本文關(guān)鍵詞：BNIP3L在前列腺癌中的表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞行為的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：研究BNIP3L在前列腺癌組織中的表達(dá)及在前列腺癌細(xì)胞中對(duì)腫瘤生物學(xué)特征的影響,旨在尋找與前列腺癌發(fā)生與發(fā)展相關(guān)的新的靶基因。方法：(1)收集80例前列腺癌手術(shù)標(biāo)本及正常組織標(biāo)本,免疫組化方法檢測BNIP3L的表達(dá)變化；將前列腺癌組織中BNIP3L表達(dá)與前列腺癌患者的臨床病理因素進(jìn)行相關(guān)性分析；對(duì)患者進(jìn)行生存隨訪,分析前列腺癌組織中BNIP3L表達(dá)與患者生存率的關(guān)系。(2)檢測前列腺癌細(xì)胞中BNIP3L的表達(dá)；構(gòu)建BNIP3L的過表達(dá)載體及干擾表達(dá)載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞,檢測其對(duì)細(xì)胞增殖及腫瘤克隆形成的影響；在此基礎(chǔ)上剝奪血清中的雄激素,分析BNIP3L的表達(dá)對(duì)血清剝奪導(dǎo)致細(xì)胞生長停滯的影響；同時(shí)檢測細(xì)胞周期進(jìn)程、細(xì)胞凋亡及相關(guān)標(biāo)記蛋白的表達(dá),觀察BNIP3L在調(diào)節(jié)細(xì)胞生長中的作用及其影響。(3)干預(yù)細(xì)胞中BNIP3L的表達(dá),利用Transwell檢測細(xì)胞的遷移及侵襲能力,分析BNIP3L在前列腺癌轉(zhuǎn)移中的作用,同時(shí)檢測EMT相關(guān)標(biāo)記的表達(dá),尋找BNIP3L調(diào)節(jié)細(xì)胞遷移及侵襲可能的機(jī)制。結(jié)果：(1)免疫組化檢測顯示BNIP3L主要分布于細(xì)胞的胞漿中,其在正常的前列腺組織中表達(dá)較少,而在前列腺癌組織中表達(dá)增加；80例前列腺癌組織中BNIP3L陽性數(shù)為71例(88.75%),而在正常的組織中,BNIP3L的陽性數(shù)僅為6例(7.5%)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)BNIP3L在前列腺組織中表達(dá)顯著低于正常組織,這提示BNIP3L可能參與前列腺癌的發(fā)生及發(fā)展。分析患者的臨床資料,對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。對(duì)BNIP3L表達(dá)與前列腺癌患者的臨床因素進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果顯示BNIP3L的表達(dá)在前列腺癌患者的PSA水平、Gleason評(píng)分、TNM分期、AR、出現(xiàn)CRPC及是否出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中存在差異,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Kaplan-Meier生存曲線分析發(fā)現(xiàn)BNIP3L高表達(dá)與患者總生存率的降低顯著相關(guān)。(2) BNIP3L在正常的前列腺上皮細(xì)胞中的表達(dá)缺失,而在前列腺癌細(xì)胞中表達(dá)增加,BNIP3L的表達(dá)主要位于胞漿。(3)將BNIP3L過表達(dá)載體轉(zhuǎn)染LNCaP細(xì)胞后,細(xì)胞的增殖及克隆形成能力被有效促進(jìn)；而將BNIP3L干預(yù)表達(dá)載體轉(zhuǎn)染C4-2細(xì)胞后可見其能有效干預(yù)BNIP3L的表達(dá),且能顯著抑制細(xì)胞的增殖及克隆形成。同時(shí)無論是否在去勢狀態(tài)下過表達(dá)BNIP3L均可促進(jìn)前列腺癌LNCaP細(xì)胞株的生長。在BNIP3L表達(dá)相對(duì)較高的C4-2細(xì)胞中,抑制BNIP3L的表達(dá),無論是否在去勢狀態(tài)下,均可抑制前列腺細(xì)胞C4-2的生長。在LNCaP細(xì)胞中,過表達(dá)BNIP3L后,促進(jìn)細(xì)胞周期。在雄激素非依賴C4-2細(xì)胞中,BNIP3L被干擾時(shí),出現(xiàn)明顯的G1阻滯,與雄激素水平無關(guān)。同時(shí)檢測細(xì)胞周期蛋白的表達(dá),發(fā)現(xiàn)無論是否在去勢狀態(tài)下,在LNcap細(xì)胞株中過表達(dá)BNIP3L,均可增加Cyclin D1、Cyclin A1及Cyclin E1的表達(dá),能減少細(xì)胞周期抑制蛋白p27及p21的表達(dá)。在C4-2細(xì)胞株中抑制表達(dá)BNIP3L,均可減少Cyclin D1、Cyclin A1及Cyclin E1的表達(dá),能增加細(xì)胞周期抑制蛋白p27及p21的表達(dá)。運(yùn)用Annexin V檢測細(xì)胞凋亡情況,結(jié)果顯示：過表達(dá)BNIP3L具有抗凋亡作用,抑制BNIP3L表達(dá)具有促進(jìn)凋亡作用。檢測凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)情況,結(jié)果顯示BNIP3L可以影響B(tài)ax、Bcl-2、Bcl-xL及BAD的表達(dá)。(4)過表達(dá)BNIP3L可促進(jìn)細(xì)胞的遷移,而抑制BNIP3L的表達(dá)可抑制細(xì)胞的遷移；細(xì)胞基質(zhì)膠侵襲模型中過表達(dá)BNIP3L可促進(jìn)細(xì)胞的侵襲,而干預(yù)BNIP3L的表達(dá)可抑制細(xì)胞的侵襲,這表明在前列腺癌中,BNIP3L可促進(jìn)細(xì)胞的遷移及侵襲,促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移發(fā)生。深入分析其機(jī)制顯示過表達(dá)BNIP3L可促進(jìn)間質(zhì)標(biāo)記物如N-Cadhein、Vimenti、Slug、Twist及Snail的表達(dá),可抑制上皮標(biāo)記E-Cadherin的表達(dá)；干預(yù)BNIP3L可促進(jìn)上皮標(biāo)記E-Cadherin的表達(dá),抑制間質(zhì)標(biāo)記如N-Cadhein、 Vimentin、Slug、Twist及Snail的表達(dá)。這表明在前列腺癌中,BNIP3L可通過調(diào)節(jié)EMT的發(fā)生參與前列腺癌的轉(zhuǎn)移。結(jié)論：(1)BNIP3L在前列腺癌組織中表達(dá)增加,BNIP3L的表達(dá)增加與前列腺癌患者的PSA水平、Gleason評(píng)分、TNM分期、AR表達(dá)是否陽性及是否出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移正相關(guān)；BNIP3L高表達(dá)與患者出現(xiàn)CRPC相關(guān),且BNIP3L陽性患者總生存率的降低顯著相關(guān),提示其可能參與前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展。(2) BNIP3L在正常前列腺細(xì)胞中表達(dá)缺失,在前列腺癌細(xì)胞中表達(dá)增加,BNIP3L的表達(dá)主要位于胞漿。(3) BNIP3L前列腺癌細(xì)胞中過表達(dá)可促進(jìn)細(xì)胞的增殖、促進(jìn)細(xì)胞周期進(jìn)程、減少細(xì)胞凋亡發(fā)揮促進(jìn)作用。(4) BNIP3L過表達(dá)可促進(jìn)細(xì)胞的遷移及侵襲；其是通過上調(diào)EMT進(jìn)程中間質(zhì)標(biāo)記N-Cadhein、Vimentin、Slug、Twist及Snail的表達(dá),抑制上皮標(biāo)記E-Cadherin的表達(dá)發(fā)揮作用的。
【關(guān)鍵詞】：前列腺癌 BNIP3L 增殖 轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.25
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-10
• 前言10-24
• 參考文獻(xiàn)15-24
• 第一部分 BNIP3L在前列腺癌中的表達(dá)及臨床意義24-36
• 材料與方法24-29
• 結(jié)果29-32
• 討論32-33
• 結(jié)論33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 第二部分 BNIP3L表達(dá)對(duì)前列腺癌細(xì)胞的影響36-69
• 材料與方法36-53
• 結(jié)果53-61
• 討論61-65
• 結(jié)論65
• 參考文獻(xiàn)65-69
• 全文總結(jié)69-70
• 綜述70-103
• 主要參考文獻(xiàn)88-103
• 讀博期間發(fā)表論文103-104
• 英文縮寫詞表104-105
• 致謝105

  本文關(guān)鍵詞：BNIP3L在前列腺癌中的表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞行為的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：372022