東方栓孔菌多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)解析與生物活性研究
發(fā)布時(shí)間:2022-11-12 16:28
多糖為大型真菌的主要活性成分,因具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤和抗氧化等生物活性而被廣泛關(guān)注。東方栓孔菌作為傳統(tǒng)中藥材,主治肺炎、咳嗽痰喘、肺結(jié)核、支氣管炎等多種肺部疾病,目前有關(guān)東方栓孔菌多糖的研究鮮有報(bào)道。本論文從提取工藝、分離純化、理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)表征、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、抗炎和抗腫瘤活性等方面,深入研究了東方栓孔菌多糖。通過響應(yīng)面法優(yōu)化了東方栓孔菌多糖的超聲輔助提取工藝和超聲-微波輔助提取工藝。超聲輔助提取東方栓孔菌多糖的最佳工藝參數(shù)為30 mL/g,超聲功率110 W,提取溫度40℃,提取時(shí)間42 min,在此條件下多糖得為7.49±0.14%(n=3)。超聲-微波輔助提取東方栓孔菌多糖的最佳工藝參數(shù)為液料比28 mL/g,超聲功率114 W,提取時(shí)間11 min,在此條件下多糖得率為7.52±0.12%(n=3)。與其他提取方法相比,超聲-微波輔助提取法用時(shí)最短,得率最高,更適用于東方栓孔菌多糖的提取。通過DEAE-纖維素和Sephadex G-100色譜純化東方栓孔菌粗多糖,得到了一個(gè)主要的純化組分,命名為TOP-2。理化性質(zhì)與紅外光譜分析表明TOP-2為含有硫酸基的酸性多糖;高效凝膠...
【文章頁數(shù)】:169 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
致謝
摘要
abstract
縮略語注釋表
1 緒論
1.1 課題研究背景
1.2 多孔菌多糖的研究進(jìn)展
1.3 東方栓孔菌的研究概況
1.4 研究意義及內(nèi)容
2 實(shí)驗(yàn)部分
2.1 材料與試劑
2.2 儀器與設(shè)備
2.3 東方栓孔菌多糖提取工藝優(yōu)化的方法
2.4 多糖分離純化、理化性質(zhì)與初步結(jié)構(gòu)表征的方法
2.5 TOP-2 的體外抗氧化活性及對酒精性肝損傷小鼠的保護(hù)作用的研究方法
2.6 TOP-2 對環(huán)磷酰胺致免疫抑制小鼠的保護(hù)作用的研究方法
2.7 TOP-2對Lewis肺癌荷瘤小鼠的抗腫瘤與免疫調(diào)節(jié)活性的研究方法
2.8 TOP-2對PM2.5 致肺損傷小鼠的保護(hù)作用的研究方法
2.9 統(tǒng)計(jì)分析
3 東方栓孔菌多糖的提取工藝優(yōu)化
3.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
3.2 超聲輔助提取工藝優(yōu)化
3.3 超聲-微波輔助提取工藝優(yōu)化
3.4 不同提取方法的比較
3.5 討論
3.6 小結(jié)
4 東方栓孔菌多糖的分離純化、理化性質(zhì)與初步結(jié)構(gòu)表征
4.1 東方栓孔菌多糖的分離純化
4.2 TOP-2 的理化性質(zhì)
4.3 TOP-2 的初步結(jié)構(gòu)表征
4.4 討論
4.5 小結(jié)
5 TOP-2 的體外抗氧化活性及對酒精性肝損傷小鼠的保護(hù)作用
5.1 TOP-2 的體外抗氧化活性
5.2 TOP-2 對酒精性肝損傷小鼠的保護(hù)作用
5.3 討論
5.4 小結(jié)
6 TOP-2 對環(huán)磷酰胺致免疫抑制小鼠的保護(hù)作用
6.1 TOP-2 對小鼠臟器系數(shù)的影響
6.2 TOP-2 對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響
6.3 TOP-2 對小鼠巨噬細(xì)胞NO生成的影響
6.4 TOP-2 對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響
6.5 TOP-2 對小鼠NK細(xì)胞和CTL細(xì)胞毒性作用的影響
6.6 TOP-2 對小鼠血清細(xì)胞因子和免疫球蛋白的影響
6.7 TOP-2 對小鼠抗氧化能力的影響
6.8 討論
6.9 小結(jié)
7 TOP-2對Lewis肺癌荷瘤小鼠的抗腫瘤與免疫調(diào)節(jié)活性
7.1 TOP-2 對小鼠瘤重和抑瘤率的影響
7.2 TOP-2 對小鼠體重和免疫器官系數(shù)的影響
7.3 TOP-2 對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力的影響
7.4 TOP-2 對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響
7.5 TOP-2 對小鼠血清細(xì)胞因子的影響
7.6 TOP-2對TLR4 介導(dǎo)的NF-κB信號通路的影響
7.7 討論
7.8 小結(jié)
8 TOP-2對PM2.5致肺損傷小鼠的保護(hù)作用
8.1 TOP-2 對小鼠肺組織濕重/干重比
8.2 TOP-2 對小鼠BALF中炎性細(xì)胞的影響
8.3 TOP-2 對小鼠BALF中 TP、ALB和 CRP含量的影響
8.4 TOP-對小鼠BALF中 MPO、LDH、AKP和 ASM活性的影響
8.5 TOP-2 對促炎因子TNF-α、IL-1β 和IL-6 含量的影響
8.6 TOP-2 對SOD、CAT和GSH-Px活性的影響
8.7 TOP-2 對MDA、PCG和 8-Ohd G含量的影響
8.8 TOP-2 對Nrf2 和HO-1 表達(dá)的影響
8.9 TOP-2 對NLRP3 炎癥小體活化的影響
8.10 討論
8.11 小結(jié)
9 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
9.1 結(jié)論
9.2 創(chuàng)新點(diǎn)
9.3 展望
參考文獻(xiàn)
作者簡歷
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2015年中國惡性腫瘤流行情況分析[J]. 鄭榮壽,孫可欣,張思維,曾紅梅,鄒小農(nóng),陳茹,顧秀瑛,魏文強(qiáng),赫捷. 中華腫瘤雜志. 2019 (01)
[2]天然產(chǎn)物來源多糖結(jié)構(gòu)解析研究進(jìn)展[J]. 謝明勇,殷軍藝,聶少平. 中國食品學(xué)報(bào). 2017(03)
[3]東方栓孔菌子實(shí)體營養(yǎng)成分與生物活性物質(zhì)分析[J]. 鄭義,趙節(jié)昌,李勇,張格言,馮佳男. 食品科學(xué). 2016(10)
[4]多糖的硫酸化修飾及其結(jié)構(gòu)與生物活性關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 謝明勇,王之珺,謝建華. 中國食品學(xué)報(bào). 2015(02)
[5]Alcoholic liver disease: Treatment[J]. Ki Tae Suk,Moon Young Kim,Soon Koo Baik. World Journal of Gastroenterology. 2014(36)
[6]Oxidative stress as a crucial factor in liver diseases[J]. Halina Cichoz-Lach,Agata Michalak. World Journal of Gastroenterology. 2014(25)
[7]Isolation,Purification and Bioactivities of Polysaccharides from Irpex lacteus[J]. ZHANG Na 1,LIU Yan 1,LU Jia-hui 1,WANG Juan 1,YANG Shuang 1,ZHANG Nan 1,MENG Qing-fan 1* and TENG Li-rong 1,2* 1.College of Life Science,Jilin University,Changchun 130012,P.R.China;2.Department of Chemistry and Pharmacy,Zhuhai College of Jilin University,Zhuhai 519041,P.R.China. Chemical Research in Chinese Universities. 2012(02)
[8]天然產(chǎn)物活性多糖結(jié)構(gòu)與功能研究進(jìn)展[J]. 謝明勇,聶少平. 中國食品學(xué)報(bào). 2010(02)
[9]中國多孔菌名錄[J]. 戴玉成. 菌物學(xué)報(bào). 2009(03)
[10]Structure of polysaccharides from mycelium and culture medium of Phellinus nigricans using submerged fermentation[J]. LI Xia, JIAO LiLi, ZHANG Xu, TIAN WenMin, CHEN Shan & ZHANG LiPing School of Life Sciences, Northeast Normal University, Changchun 130024, China. Science in China(Series C:Life Sciences). 2008(06)
本文編號:3706698
【文章頁數(shù)】:169 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
致謝
摘要
abstract
縮略語注釋表
1 緒論
1.1 課題研究背景
1.2 多孔菌多糖的研究進(jìn)展
1.3 東方栓孔菌的研究概況
1.4 研究意義及內(nèi)容
2 實(shí)驗(yàn)部分
2.1 材料與試劑
2.2 儀器與設(shè)備
2.3 東方栓孔菌多糖提取工藝優(yōu)化的方法
2.4 多糖分離純化、理化性質(zhì)與初步結(jié)構(gòu)表征的方法
2.5 TOP-2 的體外抗氧化活性及對酒精性肝損傷小鼠的保護(hù)作用的研究方法
2.6 TOP-2 對環(huán)磷酰胺致免疫抑制小鼠的保護(hù)作用的研究方法
2.7 TOP-2對Lewis肺癌荷瘤小鼠的抗腫瘤與免疫調(diào)節(jié)活性的研究方法
2.8 TOP-2對PM2.5 致肺損傷小鼠的保護(hù)作用的研究方法
2.9 統(tǒng)計(jì)分析
3 東方栓孔菌多糖的提取工藝優(yōu)化
3.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
3.2 超聲輔助提取工藝優(yōu)化
3.3 超聲-微波輔助提取工藝優(yōu)化
3.4 不同提取方法的比較
3.5 討論
3.6 小結(jié)
4 東方栓孔菌多糖的分離純化、理化性質(zhì)與初步結(jié)構(gòu)表征
4.1 東方栓孔菌多糖的分離純化
4.2 TOP-2 的理化性質(zhì)
4.3 TOP-2 的初步結(jié)構(gòu)表征
4.4 討論
4.5 小結(jié)
5 TOP-2 的體外抗氧化活性及對酒精性肝損傷小鼠的保護(hù)作用
5.1 TOP-2 的體外抗氧化活性
5.2 TOP-2 對酒精性肝損傷小鼠的保護(hù)作用
5.3 討論
5.4 小結(jié)
6 TOP-2 對環(huán)磷酰胺致免疫抑制小鼠的保護(hù)作用
6.1 TOP-2 對小鼠臟器系數(shù)的影響
6.2 TOP-2 對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響
6.3 TOP-2 對小鼠巨噬細(xì)胞NO生成的影響
6.4 TOP-2 對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響
6.5 TOP-2 對小鼠NK細(xì)胞和CTL細(xì)胞毒性作用的影響
6.6 TOP-2 對小鼠血清細(xì)胞因子和免疫球蛋白的影響
6.7 TOP-2 對小鼠抗氧化能力的影響
6.8 討論
6.9 小結(jié)
7 TOP-2對Lewis肺癌荷瘤小鼠的抗腫瘤與免疫調(diào)節(jié)活性
7.1 TOP-2 對小鼠瘤重和抑瘤率的影響
7.2 TOP-2 對小鼠體重和免疫器官系數(shù)的影響
7.3 TOP-2 對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力的影響
7.4 TOP-2 對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響
7.5 TOP-2 對小鼠血清細(xì)胞因子的影響
7.6 TOP-2對TLR4 介導(dǎo)的NF-κB信號通路的影響
7.7 討論
7.8 小結(jié)
8 TOP-2對PM2.5致肺損傷小鼠的保護(hù)作用
8.1 TOP-2 對小鼠肺組織濕重/干重比
8.2 TOP-2 對小鼠BALF中炎性細(xì)胞的影響
8.3 TOP-2 對小鼠BALF中 TP、ALB和 CRP含量的影響
8.4 TOP-對小鼠BALF中 MPO、LDH、AKP和 ASM活性的影響
8.5 TOP-2 對促炎因子TNF-α、IL-1β 和IL-6 含量的影響
8.6 TOP-2 對SOD、CAT和GSH-Px活性的影響
8.7 TOP-2 對MDA、PCG和 8-Ohd G含量的影響
8.8 TOP-2 對Nrf2 和HO-1 表達(dá)的影響
8.9 TOP-2 對NLRP3 炎癥小體活化的影響
8.10 討論
8.11 小結(jié)
9 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
9.1 結(jié)論
9.2 創(chuàng)新點(diǎn)
9.3 展望
參考文獻(xiàn)
作者簡歷
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2015年中國惡性腫瘤流行情況分析[J]. 鄭榮壽,孫可欣,張思維,曾紅梅,鄒小農(nóng),陳茹,顧秀瑛,魏文強(qiáng),赫捷. 中華腫瘤雜志. 2019 (01)
[2]天然產(chǎn)物來源多糖結(jié)構(gòu)解析研究進(jìn)展[J]. 謝明勇,殷軍藝,聶少平. 中國食品學(xué)報(bào). 2017(03)
[3]東方栓孔菌子實(shí)體營養(yǎng)成分與生物活性物質(zhì)分析[J]. 鄭義,趙節(jié)昌,李勇,張格言,馮佳男. 食品科學(xué). 2016(10)
[4]多糖的硫酸化修飾及其結(jié)構(gòu)與生物活性關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 謝明勇,王之珺,謝建華. 中國食品學(xué)報(bào). 2015(02)
[5]Alcoholic liver disease: Treatment[J]. Ki Tae Suk,Moon Young Kim,Soon Koo Baik. World Journal of Gastroenterology. 2014(36)
[6]Oxidative stress as a crucial factor in liver diseases[J]. Halina Cichoz-Lach,Agata Michalak. World Journal of Gastroenterology. 2014(25)
[7]Isolation,Purification and Bioactivities of Polysaccharides from Irpex lacteus[J]. ZHANG Na 1,LIU Yan 1,LU Jia-hui 1,WANG Juan 1,YANG Shuang 1,ZHANG Nan 1,MENG Qing-fan 1* and TENG Li-rong 1,2* 1.College of Life Science,Jilin University,Changchun 130012,P.R.China;2.Department of Chemistry and Pharmacy,Zhuhai College of Jilin University,Zhuhai 519041,P.R.China. Chemical Research in Chinese Universities. 2012(02)
[8]天然產(chǎn)物活性多糖結(jié)構(gòu)與功能研究進(jìn)展[J]. 謝明勇,聶少平. 中國食品學(xué)報(bào). 2010(02)
[9]中國多孔菌名錄[J]. 戴玉成. 菌物學(xué)報(bào). 2009(03)
[10]Structure of polysaccharides from mycelium and culture medium of Phellinus nigricans using submerged fermentation[J]. LI Xia, JIAO LiLi, ZHANG Xu, TIAN WenMin, CHEN Shan & ZHANG LiPing School of Life Sciences, Northeast Normal University, Changchun 130024, China. Science in China(Series C:Life Sciences). 2008(06)
本文編號:3706698
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