本文關(guān)鍵詞：大鼠放射性腦損傷模型早期分子靶向示蹤研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分早期放射性腦損傷大鼠腦組織內(nèi)ICAM-1蛋白的表達目的研究細胞間粘附分子-1(ICAM-1)在早期放射性腦損傷大鼠模型中的表達,并為后續(xù)分子靶向示蹤影像研究確定掃描的時間點。方法選擇健康SD大鼠40只,按隨機數(shù)字表法分為兩組:空白對照組(麻醉后不照射,共20只)和照射組(采用30Gy電子線單次全腦照射SD大鼠,建立放射性腦損傷模型,共20只),分別于照射后1d、2d、3d、5d和7d將大鼠處死,取大鼠腦組織。通過HE染色在光鏡下觀察腦組織的病理學變化,采用Western blot方法檢測全腦ICAM-1總蛋白含量的改變情況,應(yīng)用免疫組織化學方法并結(jié)合計算機視圖處理軟件檢測腦血管內(nèi)皮細胞ICAM-1蛋白積分光密度值變化。結(jié)果照射組腦組織在觀察期主要歷經(jīng)了腦血管源性水腫、血管內(nèi)膜細胞受損、早期血栓形成等病理變化過程。與空白對照組比較,ICAM-1總蛋白在照射后1d時表達即出現(xiàn)增高,隨著時間的延長,ICAM-1的表達逐漸增多,照射后3d時其表達達到高峰,其后ICAM-1表達略降低,7d時仍高于對照組水平。照射1d后腦組織即出現(xiàn)ICAM-1染色陽性的血管內(nèi)皮細胞、膠質(zhì)細胞。血管內(nèi)皮細胞在照后3d ICAM-1蛋白光密度值到達峰值,與空白組比較,差異有統(tǒng)計學意義(t=-12.006,P0.01);照后3d膠質(zhì)及神經(jīng)細胞ICAM蛋白光密度值也達到峰值,與空白對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(t=-18.741,P0.01)。結(jié)論在放射性腦損傷模型中,ICAM-1蛋白在損傷急性期升高;腦血管內(nèi)皮細胞、膠質(zhì)及神經(jīng)細胞表達的ICAM-1蛋白在觀察期內(nèi)持續(xù)高表達,并參與了急性期內(nèi)誘導水腫、血管通透性增加、形成血栓等相關(guān)事件。第二部分分子靶向示蹤劑的合成目的利用小鼠抗大鼠細胞間粘附分子-1(ICAM-1)單克隆抗體與微米量級氧化鐵顆粒(MPIO)進行連接,合成特異性分子靶向示蹤劑抗ICAM-MPIO。方法將MPIO、ICAM-1單克隆抗體和可溶于水的碳二亞胺(EDC)按照1:10的摩爾比混合于磷酸緩沖液(PBS,0.01M,Ph=7.4)中,然后在渦旋條件下緩慢加入EDC,將上述混合溶液置于旋轉(zhuǎn)混合架上,轉(zhuǎn)速調(diào)至60rpm,室溫下反應(yīng)2~3小時。反應(yīng)結(jié)束后,采用離心分離進行純化,用PBS緩沖液至少清洗三次以除去未反應(yīng)的抗體和EDC,最后將產(chǎn)物分散在含有1%牛血清白蛋白(BSA)的PBS緩沖液中。4℃靜置過夜后置于4℃下保存。結(jié)果應(yīng)用免疫熒光共聚焦顯微鏡觀察抗體與MPIO二者的連接情況。ICAM-1抗體攜帶的紅色熒光與MPIO內(nèi)攜帶的綠色熒光進行融合顯像,可以見到二者在大小、形態(tài)及位置上基本吻合,ICAM-1抗體成功連接至MPIO微球表面。結(jié)論ICAM-1抗體可以與MPIO進行連接,合成帶有分子靶向性的造影劑。第三部分分子靶向示蹤劑的活體動物成像實驗目的研究分子靶向造影劑在早期大鼠放射性腦損傷模型中的顯像特點,確定其是否可以早期顯示放射性腦損傷。方法采用健康SD大鼠12只,體重200±50g,建立放射性腦損傷動物模型,按隨機數(shù)字表法分為靶向組(注射抗ICAM-MPIO)、非靶向組(注射MPIO)、競爭抑制組(注射抗ICAM-MPIO前給予ICAM-1抗體注射)和正常對照組(注射抗ICAM-MPIO),每組3只。采用高場強磁共振儀(7.0T)對大鼠進行掃描,采集T1WI、T2WI和T2-map序列,評價抗ICAM-MPIO對早期放射性腦損傷大鼠的靶向性,以及特異性靶向造影劑在磁共振影像上的表現(xiàn)。掃描完成后對大鼠取腦,并行普魯士藍染色實驗,觀察MPIO顆粒在腦內(nèi)的分布情況。結(jié)果活體動物實驗顯示抗ICAM-MPIO對早期放射性腦損傷具有明顯的靶向作用。靶向組注射抗ICAM-MPIO后引起T2信號明顯的減低,通過對腦組織T2值的測量,照射靶向組腦組織的T2信號值較非靶向組、競爭抑制組和正常對照組的T2信號值明顯降低(P0.05)。普魯士藍染色在靶向組大鼠腦組織內(nèi)見到明顯藍染的鐵顆粒。結(jié)論利用分子靶向示蹤劑抗ICAM-MPIO可以有效的觀察早期放射性腦損傷,可以作為早期觀察和評價放射性腦損傷的手段之一。
【關(guān)鍵詞】：細胞間粘附分子-1 放射性腦損傷大鼠模型 蛋白表達 微米級超順磁性氧化鐵顆粒 細胞間粘附分子-1 分子靶向造影劑 放射性腦損傷 大鼠模型 分子靶向磁共振成像
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R-332;R730.55
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-16
• 研究現(xiàn)狀、成果11-14
• 研究目的、方法14-16
• 第一部分 早期放射性腦損傷大鼠腦組織ICAM-1 的表達16-43
• 1.1 對象與方法16-27
• 1.2 結(jié)果27-34
• 1.3 討論34-37
• 1.4 小結(jié)37-38
• 參考文獻38-43
• 第二部分 分子靶向示蹤劑的合成43-57
• 2.1 材料與方法43-44
• 2.2 結(jié)果44-45
• 2.3 討論45-52
• 2.4 小結(jié)52
• 參考文獻52-57
• 第三部分 分子靶向示蹤劑的活體動物成像實驗57-74
• 3.1 對象與方法57-60
• 3.2 結(jié)果60-64
• 3.3 討論64-69
• 3.4 小結(jié)69-70
• 參考文獻70-74
• 全文結(jié)論74-75
• 論文創(chuàng)新點75-76
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明76-77
• 綜述77-101
• 參考文獻87-101
• 致謝101-102

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 康睿;聚酰胺-胺型納米載體在腫瘤治療中的研究現(xiàn)狀[J];國外醫(yī)學(兒科學分冊);2004年02期

2 文寶紅;程敬亮;王斐斐;閆晨宇;張會霞;張曉楠;張風光;;兔眼玻璃體內(nèi)魚刺異物的MRI表現(xiàn)[J];放射學實踐;2013年08期

3 李上勛;黃雯;段yN杰;邢景軍;丁揚;楊怡;周亦武;;大鼠彌漫性軸索損傷腦組織彌散張量成像與免疫組化染色觀察[J];中國法醫(yī)學雜志;2013年04期

4 林家豪;陳韻彬;陳英;蔡林峰;林孔起;;磁敏感加權(quán)成像技術(shù)在腦膠質(zhì)瘤分級中的臨床應(yīng)用價值[J];中國CT和MRI雜志;2013年05期

5 張永克;趙駿;王健;陳偉;楊柳;郭林;周代全;;脂肪抑制質(zhì)子加權(quán)成像和磁敏感加權(quán)成像診斷膝關(guān)節(jié)半月板撕裂對比研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2013年23期

6 李樹金;張輝;張紹偉;錢麗霞;劉起旺;;MR DWI、SWI在下肢肌肉血腫的臨床應(yīng)用[J];磁共振成像;2014年03期

7 毛銳利;陳昆濤;;磁共振彌散成像在脊髓損傷中的應(yīng)用[J];中國CT和MRI雜志;2014年04期

8 陳靜;李欣;王春祥;趙濱;劉俊剛;;磁敏感加權(quán)成像SWAN序列在兒童顱腦疾病中的應(yīng)用價值[J];放射學實踐;2014年08期

9 沈龍;江時淦;王豪;;磁敏感加權(quán)成像在顱腦疾病中的應(yīng)用研究[J];當代醫(yī)學;2015年01期

10 朱躍強;白人駒;滕飛;馬艷;葉兆祥;劉佩芳;;ESWAN幅值圖在卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫診斷中的價值[J];放射學實踐;2015年01期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張偉祿;靶向磁共振成像造影劑的合成及其在癌癥早期診斷中的應(yīng)用[D];華東師范大學;2011年

2 韓月東;抗人前列腺癌PSA scFv-TAT-MION的制備及其在荷人前列腺癌裸鼠模型的MR分子成像研究[D];第四軍醫(yī)大學;2006年

3 葉彤;葉酸受體靶向?qū)Ρ葎┐殴舱耧@像實驗研究[D];復旦大學;2007年

4 袁正;功能磁共振成像評價肝癌化療栓塞療效的臨床研究[D];第二軍醫(yī)大學;2008年

5 程義云;基于樹枝形分子的藥物運輸系統(tǒng)：從理論到應(yīng)用[D];中國科學技術(shù)大學;2008年

6 唐國濤;轉(zhuǎn)鐵蛋白修飾的CPT-PAMAM-PEG復合物的腫瘤靶向研究[D];復旦大學;2009年

7 朱玉兆;葉酸靶向性納米磁共振造影劑的制備與成像研究[D];第二軍醫(yī)大學;2010年

8 馮婕;新型MR葉酸靶向?qū)Ρ葎㏒PIO-PBCA納米微粒的合成及實驗室研究[D];南方醫(yī)科大學;2010年

9 理東麗;靶向腫瘤間質(zhì)纖維蛋白分子探針的制備及磁共振成像的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學;2012年

10 芮蒙杰;重組高密度脂蛋白粒子作為藥物和影像制劑載體的研究[D];上海交通大學;2012年

  本文關(guān)鍵詞：大鼠放射性腦損傷模型早期分子靶向示蹤研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：373989