慢速、溫和且深度的ALP調(diào)控透析礦化過(guò)程,制備了骨組織修復(fù)材料。研究結(jié)果表明礦化液中ALP、Ca-GP和Ca Cl₂的濃度分別為0.4 mg/m L、95 mmol/L、64 mmol/L時(shí),礦化48 h后,支架材料表面均勻的沉積了一層n-HAP顆粒,n-HAP/CS支架的壓縮模量為4.38±0.31 MPa,與純的CS支架(2.65±0.39 MPa)相比具有顯著提高。為探究n-HAP/CS對(duì)細(xì)胞行為的影響及體內(nèi)骨組織修復(fù)的可行性,本研究...

【文章頁(yè)數(shù)】：124 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 生物材料簡(jiǎn)介
    1.2 骨組織修復(fù)與再生
        1.2.1 組織工程支架材料
        1.2.2 CS及其衍生物在骨組織修復(fù)與再生中的應(yīng)用
    1.3 生物礦化
        1.3.1 生物礦化過(guò)程
        1.3.2 鈣磷鹽在礦化中的作用
    1.4 種子細(xì)胞
        1.4.1 干細(xì)胞
        1.4.2 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞
    1.5 液晶及其應(yīng)用
        1.5.1 液晶在生物體內(nèi)的存在形式
        1.5.2 液晶的分類(lèi)
        1.5.3 膽甾型液晶
    1.6 本論文的研究?jī)?nèi)容與方法
        1.6.1 研究背景
        1.6.2 本論文研究?jī)?nèi)容
        1.6.3 擬解決的關(guān)鍵性科學(xué)問(wèn)題
第二章 堿性磷酸酶調(diào)控透析礦化體系的構(gòu)建
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 ALP調(diào)控礦化體系構(gòu)建
        2.3.2 CS支架材料的制備
        2.3.3 n-HAP/CS支架材料的制備
    2.4 材料結(jié)構(gòu)與性能表征
        2.4.1 UV分析
        2.4.2 XRD分析
        2.4.3 SEM觀察
        2.4.4 FT-IR分析
        2.4.5 TG分析
        2.4.6 孔隙率測(cè)定
    2.5 結(jié)果與討論
        2.5.1 ALP調(diào)控礦化體系分析
        2.5.2 ALP調(diào)控CS支架礦化分析
    2.6 本章小結(jié)
第三章 納米羥基磷灰石/殼聚糖支架的生物學(xué)評(píng)價(jià)
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 體外實(shí)驗(yàn)
        3.3.1 材料準(zhǔn)備
        3.3.2 細(xì)胞相容性分析
        3.3.3 細(xì)胞分化分析
    3.4 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)
        3.4.1 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
        3.4.2 實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建
        3.4.3 影像學(xué)評(píng)估
        3.4.4 組織學(xué)觀察
    3.5 結(jié)果與討論
        3.5.1 體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
        3.5.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
    3.6 本章小結(jié)
第四章 納米羥基磷灰石/殼聚糖/臍帶干細(xì)胞復(fù)合體系的構(gòu)建及其生物學(xué)評(píng)價(jià)
    4.1 引言
    4.2 試劑與材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.3 h UCMSCs的提取與鑒定
        4.3.1 h UCMSCs提取
        4.3.2 h UCMSCs的培養(yǎng)與鑒定
    4.4 h UCMSCs在 n-HAP/CS復(fù)合支架上的增殖與分化
        4.4.1 細(xì)胞增殖
        4.4.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        4.4.3 細(xì)胞定向分化分析
    4.5 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)
        4.5.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建
        4.5.2 影像學(xué)評(píng)估
        4.5.3 組織形態(tài)學(xué)分析
    4.6 結(jié)果與討論
        4.6.1 體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
        4.6.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
    4.7 本章小結(jié)
第五章 堿性磷酸酶調(diào)控液晶/殼聚糖復(fù)合支架礦化初探
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 材料制備
        5.3.2 性能分析
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 CN-COC二元共混體系的性能表征
        5.4.2 LC₃₀/CS復(fù)合支架的性能表征
        5.4.3 HLC復(fù)合支架的性能研究
    5.5 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
    6.1 全文總結(jié)
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 問(wèn)題與建議
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間取得學(xué)術(shù)成果
致謝



本文編號(hào)：3752842