目的:探討NLRP3/IL-1β/TGF-β1信號軸在矽肺纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用;以NLRP3/IL-1β/TGF-β1信號軸為靶點(diǎn)探討木犀草素對矽肺纖維化的拮抗效應(yīng)。方法:SPF級Wistar雄性大鼠,隨機(jī)分為高、中、低劑量SiO₂染塵組和對照組。染塵組采用一次性非暴露式氣管插管法進(jìn)行造模,對照組則給予等體積滅菌0.9%氯化鈉溶液。分別于造模后7、14、28、56 d隨機(jī)處死5只大鼠,觀察肺組織肺泡炎及肺纖維化程度,檢測肺組織中IL-1β、IL-18、TGF-β1、NLRP3、Caspase-1表達(dá)情況。SPF級Wistar雄性大鼠,隨機(jī)分為陰性對照組、模型組和抑制劑組。造模的同時,抑制劑組予10 mg/kg的NLRP3抑制劑,模型組和對照組予等體積滅菌0.9%氯化鈉溶液,每天灌胃1次。分別于造模后7、14、28、56 d隨機(jī)處死5只大鼠,觀察肺組織肺泡炎及肺纖維化程度,檢測肺組織中IL-1β、IL-18、TGF-β1、NLRP3、Caspase-1表達(dá)情況。大鼠肺泡巨噬細(xì)胞為細(xì)胞模型,分為空白對照組、染塵組、NLRP3抑制劑組、木犀草素組。染塵組加入50mg/...

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
提要
abstract
引言
第一章 NLRP3/IL-1β/TGF-β1 信號軸在矽肺纖維化大鼠模型中的表達(dá)及意義
    材料與方法
        1 實(shí)驗材料
            1.1 實(shí)驗試劑
            1.2 實(shí)驗儀器
            1.3 實(shí)驗藥物
        2 實(shí)驗方法
            2.1 實(shí)驗動物
            2.2 動物分組
            2.3 模型制備
            2.4 標(biāo)本采集及處理
            2.5 檢測指標(biāo)與方法
            2.6 統(tǒng)計方法
        3 研究結(jié)果
            3.1 大鼠的一般情況
            3.2 HE染色結(jié)果
            3.3 Masson染色結(jié)果
            3.4 肺組織肺泡炎及肺纖維化嚴(yán)重度評分
            3.5 各組大鼠肺組織中IL-1β、IL-18、TGF-β1 濃度變化達(dá)情況
            3.6 Western Blot法檢測大鼠肺組織中NLRP3、Caspase-1 蛋白表達(dá)情況
        4 討論
第二章 NLRP3/IL-1β/TGF-β1 信號軸在矽肺纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用研究
    材料與方法
        1 實(shí)驗材料
            1.1 實(shí)驗試劑
            1.2 實(shí)驗儀器
            1.3 實(shí)驗藥物
        2 實(shí)驗方法
            2.1 實(shí)驗動物
            2.2 動物分組
            2.3 模型制備
            2.4 標(biāo)本采集及處理
            2.5 檢測指標(biāo)與方法
            2.6 統(tǒng)計方法
        3 研究結(jié)果
            3.1 大鼠的一般情況
            3.2 HE染色結(jié)果
            3.3 Masson染色結(jié)果
            3.4 大鼠肺組織肺泡炎程度及肺纖維化程度評分結(jié)果
            3.5 大鼠肺組織中細(xì)胞因子水平
            3.6 大鼠肺組織中NLRP3和Caspase-1 蛋白相對表達(dá)水平
        4 討論
第三章 抑制NLRP3 炎癥小體活化對SiO2 粉塵致巨噬細(xì)胞炎性反應(yīng)的影響
    材料和方法
        1 實(shí)驗材料
            1.1 實(shí)驗試劑
            1.2 實(shí)驗儀器
            1.3 實(shí)驗藥物
        2 實(shí)驗方法
            2.1 細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)
            2.2 分組及處理
            2.3 MTT法檢測細(xì)胞存活和生長的況
            2.4 檢測指標(biāo)與方法
            2.5 統(tǒng)計方法
        3 研究結(jié)果
            3.1 各組巨噬細(xì)胞存活況
            3.2 炎性細(xì)胞因子測定
        4 討論
第四章 以NLRP3/IL-1β/TGF-β1 信號軸為靶點(diǎn)探討木犀草素對矽肺纖維化的防治作用及機(jī)制
    材料和方法
        1 實(shí)驗材料
            1.1 實(shí)驗試劑
            1.2 實(shí)驗儀器
            1.3 實(shí)驗藥物
        2 實(shí)驗方法
            2.1 實(shí)驗動物
            2.2 動物分組
            2.3 模型制備及給藥
            2.4 標(biāo)本采集及處理
            2.5 檢測指標(biāo)與方法
            2.6 統(tǒng)計方法
        3 研究結(jié)果
            3.1 大鼠的一般情況
            3.2 大鼠肺組織形態(tài)的觀察
            3.3 大鼠肺指數(shù)變化
            3.4 大鼠肺組織病變
            3.5 大鼠肺組織中細(xì)胞因子水平
        4 討論
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
致謝
查新報告
論文著作



本文編號：3743886