發(fā)布時(shí)間：2023-01-29 20:24

　　背景:具有敏感表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）突變的非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者應(yīng)用EGFR酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-TKIs）治療效果顯著;然而在治療后期不可避免地會(huì)發(fā)生耐藥。以往大量研究證實(shí)脂質(zhì)代謝重編程是癌癥的標(biāo)志并且與EGFR信號(hào)依賴的腫瘤生長(zhǎng)作用密切相關(guān)。EGFR信號(hào)通路的激活可以增加單不飽和脂肪酸（MUFA）的合成和脂質(zhì)代謝關(guān)鍵酶硬脂酰輔酶A去飽和酶1（SCD1）的表達(dá)。但是EGFR-TKI耐藥產(chǎn)生和脂質(zhì)代謝之間的相關(guān)性仍有待確定。本研究旨在探討EGFR-TKIs耐藥產(chǎn)生過程中脂質(zhì)代謝作用并分析其可能的機(jī)制,為EGFR-TKI耐藥的治療提供新的方向。方法:在本研究中,我們使用免疫組化（IHC）、Nile red（尼羅紅）染色、油紅O染色等方法,探討了配對(duì)的TKI治療前后組織標(biāo)本及不同突變狀態(tài)的NSCLC細(xì)胞系之間脂質(zhì)代謝的差異及TKI處理時(shí)間差異背景下脂質(zhì)代謝的程度異同。利用生物信息學(xué)分析耐藥前后細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)。使用油酸（OA）模擬細(xì)胞內(nèi)高脂質(zhì)代謝環(huán)境,并檢測(cè)在高脂質(zhì)代謝環(huán)境下TKIs（gefitinib和osimertinib）對(duì)敏感細(xì)胞系的效應(yīng)變化。在耐藥細(xì)... 

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
材料和方法
    1.1 主要材料與試劑
    1.2 主要儀器
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)及觀察
    1.4 油紅O染色
    1.5 Nile red染色及定量
    1.6 免疫組織化學(xué)
    1.7 蛋白免疫印跡試驗(yàn)(Western blot)
    1.8 CCK8 檢測(cè)試驗(yàn)
    1.9 免疫熒光(Immunofluorescence)
    1.10 流式細(xì)胞凋亡檢測(cè)
    1.11 BODIPY493/503染色與定量
    1.12 Edu細(xì)胞增殖檢測(cè)試驗(yàn)
    1.13 克隆形成試驗(yàn)
    1.14 臨床標(biāo)本來源與類型
    1.15 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
    1.16 生物信息學(xué)與公共數(shù)據(jù)庫(kù)分析
    1.17 統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)方法
結(jié)果
    2.1 腫瘤細(xì)胞內(nèi)SCD1 及脂滴蓄積情況隨著TKI用藥時(shí)間及耐藥情況而改變
        2.1.1.長(zhǎng)時(shí)間TKI治療后腫瘤組織內(nèi)脂滴蓄積、脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)增高
        2.1.2.耐藥細(xì)胞因長(zhǎng)時(shí)間受TKI處理細(xì)胞內(nèi)脂滴蓄積、脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)增高
        2.1.3.不同的TKI處理時(shí)間,對(duì)于腫瘤細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)代謝的作用不同
    2.2 油酸減弱TKIs對(duì)敏感突變細(xì)胞的增殖抑制作用
    2.3 油酸減弱TKIs對(duì)敏感突變細(xì)胞的殺傷作用
    2.4 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)異常高油酸環(huán)境減弱gefitinib對(duì)敏感突變細(xì)胞的殺傷作用
    2.5 聯(lián)合抑制異常脂質(zhì)代謝與EGFR信號(hào)可以抑制耐藥細(xì)胞的增殖作用
    2.6 聯(lián)合g-PPT與 gefitinib通過抑制EGFR-ERK信號(hào)通路導(dǎo)致耐藥細(xì)胞凋亡
    2.7 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證聯(lián)合g-PPT與 gefitinib可以逆轉(zhuǎn)TKI耐藥
討論
參考文獻(xiàn)
綜述:脂肪酸代謝異常在腫瘤治療耐藥中的研究現(xiàn)狀
    參考文獻(xiàn)
附錄1 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文目錄
附錄2 個(gè)人參與的課題與項(xiàng)目
附錄3 (英文縮略詞表)
致謝



本文編號(hào)：3732846